Técnicas de tinción: - Tinciones totales: morfología ¾Azul de metileno ¾Rosa de Bengala ¾Giemsa (acrosoma) - Tinciones vitales: vivos y muertos ¾Tripán azul ¾Eosina-nigrosina ¾Triple tinción: tripán azul, Bismark marrón, osa Bengala e ga a (ta (también b é ac acrosoma) oso a) Rosa 61 Ficha manual o informatizada de cada verraco Número del verraco: Nombre del verraco: raza: Programa de vacunación + tratamientos: fecha de nacimiento: fecha de entrada en cuarentena: fecha de entrada en sala cubrición: Cantidad calidad del semen Porcentaje de anormales: Gotas prox. Flagelos torcidos % TOTAL (máximo 20%) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 62 Interpretación de resultados – origen de un problema % Vivos < 70% Motilidad <3 Aglutin. Impurezas Gotas Flagelos torcidos Acrosomas anormales Estrés térmico Estrés térmico Estrés térmico Estrés térmico Estrés térmico Estrés térmico Fiebre Fiebre Fiebre Fiebre Fiebre Fiebre Recogidas R id muy seguidas Recogidas R id muy seguidas Recogidas R id muy seguidas Recogidas R id muy seguidas Alim. Alim. Alim. Alim. Alim. Alim. Enf. Enf. Enf. Enf. Enf. Mala filt filtración ió Mala filt filtración ió Polvo Contam. del prepucio Contam. bacteriana Temp Temp. durante el examen 63 2. Técnicas de contrastación utilizadas para valorar la calidad del semen (examen especial) (en lab. especializado): ´ Mi Microscópicos: ó i « Viabilidad espermática e integridad de membranas plasmáticas y acrosomales: ² ² Tinción específica con fluorocromos (ver foto) Pruebas de resistencia: ¹ ¹ ¹ « ´ Test de resistencia osmótica (ORT) (ver foto) y test hipo-osmótico (HOST) (ver foto) Test de termorresistencia Test de conservación Integridad del ADN (grado de fragmentación de la cadena de ADN del espermatozoide): Test SCD (Sperm Choromatin Dispersion) (ver foto) Bioquímicos: « Espermatozoides ² ² ² ² ² « Integridad de proteínas celulares y plasmáticas Peroxidación lipídica p Determinación de acrosina Actividad Aspartato amino transferasa (ATT) Estabilización de la cromatina Calidad del plasma seminal: marcadores de la funcionalidad de las glándulas accesorias y epidídimo ² ² ² ² ² ² ² ácido cítrico, fructosa, prostaglandinas, calcio, zinc, alfa-glucosidasa pH H Presión osmótica Fuerza iónica Proteínas totales Enzimas: actividad fosfatasa ácida y alcalina, antitripsina Péptidos 64