INSTRUCCIONES DE USO Revisión 0 ENE 2011 MEDIO LOWESTEIN-JENSEN Medio Medio Medio Medio Medio Medio Lowestein Jensen Presentación Caja 20 tubos Catalogo 4100 Lowestein Jensen (Tubo Largo) Presentación Caja 20 tubos Catalogo 4125 Lowestein Jensen con Piruvato Presentación Caja 20 tubos Catalogo 4120 Lowestein Jensen con Piruvato (Tubo Largo) Presentación Caja 20 tubos Catalogo 4126 de Coletsos Presentación Caja 20 tubos Catalogo 4121 de Coletsos Presentación (Tubo Largo) Caja 20 tubos Catalogo 4127 USO PREVISTO Los Medios Lowestein Jensen y Lowestein Jensen con piruvato y Coletsos son utilizados para el cultivo de Micobacterium tuberculosis y otras especies de Micobacterias. MEDIO LOWESTEIN JENSEN Catálogos 4100 y 4125 FORMULA en gramos PARA 1 LITRO DE MEDIO Almidón de Patata 18,60 Glicerol 7,0ml L-asparraguina 2,23 Huevos enteros 620 ml Fosfato monopotasico 1,55 Agua destilada 373 ml Citrato sódico 0,37 Sulfato magnésico Verde Malaquita 0,25 0,15 Final pH 7.2 ± 0.2 a 25ºC Color preparado: Verde pistachio MEDIO LOWESTEIN JENSEN CON PIRUVATO Catálogos 4120 y 4126 FORMULA en gramos PARA 1 LITRO DE MEDIO Almidón de Patata 18,60 Glicerol 7,0ml L-asparraguina 2,23 Huevos enteros 620 ml Fosfato monopotasico 1,55 Agua destilada 373 ml Citrato sódico 0,37 Sulfato magnésico Verde Malaquita 0,25 Piruvato sódico 3,0 0,15 Final pH 7.2 ± 0.2 a 25ºC Color preparado: Verde pistacho 1 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com MEDIO DE COLETSOS Catálogos 4121 y 4127 FORMULA en gramos PARA 1 LITRO DE MEDIO Almidón de Patata 18,60 Glicerol 7,0ml L-asparraguina 2,23 Huevos enteros 490 ml Sulfato magnésico 0,15 Yemas solas 123 ml Fosfato monopotasico 1,55 Agua destilada 380 ml Citrato sódico 0,37 Piruvato sódico 3,0 Azul de Tornasol 0,25 Final pH 7.0 ± 0.2 a 25ºC Color medio Preparado.- Verde azulado PRESENTACIONES Las presentaciones de Medio Lowestein-Jensen catálogos 4100, 4125, Medio Lowestein-Jensen con Piruvato catálogos 4120 y 4126 y Medio de Coletsos catálogos 4121y 4127. Medios preparados listos para su uso. PRINCIPIO Y APLICACION Los Medios Lowenstein-Jensen y Coletsos, son formulas relativamente sencillas que requieren enriquecimiento para favorecer el crecimiento de las micobacterias. La mezcla de huevo y glicerol se añade antes del proceso de espesamiento. Dichas sustancias proporcionan los ácidos grasos y proteína necesarios para el metabolismo de las micobacterias, (en el caso del Medio Coletsos más enriquecido como se aprecia en la formula). La coagulación de la albumina de huevo durante la tindalización proporciona un medio solido para la inoculación. Se añade asparragina para favorecer el inicio del crecimiento y el aumento de la velocidad del mismo. La inhibición del resto de bacterias se logra mediante la presencia del colorante Verde Malaquita en el caso del Lowestein-Jensen y azul de tornasol en el caso del Coletsos. La adición de piruvato favorece el desarrollo de M. Bovis No utilizar los tubos si muestran evidencia de contaminación microbiana, decoloración, deshidratación o cualquier otro signo de deterioro. TIPO DE MUESTRAS Esputos, piel etc… En las muestras clínicas puede haber otros microorganismos patógenos. Para la manipulación de todos los elementos contaminados con sangre u otros líquidos corporales deben seguirse las “Precauciones estándar y las directrices del Centro. Antes de desecharlos, esterilizar en autoclave los recipientes para muestras y cualquier otro material contaminado. La recolección, el manejo y el procesamiento de las muestras se llevan a cabo según Recomendaciones y Estándares en Microbiología Clínica. PROCEDIMIENTO 1.- Inocular en la superficie del medio lowestein Jensen 2.- Incubar en condiciones aeróbicas a 35 ± 2°C durante 28 días . 3.- Lectura e interpretación de los resultados. M. tuberculosis.- Produce colonias amarillas y granulares M. fortuitum.- Produce colonias crema (que pueden mostrar un tono verdoso debido a la absorción del colorante) M. kansasii.- Produce colonias amarillo limón y lisas M. bovis.- Produce colonias amarillas y secas 2 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com CONTROL MICROBIOLOGICO (MEDIO LOWESTEIN-JENSEN) Los siguientes resultados fueron obtenidos en el desarrollo del medio, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados durante 28 días. Microorganismos Mycobacterium tuberculosis H37RV Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 Desarrollo Bueno Bueno Bueno CONTROL MICROBIOLOGICO (MEDIO LOWESTEIN-JENSEN CON PIRUVATO Y COLETSOS) Los siguientes resultados fueron obtenidos en el desarrollo del medio, después de incubación a temperatura de 35 ± 2°C y observados durante 28 días. Microorganismos Mycobacterium tuberculosis H37RV Mycobacterium fortuitum ATCC 6841 Mycobacterium kansasii ATCC 12478 Mycobacterium bovis ATCC 19015 Desarrollo Bueno Bueno Bueno Bueno BIBLIOGRAFIA Schaedler, R.W. Dubos, R. and Costello, R., 1965. The Development of the Bacterial Flora in the Gastrointestinal Tract of Mice. J. Exp. Brewer. JAMA, 115. 1940. Vera. J. Bact. 47:59, 1944. Pittman. J. Bact. 51:19, 1946 Diagnostico in vitro Solo para uso profesional Ver indicaciones generales de uso y ficha de seguridad www.condalab.com ALMACENAMIENTO Tubos preparados almacenar entre 2-8°C Utilizable hasta la fecha de caducidad. 8ºC 2ºC Laboratorios Conda S.A C/ La Forja 9 28850 Torrejón de Ardoz Madrid, España 3 LABORATORIOS CONDA, S.A. www.condalab.com