PROTEÍNAS TOTALES

PROTEÍNAS TOTALES
Método Colorimétrico
Fabricante: RAL, TÉCNICA PARA EL LABORATORIO, S.A.
Av. Mare de Déu de Montserrat 51
08970 Sant Joan Despí - España
IVD
PARA DIAGNOSTICO IN VITRO
CONSERVAR A 2-8ºC
PROCEDIMIENTO:
Existen aplicaciones para los principales sistemas automáticos.
Longitud de onda: 540 nm
Paso óptico: 1 cm
Temperatura: T ambiente (20-25ºC) / 37ºC
Reacción: punto final
Medida: contra blanco
CONSULTAR INSTRUCCIONES
REF
Blanco
Std/Muestra
Agua destilada
Reactivo
Cont.
Referencias:
GN 46125:
GN 46500:
Presentaciones:
6 x 25 mL reactivo
6 x 100 mL reactivo
GN 4615000:
5 x 50 ml reactivo*
1000 µL
Pipetear en cubetas, mezclar e incubar durante 5 minutos. Leer la absorción antes
de 60 minutos frente al blanco de reactivo.
(* para autoanalizadores DIRUI)
PRINCIPIO DEL METODO:
El reactivo Gernon de Proteínas Totales determina la concentración de proteínas
en suero o plasma mediante método Biuret. Las proteínas junto a los iones de
cobre forman un complejo de color azul-violeta en solución alcalina. La
absorbancia del color es directamente proporcional a la concentración de las
proteínas.
SIGNIFICACIÓN CLINICA:
La medición de las proteínas totales es un test muy útil en diversas enfermedades.
Puede detectarse un decremento de la concentración de proteínas totales por una
síntesis defectuosa de proteínas en el hígado, por pérdida de proteínas debido a
un mal funcionamiento renal, mala absorción intestinal o deficiencia nutricional.
Elevados niveles de proteínas pueden deberse a enfermedades inflamatorias
crónicas, cirrosis hepática y episodios de deshidratación.
CALCULO:
Con calibrador o standard:
C muestra = ∆Abs Muestra/ ∆Abs Std x C std
∆Abs=[(A2-A1) muestra o standard] – [(A2-A1) blanco]
CALIBRADORES Y CONTROLES:
Se recomienda el uso del multicalibrador Biocal (GN 90999) para calibrar la
técnica.
Se recomienda el uso de los controles Gernorm (GN 90998) y Gerpath (GN 90997)
para controlar a dos niveles la técnica.
CARACTERÍSTICAS DEL METODO:
Rango de medida:
Pueden determinarse concentraciones de proteínas totales entre 0.20 y 15 g/dL. Si
los valores exceden el límite máximo, debe diluirse la muestra en solución salina
(1+1) y multiplicar el resultado obtenido por 2.
Especificidad / Interferencias:
Hemoglobina y lipemia.
Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
determinación de las proteínas.
REACTIVOS:
Se encuentra listo para el uso.
Reactivo:
Tartrato sódico-potásico:
Sulfato de Cobre (II)
Yoduro de Potasio
Yoduro sódico
20 µL
1000 µL
Std/Muestra
20 µL
4.2 g/L
3.03 g/L
0.83 g/L
15 g/L
CONSERVACIÓN:
El reactivo es estable hasta fecha de caducidad si se mantiene a 2-8ºC, protegido
de contaminaciones. No debe congelarse.
El reactivo debe estar libre de turbidez y de partículas. La absorbancia a 540 nm
debe ser inferior a 0.200.
PRECAUCIONES EN EL MANEJO:
Corrosivo (C): R35: provoca quemaduras graves.
Sulfato de cobre (II): peligroso para el medio ambiente (N): R50/53: nocivo para
organismos acuáticos, puede provocar a largo plazo efectos negativos en el medio
ambiente acuático.
S22: no respirar el polvo. S60: Elimínese el producto y su recipiente como residuo
peligroso. (S61) Evitar vertidos al medio ambiente. Consultar las fichas de
seguridad.
Deben tomarse las precauciones necesarias en el uso de reactivos de laboratorio
clínico.
Deben seguirse las disposiciones locales para la gestión de residuos.
Sensibilidad / Límite de detección:
El límite inferior de detección es 1 g/dL.
Precisión intra ensayo (n=20):
Muestra 1 (g/dL): media: 5.1, SD: 0.04, CV: 0.88%
Muestra 2 (g/dL): media: 9.6, SD: 0.08, CV: 0.90%
Precisión inter ensayo (n=20):
Muestra 1 (g/dL): media: 5.2, SD: 0.06, CV: 1.23%
Muestra 2 (g/dL): media: 9.7, SD: 0.14, CV: 1.43%
Comparación con otros métodos:
Se han analizado 50 muestras utilizando el reactivo de Gernon (y) y otro de un
fabricante de la competencia (x).
La correlación ha sido: r= 0.992
La relación ha sido: y = 1.016 x – 0.126
VALORES NORMALES:
Adultos:
6.6-8.3 g/dL
Recién nacidos:
5.2-9.1 g/dL
BIBLIOGRAFÍA:
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
MUESTRA:
Suero o plasma.
Estabilidad: 4 semanas a 2-8ºC.
Deben descartarse muestras contaminadas.
Tel: (+34) 93 480 80 47
IU/GN/46125/R2/0612
Fax: (+34) 93 373 00 92
e-mail: ral@ral-sa.com
web: www.ral-sa.com
TOTAL PROTEIN
Colorimetric Method
Manufacturer: RAL, TÉCNICA PARA EL LABORATORIO, S.A.
Av. Mare de Déu de Montserrat 51
08970 Sant Joan Despí – (Barcelona) Spain
IVD
FOR IN VITRO DIAGNOSTIC USE
STORE AT 2-8ºC
PROCEDURE:
Application sheets for automated systems are available on request.
Wavelength: 540 nm
Optical path: 1 cm
Temperature: Room temperature (20-25ºC) / 37ºC
Reaction: end point
Measurement: against reagent blank
READ INSTRUCTIONS
REF
Blank
Std/Sample
Distilled water
Reagent
Cont.
Reference:
GN 46125:
GN 46500:
Package:
6 x 25 mL reagent
6 x 100 mL reagent
GN 4615000:
5 x 50 mL reagent*
Std/Sample
20 µL
20 µL
1000 µL
1000 µL
Pipette into cuvettes, mix and incubate for 5 minutes. Read absorbance against
the reagent blank within 60 minutes.
(*for DIRUI autoanalyzers)
PRINCIPLE:
Gernon Total Protein reagent quantifies the concentration of proteins in serum or
plasma by Biuret method. Together with copper ions, proteins form a violet blue
color complex in alkaline solution. The absorbance of the color is directly
proportional to the concentration.
SUMMARY:
Measurement of total proteins is a useful test in a variety of disorders. Decreased
total protein concentrations can be detected in defective protein synthesis in the
liver, protein loss due to impaired kidney function, intestinal malabsorption or
nutritional deficiency. Elevated protein levels occur in chronic inflammatory
disorders, liver cirrhosis and dehydration.
REAGENTS:
Ready to use.
CALCULATION:
With standard or calibrator:
C sample = ∆Abs Sample/ ∆Abs Std x C std
∆Abs=[(A2-A1) sample or standard] – [(A2-A1)
blank]
CALIBRATORS AND CONTROLS:
It is recommended to use the multicalibrator Biocal (GN 90999) to calibrate the
method.
It is recommended the use of the controls Gernorm (GN 90998) and Gerpath (GN
90997) to control at two levels the method.
PERFORMANCE CHARACTERISTICS:
Measuring range:
The test has been developed to determine total protein concentrations within a
measuring range from 0.20 to 15 g/dL. When values exceed this ranges samples
should be diluted 1+1 with NaCl solution (9 g/L) and the result multiplied by 2.
Specificity / Interferences:
Reagent:
Potassium sodium tartrate
Copper sulphate
Potassium iodide
Sodium iodide
4.2 g/L
3.03 g/L
0.83 g/L
15 g/L
STORAGE:
The reagents are stable up to the end of the indicated month of expiry, if stored at
2-25ºC and contamination is avoided. Do not freeze the reagents.
The reagent must be free of turbidity and particles. The blank absorbance at 540
nm should be lower than 0.200.
WARNINGS AND PRECAUTIONS:
Corrosive (C): R35: causes severe burns.
Copper (II) sulphate: environmentally dangerous (N): R50/53: harmful to aquatic
organisms, may cause long-term adverse effects in the aquatic environment.
S22: do not breathe dust. S60: this material and its container must be disposed of
as hazardous waste. S61: avoid release to the environment.
Please refer to the safety data sheets and take the necessary precautions for the
use of laboratory reagents.
Please refer to local requirements for waste management.
Hemoglobin and lipemia.
A list of drugs and other interfering substances with total protein determination
has been reported.
Sensitivity / Limit of detection:
The lower limit of detection is 1 g/dL.
Precision intra-assay (n=20):
Sample 1 (g/dL): mean: 5.1, SD: 0.04, CV: 0.88%
Sample 2 (g/dL): mean: 9.6, SD: 0.08, CV: 0.90%
Precision inter-assay (n=20):
Sample 1 (g/dL): mean: 5.25, SD: 0.06, CV: 1.23%
Sample 2 (g/dL): mean: 9.7, SD: 0.14, CV: 1.43%
Method comparison:
A comparison of Gernon Total protein (y) with a commercially available test (x)
using 50 samples gave following results:
y = 1.016 x – 0.126
r=0.992
REFERENCE RANGE:
Adults:
Newborns:
6.6-8.3 g/dL
5.2-9.1 g/dL
LITERATURE:
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
SPECIMEN:
Serum or plasma.
Stability: 4 weeks at 2-8ºC.
Discard contaminated specimens.
IU/GN/46125/R2/0612/EA
Tel: (+34) 93 480 80 47
Fax: (+34) 93 373 00 92
e-mail: ral@ral-sa.com
web: www.ral-sa.com