Práctica nº7 Práctica 7: FISIOLOGÍA DE LA HEMOSTASIA Tiempo de protrombina o tiempo de Quick: La parte más importante de la coagulación es el paso del fibrinógeno a fibrina y éste depende de la producción de trombina. La trombina se genera a partir de la protrombina. El tiempo en el que la protrombina se convierte en trombina se llama tiempo de protrombina o tiempo de Quick, y es unos de los estudios más realizados antes de realizar una operación quirúrgica: un tiempo de protrombina demasiado largo no permite realizar la operación. Exploración de la vía extrínseca: Es el tiempo necesario para la coagulación de un plasma recalcificado en presencia de un exceso de tromboplastina hística. Material: • Plasma pobre en plaquetas a partir de sangre recogida en citrato sódico 0,1 mol/L en proporción 1 volumen de citrato 9 volúmenes de sangre. • Suspensión de tromboplastina hística. • Aparato de incubación clot 1 A. • Imán activador del coagulo. • Pocillos especiales para colocar muestra en incubación. Método: 1. Realizamos una extracción sanguínea con una jeringa especial que contiene el anticoagulante citrato. No podemos utilizar EDTA como anticoagulante incluso siendo más preciso, ya que su agente anticoagulante se basa en la captación de los iones calcio, y para realizar el tiempo de Quick los necesitamos libres. Práctica nº7 2. Una vez recogida la muestra, centrifugamos, puesto que necesitamos saber la coagulación sin que interfieran las plaquetas. 3. Pipeteamos 100 lambas de plasma (fase con fibrina pero sin hematíes ni plaquetas), que se localiza en la parte superior tras la coagulación. 4. Procedemos a incubar la nuestra a una temperatura de 37ºC con tal de simular las condiciones fisiológicas del cuerpo. 5. Tras 10 minutos de incubación inserimos un imán y añadimos tromboplastina, que es un activador del coagulo, y calculamos el tiempo de coagulación, que se corresponde al momento en que el imán, por encontrarse dentro del coagulo, deja de rotar. Los valores normales son 12-14 pero al hacer la práctica más rápido (sin la hora de reposo y la media hora de incubación) obtendremos valores más elevados (entre 18 y 25). Interpretación: Si la tromboplastina es adecuada, el valor correspondiente al plasma testigo debe variar entre 12 y 14 segundos. Valores de referencia: Tiempo de protombina: Actividad de la protombina: 12.00” - 14.00” 110% - 85%