Aumento de la patogenicidad de baculovirus mediante

Aumento de la infectividad de baculovirus mediante la expresión de
una desacetilasa de quitina intestinal
JAKUBOWSKA, A1,2, CACCIA, S1, GORDON K, H3, FERRÉ, J1, HERRERO, S1
1Departmento
de Genética, Universitat de València, Dr. Moliner 50, 46-100, Burjassot, Spain
of Biological Control and Quarantine, Institute of Plant Protection, Miczurina 20, Poznan, 60-318, Poland
3CSIRO Entomology, PO Box 1700, Canberra, ACT 2601, Australia
2Department
Unas pocas ESTs (del inglés, Expressed Sequence Tags) representando genes del intestino de
las larvas de Helicoverpa armígera Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) regulados tras la infección con su
baculovirus (HaSNPV) fueron identificadas mediante el empleo de micromatrices de ADN. De entre
estos ESTs algunos mostraban una elevada similitud a genes que codifican para proteínas con
dominios de desacetilasas de quitina. Mediante técnicas de biología molecular se obtuvo la secuencia
entera del gen que incluía dichas ESTs (HaCDA5a) confirmando su pertenencia al grupo de las
desacetilasas de quitina.
La presencia de la HaCDA5a en la membrana peritrófica (MP) del intestino, conjuntamente con
su regulación negativa (descenso en su expresión) tras la infección mediante baculovirus nos llevó a
hipotetizar sobre el posible rol de esta proteína en aumentar la permeabilidad de la MP a través de su
actividad desacetilasa. Para confirmar esta hipótesis, construimos un baculovirus recombinante que
expresaba HaCDA5a en células de insecto y analizamos su influencia sobre la permeabilidad de la MP
así como sobre su efecto en la actividad de baculovirus. Los experimentos con la HaCDA5a
parciamente purificada mostraron su capacidad de aumentar la permeabilidad de la MP in vitro.
Bioensayos frente a larvas de Spodoptera exigua Hübner y Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera:
Noctuidae) revelaron que, cuando se administraban oralmente, los baculovirus recombinantes
expresando dicha proteína eran más infectivos y virulentos que los baculovirus que no lo expresaban.
Sin embargo este efecto no se observaba cuando el virus era administrado mediante la inyección en la
hemolinfa del las larvas. Estos resultados confirmaron la hipótesis planteada además de revelar la
posibilidad de mejorar las características de baculovirus a través de la manipulación de los genes del
huésped.
Palabras clave: Nucleopoliedrovirus, AcMNPV, membrana peritrófica, quitina, baculovirus, virulencia