Reacciones catalizadas por enzimas Variables de la ecuación de velocidad Variable dependiente: velocidad inicial Variables independientes: A) Concentración de enzima B) Concentración sustrato Concentración de enzima Concentración sustrato Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der) Bajo qué condiciones aplica la ecuación de Michaelis-Menten Velocidad inicial No añadir producto al medio de ensayo Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el periodo de tiempo en que se mide la reacción Representación gráfica de la ecuación de MichaelisMenten Transformación de la ecuación de MichaelisMenten Paramétros cinéticos Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada Unidades Velocidad máxima Constante catlítica (kcat) Constante de Michaelis-Menten (Km) Constante de especificidad Factores que afectan la velocidad Concentración de sustrato o sustratos (cofactores) Concentración de enzima Inhibidores Activadores pH Temperatura Determinación de los parámetros cinéticos Regulación de la actividad enzimática por union a la enzima de ligandos que no son sustratos Tipos de Inhibidores Sólo se afecta la Km Afecta la Km y Vmax