reporte 3 biolo, ANÁLISIS QUÍMICO DE LOS COMPONENTES DEL

Nombre: Oscar Alessandro Reyes Lico
Carnet: 09565
Fecha: 11/02/2009
Sección: 82
Laboratorio de Biología
Pasaporte # 3: ANÁLISIS QUÍMICO DE LOS COMPONENTES DEL
PROTOPLASMA
• Introducción:
Este reporte trata sobre algunas pruebas que se utilizan para el análisis químico
de los componentes del protoplasma. Se hablará sobre los experimentos que se
hicieron en el laboratorio, y comprobaremos dichas muestras.
Hay algunas pruebas que utilizan científicos y ciertas personas para poder
observar si ciertos componentes o muestras contienen o no, sustancias que a
ellos les interesan como pueden ser las proteínas, grasas, almidón, etc. Para cada
sustancia hay una prueba y es lo que miraremos a continuación.
Algunas pruebas son: la prueba de Biuret en la cual se pueden observar mejor las
proteínas; la prueba de Sudán III, en la cual se observan las grasas; la prueba de
Benedict, que se pueden observar los azúcares; la prueba de Lugol que se puede
observar el almidón; la prueba de solubilidad que sirve para ver si ciertas
sustancias son solubles con otras. Estas pruebas son las que mencionaremos en
este reporte.
Hay muestras que no mencionaremos en este reporte pero si existen y se aplican,
como podemos mencionar: la prueba de ninhidrina, prueba de coagulación,
prueba de sulfato de amonio, prueba xantoprotica, prueba de los grupos SH,
prueba de sakaguchi, prueba de Hopkins-Cole, Prueba de Millón, prueba de
Molish, prueba de Barfoed, prueba de Bial o de Orcinol-HCI, y otras más.
(http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/gmendez/manuales%20PDF/EXPERIMENT
O%204%20IDENT%20CARB%2006-05.pdf)
• Objetivos:
o Conocer las distintas técnicas que hay para el análisis químico del
protoplasma y saber para qué sirve cada una.
o Verificar que funcionen las pruebas que hay para el análisis químico
del protoplasma (prueba de Biuret, prueba de Solubilidad, prueba de
Sudán III, prueba de Benedict y prueba de Lugol).
o Conocer cómo actúan ciertas sustancias cuando están en contacto
con otras.
o Poder observar cómo se disuelve la clorofila de una planta y si esa
tiene almidón.
o Poder observar donde se encuentra el almidón y las grasas de una
papa, un güisquil y una cebolla, y cuáles son las diferencias de cada
uno.
• Desarrollo:
El primer grupo hizo la prueba de Biuret, que es la prueba para observar las
proteínas. En esta prueba este grupo utilizó un huevo, el cual le sirvió para utilizar
la albúmina que es la proteína que se encuentra en la clara de huevo. Este grupo
agrego en su tubo de ensayo 1ml. de clara de huevo y 1 ml. de agua de tubo.
Después de hacer esto agregaron 5 gotas de solución Biuret y agitaron el tubo.
El siguiente grupo fue el nuestro, y se hizo la prueba de Solubilidad y la prueba de
Sudán III, que es la prueba para observar los lípidos. Para la prueba de solubilidad
se necesitó Agua destilada, Alcohol (Etanol), Cloroformo, Carbonato de sodio al
5% y Ácido clorhídrico al 1%. Después de tener estas 5 sustancias se añadió 3ml.
de cada una en cada tubo y se indicó cada tubo, al concluir se colocó 5 gotas de
aceite vegetal a cada tubo y se agitó. En la siguiente prueba se añadió un poco de
Sudán III al tubo de ensayo con el agua destilada del experimento anterior y se
agitó.
El tercer grupo hizo la prueba de Benedict y la prueba de Lugol. La prueba de
Benedict nos sirve para observar los azúcares y la prueba de lugol nos sirve para
observar los almidones. En la prueba de Benedict este grupo necesitó dos tubos
de ensayo, en un tubo se agregó 3ml. de glucosa al 5% y en el otro tubo, un poco
de agua destilada. Al concluir se le agregó 5 gotas de solución Benedict a cada
tubo y se pusieron a calentar en un baño de agua de 3 a 5 minutos.
El cuarto grupo hizo el análisis de una planta para observar la presencia de
almidón. Este grupo utilizó una hoja de Coleus sp., la cual se puso en un vaso con
agua a hervir durante 3 minutos. Pasados los 3 minutos, se sacó la hoja y se puso
calentar con 10 ml. de etanol en un baño de María hasta que se disolviera la
clorofila. Después se sacó la hoja y se puso en una caja de Petri, se lavó
suavemente con agua de chorro y se le puso unas gotas de lugol sobre la hoja.
El último grupo le tocó ubicar las sustancias celulares. Para realizar esta práctica
se necesitó un güisquil, una papa y una cebolla. Primero se quitó una delgada
porción de epidermis del güisquil, se puso con una gota de agua en el
portaobjetos, se añadió una gota de lugol, se puso el cubreobjetos y se observó en
el microscopio. Luego se repitió el procedimiento, solamente que ahora con una
papa, una cebolla y el güisquil, y en vez de lugol se utilizó Sudán III.
• Observaciones y Resultados:
Técnicas de Análisis químico del protoplasma
• Grupo # 1: Proteínas
Prueba de Biuret:
Lo que se observó en el tubo de ensayo fue un líquido de color violeta, lo cual
confirma que la solución reaccionó con la albúmina y por lo tanto la prueba de
Biuret es la indicada para observar las proteínas.
• Grupo # 2: Grasas
Prueba de Solubilidad:
En esta prueba se pudo observar que las únicas sustancias que son solubles al
aceite son en el Carbonato de Sodio al 5% que tomó un aspecto como de espuma
de color blanco y el Ácido Clorhídrico al 1% que tomó un color amarillo claro. En
las demás sustancias el aceite no se disuelve, solo al agitarlo se vuelven un
montón de burbujas pero al estabilizarse queda una burbuja de aceite rodeada de
la sustancia.
Prueba de Sudán III:
En esta prueba se observó que la mezcla de Sudán III con el agua destilada y
aceite vegetal de la prueba anterior, las burbujas de aceite tomaron un color rojo
fuerte y el agua un rojo pálido, lo cual comprueba que la prueba Sudán III es la
indicada para observar las grasas.
• Grupo # 3: Azúcares
Prueba de Benedict:
En esta prueba se observó que al poner a calentar ambos tubos solo en el tubo
donde estaba la glucosa hubo efecto, se puso de color amarillo claro, y en el tubo
donde estaba el agua destilada no paso nada, lo cual comprueba que la prueba de
Benedict es la indicada para observar azúcares.
Aplicación al análisis de productos de seres vivos
• Grupo # 4: Hojas
Análisis de las hojas de una planta para la presencia de almidón:
En esta prueba se observó que al calentar la hoja con etanol en el baño de María
la clorofila se disolvió, ya que la hoja se puso un poco transparente. Al agregar
unas gotas de lugol sobre la hoja, ésta iba cambiando de color y se podía ver que
partes de la hoja tenían almidón, se pudo concluir que el almidón se encuentra
donde hay clorofila y que la prueba de lugol es la indicada para observar el
almidón.
• Grupo # 6: Alimentos
Ubicación de sustancias celulares:
En el primer experimento se pudo observar que en el güisquil había almidón pero
no se lograba ver con nitidez, se vio mejor en la papa, ya que en ella se lograban
ver los empaquetados de almidón. En el siguiente experimento a la papa, al
güisquil y la cebolla se agregó Sudán III y se logró ver las grasas en la membrana
celular, nuclear, en la mitocondria, citoplasma y otros.
• Interpretación de Resultados y Discusión:
La prueba de Biuret según la página que encontré en internet:
(http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/gmendez/manuales%20PDF/EXPERIMENT
O%204%20IDENT%20CARB%2006-05.pdf) “es una prueba general para
polipéptidos y proteínas ya que sirve para reconocer las uniones peptidicas”. En
esta página nos explica que “la positividad se manifiesta por la aparición de una
coloración violeta”. Lo que tengo duda, y lo busqué pero no lo encontré, es por qué
la sustancia agarra una coloración violeta, por qué ciertas sustancias al
combinarlas con otras agarran ciertos colores y no todos son iguales. Esta es una
duda que tal vez no se sepa o que tal vez sea por las sustancias que tienen las
distintas pruebas.
Otra cosa que me quede con inquietud fue sobre la prueba de solubilidad, ya que
algunas sustancias se disolvieron pero hubo unas que “medio” se disolvieron ya
que tomaron un color, pero quedaron burbujas de aceite, este fue el caso del HCL.
En el caso del Carbonato de Sodio también me quedo un poco de inquietud ya
que se volvió espuma y la cantidad disminuyó.
El grupo 4 analizó una hoja de una planta para la presencia de almidón. Lo que se
observó fue que la hoja no se puso en todas sus partes transparentes, y es lo que
me dio curiosidad, porque con las gotas de lugol que le agregaron se podían ver
que partes de la hoja tenían clorofila; yo pensaba que la hoja en todas sus partes
tenía clorofila, fue por eso que me creo confusión.
• Conclusiones:
o
o
o
o
o
o
Cada sustancia mezclada con alguna solución de una prueba da
como resultado la observación clara de ciertas sustancias.
Cada solución mezclada con una sustancia da como resultado un
color diferente para cada una.
Los empaquetados de almidón son más visibles en la papa que en el
güisquil, y una de las razones es que a la papa no le pega
directamente el sol por eso el almidón se queda mayormente en la
epidermis de la papa.
Cuando una solución está contaminada el experimento no sirve,
como fue el caso del grupo 1, que el biuret estaba contaminado, por
eso no les salió.
El almidón de una hoja se encuentra mayormente donde hay
clorofila.
Cuando una solución se mezcla con una sustancia la cual no es la
correcta para la solución, a la sustancia no le pasa nada.
• Bibliografía:
Villee, C. 1993. Biología. 7ma edición. McGRAW-HILL INTERAMERICANA,
México, D.F. 875 pp.
Experimento 4. Webdelprofesor.
http://webdelprofesor.ula.ve/farmacia/gmendez/manuales%20PDF/EXPERIMENT
O%204%20IDENT%20CARB%2006-05.pdf
Villee, C., Solomon, E., Martin, C., Martin D., Berg, L. y Davis, P. 1992. Biología.
2da edición. McGRAW-HILL INTERAMERICANA, México, D.F. 1404 pp.