Inst. Detecccion de anticuerpos irregulares
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SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 1. OBJETIVO: Realizar un screening de anticuerpos irregulares en el suero/plasma de aquellos usuarios que el médico les solicite transfusión de glóbulos rojos, coombs indirecto o envíen solicitud para pruebas cruzadas con el fin de detectar anticuerpos de significancia clínica. 2. RESPONSABILIDADES: Responsable ejecución. Tecnólogo Médico de la Sección de Inmunohematología tiene la responsabilidad de ejecutar las actividades descritas en el documento. Responsabilidad del encargado. Tecnólogo Médico de la Sección de Inmunohematología es el responsable de velar por el estricto cumplimiento del documento, como también, de efectuar y proponer las modificaciones que en la práctica se precise. Responsable del monitoreo y evaluación: Encargado de Calidad del SCR Banco de Sangre es responsable de revisar los registros, el logro de indicadores y la evaluación periódica. 3. TERMINOS Y DEFINICIONES Anticuerpos irregulares: Se le llama anticuerpo irregular porque en contraste con los anticuerpos del sistema ABO, el cual se encuentra regularmente en todos los individuos sanos, estos anticuerpos solo se encuentran en algunos individuos. Screening: es una estrategia aplicada para detectar anticuerpos presente en el plasma de los individuos. TM: Tecnólogo Médico. TPM: Técnico Paramédico. GSL: Glóbulos sin leucocitos. PBS: (phosphate buffer saline) = Buffer fosfato salino. LISS: (low ionic strengh-saline) = Solución salina de baja fuerza iónica. IgG: Inmunoglobulina gamma. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 1de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 4. REFERENCIAS. Manual de Técnicas de Laboratorio – Banco de Sangre – Universidad de Tarapacá 5. DESARROLLO. 5.1 Descripción. 1. Detección de anticuerpos irregulares en tarjetas con gel. a) b) c) d) e) f) g) h) i) j) k) Tener dos tubos de vidrio (Khan). Marcar el primer tubo con I (uno en romano) y el segundo tubo con II (dos en romano) Dispensar en cada tubo de Khan, 500 uL de solución LISS. Colocar 5 uL de GR comercializados I en el tubo I y 5 uL de GR comercializados II en el tubo II. (Actualmente se utiliza el Panell Cell con dos células de antigenicidad conocida) Mezclar. Colocar 50 uL de cada uno de los dos tubos en un pocillo previamente marcado en la tarjeta de gel. Sobre esto, dispensar 25 uL de suero/plasma del usuario. Incubar 15 minutos a 37°C. Centrifugar por 10 minutos en centrifuga para geles. Realizar lectura: - Negativo (-) no se observa aglutinación en la columna. - Positivo + se observa aglutinación en la columna. NOTA: la positividad se informa con cruces de acuerdo a la intensidad +, ++, +++, ++++. Interpretar de acuerdo a la lectura: - Negativo (-) ausencia de anticuerpos - Positivo + presencia de anticuerpos 2. Detección de anticuerpos irregulares en tubo a) b) c) d) Tener dos tubos de vidrio (Khan). Marcar el primer tubo con I (uno en romano) y el segundo tubo con II (dos romano) Dispensar en cada tubo de Khan, 500 uL de solución LISS. Colocar 5 uL de GR comercializados I en el tubo I y 5 uL de GR comercializados II en el tubo II. (Actualmente se utiliza el Panell Cell con dos células de antigenicidad conocida) e) Mezclar. f) En otros tubos de Khan previamente marcados, depositar dos gotas de suero/plasma Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 2de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 del usuario. g) Colocar 1 gota de la mezcla de GR comercializados con la solución LISS en los tubos respectivos que contienen suero o plasma (punto f). Incubar 20 minutos a 37°C. Lavar con solución PBS o suero fisiológico tres veces cada tubo. En el último lavado, eliminar todo el sobrenadante. Agregar 2 gotas de antisuero IgG (Antisuero de Coombs). Centrifugar a 3500 rpm por 15 segundos. Realizar lectura: - Negativo (-) no se observa aglutinación en el fondo del tubo. - Positivo + se observa aglutinación en el fondo del tubo. NOTA: la positividad se informa con cruces de acuerdo a la intensidad +, ++, +++, ++++. l) Interpretar de acuerdo a la lectura: - Negativo (-) ausencia de anticuerpos - Positivo + presencia de anticuerpos h) i) j) k) l) m) * Finalmente se registran los resultados de los Anticuerpos Irregulares realizados en Solicitud de Transfusión (SGC HJNC AT BS R Nº001), Hoja Transfusional (SGC HJNC AT BS R Nº002), Libro de Transfusiones (SGC HJNC AT BS R Nº003) y/o en Libro de Pruebas Cruzadas y Anticuerpos Irregulares (SGC HJNC AT BS R Nº026). 5.2 Materiales y equipamiento. Tubos de vidrio (Khan). Tarjetas en gel (Bio – Type AHG). Incubadora a 37°C (A&B). Centrifuga para tarjetas de gel (Horizontal Centrifuge Modelo 755). Solución de LISS. Suero del paciente o donante de sangre. Glóbulos rojos comercializados (Panell CELL). Antisuero Poliespecífico IgG-Anti complemento (suero de Coombs). Solución de PBS. Centrífuga para tubos Khan. Pipetas plásticas Pasteur. Guantes. Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 3de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 5.3 Indicadores de Monitoreo y Evaluación. Nombre: Porcentaje de screening de anticuerpos irregulares realizados en usuarios transfundidos con GSL con solicitud de transfusión de carácter “urgente”. Indicador: Número de exámenes de anticuerpos irregulares en usuarios transfundidos con GSL con carácter de “urgente” Número total de usuarios transfundidos con GSL con carácter de” urgente” en el mismo período Fuente: Solicitud de Transfusión. Periodicidad: Mensual X 100 Umbral de cumplimiento : 100 % Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 4de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 5.4 Flujograma: Anticuerpos irregulares (Técnica en gel) TM marca ambos tubos con I y II romanos TM coloca en cada tubo 500 uL de LISS TM lee Interpretar Tener dos tubos Khan TM agrega 5 uL de GR comercializados I y II respectivamente TM centrifuga en equipo especial para tarjeta de geles por 10 minutos Mezclar TM incuba 20 minutos a 37°C TM coloca de esta mezcla 50 uL en el pocillo previamente marcado en la tarjeta de gel TM agrega 25 uL de suero/plasma del usuario GR: Glóbulos Rojos TM: Tecnólogo Médico LISS: Solución Salina de Baja Fuerza Iónica Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 5de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 Anticuerpos irregulares (Técnica Tubo) Disponer de dos tubos Khan marcados con I y II para depositar dos gotas de suero/ plasma del usuario TM marca ambos tubos con I y II romanos TM coloca en cada tubo 500 uL de LISS TM agrega dos gotas de Antisuero IgG Tener dos tubos Khan TM agrega 5 uL de GR comercializados I y II respectivamente TM elimina sobrenadante en último lavado TM centrifuga a 3500 rpm por 15 segundos TM agrega una gota de esta mezcla a cada tubo Khan Mezclar TM lava con PBS (realizar este paso tres veces) TM lee TM incuba 20 minutos a 37°C Interpretar GR: Glóbulos Rojos TM: Tecnólogo Médico PBS: Buffer Fosfato Salino LISS: Solución Salina de Baja Fuerza Iónica Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 6de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 6. REGISTROS. Nombre del Registro Identificación Llenado Acceso Mantención Almacenamiento Solicitud de Transfusión SGC HJNC AT BS R Nº001 TM, TPM. Personal del SCR Banco de Sangre 5 años Sección de Inmunohematología Nombre del Registro Identificación Llenado Acceso Mantención Almacenamiento Hoja transfusional SGC HJNC AT BS R Nº002 TM, TPM. Médicos, TM, Profesionales o técnicos de enfermería, Profesionales o técnicos de matronería, TPM de los diferentes servicios. 3 años Ficha del receptor Nombre del Registro Identificación Llenado Acceso Mantención Almacenamiento Libro de transfusiones SGC HJNC AT BS R Nº003 TM, TPM. Personal del SCR Banco de Sangre 3 años Sección de Inmunohematología Nombre del Registro Libro de Pruebas Cruzadas y Anticuerpos Irregulares SGC HJNC AT BS R Nº026 TM, TPM. Personal del SCR Banco de Sangre 3 años Sección de Inmunohematología Identificación Llenado Acceso Mantención Almacenamiento Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 7de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES 7. DISTRIBUCIÓN. Dirección. SCR Banco de Sangre. Oficina de Asesoría Jurídica. Oficina de Calidad y Seguridad el paciente. 8. MODIFICACIONES. Párrafo que se modifica Término y Definiciones Descripción Registros Página 1 3 7 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Fecha Junio 2013 Junio 2013 Junio 2013 Pág 8de 9 SERVICIO DE SALUD ARICA Y PARINACOTA HOSPITAL EN RED “DR. JUAN NOE C.” BANCO DE SANGRE Y UNIDAD DE MEDICINA TRANSFUSIONAL INSTRUCTIVO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES SGC HJNC AT BS I N° 002 Fecha Última Revisión: Junio 2013 Próxima Revisión: Diciembre 2017 Versión 3 Versiones impresas de este documento, son No Controladas y sólo para usarse como referencia. La versión vigente se encuentra en sitio web del Hospital www.hjnc.cl. Pág 9de 9
