146648 P IIoTBomccImt Se ha observado en cQlulae microbianas, al igual que en una gran r s r i e b d de cdlulae diferentes, la velocidad del cotabollsmo no viene controlada por l a ooncentrac~ibn do o~emontosnutritivos asequiblos en el entorno celular, sino por lae necesidades instantaneae -segundo a segmdode l a d l u l a , de e~aergiaen fonna de ATP. La regulaci6n d i v s r s o s nivelee, de una ruta metab6lica puede ocurrir a :La velocidad de reaccidn de cada una de lae reaccione8 enzimSticaa dependera del pH y de las aop centraoioaes intrmslulares ducto(8) y d e l o o e f a c t o r , del -trato( S), o del pm- que eon le9 elementosprimarios para l a regulacidn de l a aotividad enzimAtioa. El segundo nivel d e l c o n t r o l de las secuenciasmets bdlicas se efectb a traves de l a accibn de enzima8 r e p ladoras. Kwhos eon Lnhibidomspor e l productofinalde la secuenoir en que actúm. Adenas, algunas enzimas remado- ras eon activadas o eetimdadas por metabolitos especifi- por s u propio sustrPto. El t e r c e r n i v e l en e l que Be ej e m e l a regulacidn m 2 t a b b l i c a e s a trav6s del oontrol genetic0 de l a velocidad cos y a veces secuenaia m= de s i n t e s i s de l a enzfima. L a velocidad de tabblica determinada debedepender de l a concentracidn de la f o m activa de cada enzima en l a secuencia, la oual, a su vez, e s e l r e d t e d o de un e q u i l i b r i o e n t r e dadde s h t e s i a y de I= degradacidn. La8 h a l l a n siempre presentes en cantidades l a veloci- enzimae que se casi constantes en una determinada c 8 l u l a recibe e l nombre de enzima8 constitutivas, l o s que s o l a e n t e s i n t e t i z a n e n r e s p u e s t a s e n c i a de c i e r t o s s u s i t r a t o s a l a prs_ ae llamanenzimasinducidas. Los genes que eapec5fj.oa.n la d n t e s i s de lae enzimae indu- 'cidae se hallan generalmente bajo represibn, y entran en juego, e s d e c i r , erperimentan des-represibn,solamente cc mo respuesta a la preeencia de un agenteinductor. Una secuenciacompleta de enzima puede s e r reprimida o inducida oomo s i & m a un grupo, su s l n t e s i s e s t a codíficada por un gnrpo del genesconsecutivos DRA, llamado o= rbn, que puede ser reprimido o des-reprimido en conjunto. Otrotipo de repI.esidn e n a i d t i c a , c o r r i e n t e en las bacterias, es e l que f b o i o n a en l a represidn de enzimas catab6licas. Es una observaalón general de la glucoaa, que e s e l combustible d s d i r e c t o paxa la mayorfa de las celdas que pueden suprimir la. fonnaci6n de ensimas indíciblee que u t i l i z a n a alguna otra.mol6culacombustible. La presencia de glucoes en e l mediode c u l t i v o reprime l a ~galactosida- sa incluso en la presencia de lactoss, A d cuando hay gl- c o s a disponible o o m ~combustible, l a s bacterias prefieren la r u t a c a t a b d l i c a &S p r i m i t i v a , e8 d e c i r l a g l u c o l f t i c a o f e m e n t a t i v a , desco.nectando c u a l q u i e r o t r a ruta oats% lica suministradora de energfa. La represibn e s tambien un r e f l e j o del principio de economfa c e l u l a r , cuando l a s enzimas neoesarias para l a b i o s i n t e s i s ya no se :necesita dejan de producirse. Kuchas enzima6 iJaplicadas en l a b i o s i n t e s i a c e l u l a r exiben un tipo de respuesta a h i l a r ; por ejemplo, las c& l n l a a de E. c o l i an d e e a m l l o en un medio ain nin& ami- " nodcido contiene toda13 lae enaimas neoesariae p ~ l rla blz s h t e e i e de l o s 20 amino&cidos e s c e n c i d e e . Por 01 oontrareo cuan& e l medio aontione estos amino&cidos, l a s enzima6 b i b sintetiesntee oomspondientes faltan Estas, cuya cantidarl tos IM casi por aompleto. reduce en presenaia de m u prod- terminales 8on enzima8 represibleu. Aqusllos produotom terminales metabdlicoe cuya i n t m d u c c i h en un medio de o+ t i v o disminuye espeoificamente l a ooncentncidn de una enzima se conoae como c o m p r e s o r . Sustratos como la: l a c t o s a cuya introduccidn en medio M Ir cantidad de una enzima, Be l e c o n . co oon el nombre do inductor, y eug enzimas correapondientes se denominan enzima8 induciblos. Las respuestaa in.dicidae y repreeivas son igualmente dtilom para las bacter5da; cuando 80 requieren enzima8 para de cultivo especffioo transformar ' u n a mof4cula a l i m e n t i c i a e s p e c í f i c a o para 8% htizar un oonatiiqyente celular necesario, ellas e s k n pr_e aentee, ouando no son neceaarias, se hayan ausentes. Un dm 8 gmgo ospeoicrl de moldculas U-6 deoidir orrdndo 80 han da haoer la8 ropmsona w - mlisula~de IO&, q1y) 0od.ifb.n pam mudhas de l a 8 enzimrr h d w i b l e s y z ' . p e 8ibl.a. C a d a raproeor ' b l o q u e a la e h t e e i s & una o t0h.0 Est08 ~PFOSOBOS m9 la8 de& &dí@d qU0 pmtefnae, por DEA cromoebmico; los m dificpa para e l l 0 6 S. OOdiflCd.06 ~d I -S pm" tO&U e que 00- reguladom~. ha confinnado reciontemante qw las mol&uLs m- Co~Ou;mkmsnkb, 00- lma unidad d. Ynflr8a os definid8 la cantidad do r m i l a s r que pmduce un lo$ d.o itismi+ cidn an Ir intansidail d e l c o l o r raulda1 oonrpueeto m a l i szcyodo bajo ciertas Condicionas. 1Gluco:milasa e s una enzima e x o - p a r t i d o r e , E i v z s de g l u c o s = , cie t e r m i n a l e s no r e d u c t o r a sd e y r e m u e v e unid.=.i.es s u c e - ICE c&Lcn?r, a c c i 5 n de l a e n z i m ad e c r e c ec u a n d oe se n c o n t r E d ol o se n l a c e s milo?cctin; o glucogcno. 2,: r u s t r z t o . La -l,Ó, como e n (en l a prioticst se r e d . i z o a 1S5 rav/min. R e a l i z a r z a uu~pencibncon 5 ml. de soluoidn salina i s o t b n i c o e s t e a a cada tubo y cuantifiaar bacterias/rnl. Aspergillus niger. 1. Preparar 3 matraoee que contenga 20 ml. de medio da cultim PDQ 2. E s t e r i l i z a r . 3. Inoculas. 4. Incubar 7 dfaa a 2 8 O C 5. Eíacer una mspencibn oon d..de a@a eeteril y dos gota0 de g l i o e r o l 6. Agitar con perlas de vidrio e s t o r i l 7. Cuantificar e:l # b' de esporas/ml. en canara de Neubauer. 1. Pmp;rror m n;;~trazE. de 250 ml. quo contenga 75 d. de l o s s i g u i e n t e s medios. (composicidn g / l ) EXPEXEZS!lD A Y Y1 B' Almidon eoluble (m419 0 2 - 10.0 1.o 1.O 0.5 o. 25 8 .o Tp04 Una ~. CllL306a El pH; M2 4.5 ' 6.5 EnERmEm?O c ....o ..... 0.5 0.25 - H O ~ B Bacterias El medio 3 se pre~paraen relocidn 1:l de loo rnedioe uno y dos. E)IpE3lEFIQD Colocar 67.5 m l . d e l medio dos y despues de 18 hs. de incubacidn se agrega 7.5 d 0.8 $. Inoculacidn e m.l de s o l u c i d n g l u c o s a e s t o r i l incubaci6n de los matraces. I n o c u l a r 1 d. da esporas con Ido7 esporas/nl. t ~123.concentracidn de (temperatura ambiente y 115 revtlrnin.) D) DETERKIUCIClN DE ACTIVIDAD DE (3wJCOBwLA8b. I ...... ". -~ . cywd pah . . . . aog . . ... . . . . . . . . . . ... ......... . L... " " ,"" 1. ... . ..... ...... . . . . . . . : ........... . . . . . . . ! . . . ........ . . . . . I . j " " ........ .. - .. ...... . . . . . . . . . . . . . . ~ : ". . -1 ... ... . . I . . ~. .." . . . . . . . . . . . .......... -. -. ...... " . . . . . . . . . . . . . PH Medio 1.- En é s t e medio comenzamos a t r a b a j a r c o n quefui,debido a que a l someter a p r e s i o n e s y temperaturaselevadas se produjeroncambiosen c u l t i v op a r as ue s t e r i l i z a c i 6 n , los medios d e los componenhsde en les v a l o r e sd e medios ( h i d r o l i s i s ) l o q u ep r o v o c óa l t e r a c i o n e s avanzó el p r o y e c t e hubo un d e s c e n s ee n microbiana o f e r m e n t a c i ó nd e l e s v a l o r e sd e l a g l u c o s aq u et e n í a n pH que ya habi= pH debido a l a a c t i v i d a d - l o s micreorganismos cem s u s t r z e l pH b a j a r a más rápidamente y t e y a 1 f i n a l l l e g ó a s e r d e 6.9; s e esperabaque l l e g a r a a t e n e r un v a l o r menor que el o b t e n i d ep e r o l o s r e s u l t a d o s no f u e r o n psi s e d e b i ó a que e l pH i n i c i a l no era e l adecuado. Medio 2.- En el medio d o sq u ec o n t e n í a l a s v a r i a c i o n e se n l o s v a l o r e sd e como m i c a fuentedecarbonoalmidón pH en l a sp r i m e r a se t a p a s ,f u e r o nn u l a s ,p o s t e - r i o r m e n t e s e observó una l i g e r a d i s d n u c f h en e l pH, lo q u en o si n d i c é ze d e - los el pH aumentó. Nuestre pH i n i c i a l f u é de 7 . 2 y cenforme mas a j u s t a d o . En i s t e c a s o y creemosque un pH e l e v a d o ,c r e e m a s l a d e g r a d a c i i nd e l a g l u c e s a ya l i b : r e p r o v e n i e n t e d e el c o d e 2 la hidrolisis del h : din. Medio 3.- En é s t e medio se observ,aronfenimenes l a s 15 p r i m e r a sh s r a s ciim c o n s t a n t e d e l pH en l a p r i n e r a e t a p a h a s t a la u t i l i z a c i 6 nd e1 a : g l u c o s a v a l o r e se n carno f u e n t e a l i m e n t k i a - m u y i n t e r e s a n t e s , ya que fué d e b i d a a ; a p a r t i r de é s t ep u n t o les el pH aumentan muy Ligeramente y p o s t e r i o r m e n t e se m a n t i e n e nc e n s t a n t e s . P a r e c es e rq u ed e s p u é sd e l a lectura de 1;n h o r a 15 cemenzó a a g e t a r s e l a g l u c o s a y despuésdeciertotiempo,cemenzaron i n h i b i d a s p o r l a p r e s e n c i ad e d i a t o . c e s aq u e se observóen a a c t u a r l a s g l u c e a n i l a s a sq u e la glucesa,isto se e n c e n t r a b a n ncp prevoca un aumentoen l a s ú l t i m a s: L e c t u r a s ya quepudimos e l pH imq ver que el pH ne variava. Nedio 4.- Es t e medio c o n t e n í aa l m i d ó n se le a g r e g óg l u c o s a , serv5 muy c l a r a m e n t ee n - cme f u e n t ed ec a r b o n o l a r e s p u i s t ad el o sn i c r o o r g a n i s m o s l o s v a l o r e s d e pH ya quedurante y a l a s 18 h r s a éste t r a t a m i e n t o se las p r i m e r a sh o r a s e 1 ob Actividad Enzinatica.-. Medie 1 (glucesa) .- En e s t e medie ya que l a unicafuente esperabaobtenervalores de carbono era l a glucosase rides de l a . , a c t i v i d a d de l a s enzimas gluceamilasas debido un medio s i n almidón é s t a s enzimas no son n e c e s a r i a s , s i n a queen l e c t u r a s nos dieron c i e r t o s v a l o r e s embargo nuestras de actividad deglucoamilasas, queaunque muy - b a j o s , e x i s t í a n ; ÓSto quizá s e deba a interferencias en las muestras de algunas sustancias que no s e sedimentaron cornp1et;amente a1centrifugar. Medie 2 (almidón) .- En e s t e melio se sbserva una actividad de l a s glucoamilasas como e r a de esperarse, con un aumente progresivoh;asta l a cual s e observa un ligero descense l a l e c t u r a de l a hora 1 0 , después de en :La a c t i d d a d q u i z á debido a queen dio ya hay glucosadisponibleproducto e l me- de l a h i d r o l i s i s d e l almidrjn. Esta glucosa presente en e l medio e j e r c e c i e r t a i n f l u e n c i a i n h i b i t o r i a - en l a a c t i v i d a d de l a s enzimas amilasas no s d l o porque l a actividad de é s t a s Últimas ya no es t i n d e t e r e nantepara l a s u b s i s t e n c i a d e l micreorganismo s i n o que quizápodríahablarse especie de retreregulación p o r productos :finalessiendepar f i n a l , l a glucosa. P o r lo tanto,mientras de amilasas disminuye y h a s t a que ÓSto - supuesto el producto l a glucosaestápresente, vuelve a desaparecerdel consumi.8, hay una nueva inducción en l a actividadenzimahica, de una l a actividad medie per que se - ya que l a Última l e c tura nos demostró un nuevo y l i g e r o aumento en la actividad de l a s glucoamilasas. Medio 3 (glucosa-almidin) .- Los datossbtenidosbajo é:Stas condicianesnutricionales son muy re presentatives de lo que e s l a r e p r e s i ó n c a t a b o l i c a y l a i n d u c c i ó n enzimatica, ya que & t e medio conteníaglucosa y al.nidón, s e pudo observarinicialmente vidadenzimCicaextrexadanentebaja muestrade ( l o que s e esperabaera actividadenzimaticaperoparece - una a c t i - no r e g i s t r a r ninguna que p e r s i s t i e r o n l a s nis:nas i n t e r f e r e l l c i a s ) debido a que e x i s t í a g l u c o s a en e l medio y i s t a i n h i b e p a r e c e que a n i v e l de 146640 t r a n s c r i p c i j n l a s í n t e s i s d e l a s enzimasglucearhilasas hay una i n h i b i c i ó n a n i v e l e n z i m a t i c o d e r o nc o n s t a n t e s l a a c t i v i d a dd e l a s a m i l a s a s . S e mantuviz la lectura de l a h e r a 15 e n l a c u a lc o m i e n z a esos n i v e l e s h a s t a n o t a r s e un l i g e r o aumentoen y además parecequetambién l a a c t i v i d a dd e l a s glucoamilasas a . E s t on o si n d i c a - que a l a g o t a r s e l a glucosa d e l medio y no e x i s t i r o t r af u e n t ed ec a r b o n od i s p o n i b l e además d e l almidóncomienzan a i n d u c i r s e l o s necanismospara la s i n t e s i s de é n z i n a s g l u c o a m i l a s a s y i s t a s comienzan a a c t u a r . se h i z o (diez horasdespués L au l t i m al e c t u r aq u e de l a a n t e r i o r ) nosdemuestra un d e s c e n s o en l a a c t i v i d a de n z i m a t i c a ,d e b i d o nuevamentede g l u c o s a en e l medie como producto de l a d e g r a d a c i ó nd e la l m i d ó n . Medio 4 (almidón -glucosa a l a s 18 h r s . ) éste medie sen muy s i m i l a r e s a les que L e sr e s u l t a d o so b t e n i d o se n i n d u c c i ó ne n z i m a t i c aq u e se l l e v a n a caboen e n c i ad e lt i p od ef u e n t e de carbonoque mos los fenómenos s i g u i e n t e s t E n quizá a l a p r e d e n c i a l a s células m i c r o b i a n a sp o r l a influ- se l e s u m i n i s t r e ; de ÓSta . a n e r ao b s e r v a - < - el medio tres que c o n t e n i a( g l u c o s a - a l m i d 6 n ) enzimasglucoamilasasestuvieronreprimitlad ya sea a n i v e l g e n e t i c s ( r e p r e s i ó n t a b o l i c a ) y no se p r o d u c í a n o s i m p l e m e n t ef u e r o ni n h i b i d a s , sentes pero no p o d í a na c t u a r ;d ec u a l q u i e r j a y no aument6 s i n oh a s t ad e s p u é s .d e las nodo s u a c t i v i d a d ca- es d e c i r e s t a b a n p r e era extremadanente ba varias h o r a s , cuando ya l a g l u c o s a p r e s e n t e ! en e l medio s e h a b í aa g o t a d o , sólo h a s t ae n t o n c e s y trás Un p e r i o d o de a d a p t a t i ó n l a s enzimasglucoamilasascomenzaron a a c t u a rp a u l a t i n a m e n t e . En e l medio c u a t r o el e f e c t o d e r e p r e s i h c a t a b o l i c a i t i c a es muy c l a r o , ya q u ei n i c i a l m e n t ed e b i d o fuentedecarbono p e r o ,e n e l momento enque s ei n t r o d u c e las e n z i m a sg l u c o a m i l a s a s , i n h i b i d a se n SU l a degradaciónde l a s enzimasglucoamilasas l a g l u c o s a bay una r e p h e s i ó n c a t a b o l i c a é s t a s se d e j a n d e s i n t e t i z a r de y l a s ya p r e s e n t e s se ven a c t i v i d a d y comienza a funcionar c a s i i h i c a m e n t e e l m e c a n i s m para la g l u c o s a . LOS medios n o y d o sn o ss i r v i e r o np a r ac o n o c e r c i n e t i c a o v e l o c i d a de n es clave ya que marca un patrón de e s t e t i p od em i c r o o r g a n i s m a s decomporta,nientoquepresenta o como unica f u e n t ed ec a r b o n o en p r e s e n c i ad ea l m i d ó n s i g u i e n t e s medios(medio 3 y 4) s i no f u e r ap o r una f u e n t e más a c c e s i b l e d e c a r b o n o y que s e r e p e t i r í a en les dos las v a r i a c i o n e sq u ec a u s a l a pre- como lo e s l a g l u c o s a . E l medio u n o , u n i c a m e n t er e p r e s e n t a r i a l a n ea c t i v i d a dd e c i e r t a enzima e l c a s od en u e s t r oe x p e r i m e n t o e na u s e n c i ad es us u s t r a t o ,a c t i v i d a dq u ee n se deba a razonesque tectarnosperoqueposiblemente - y podercomparar l a e n z i m aq u en o si n t e r e z a b ab a j od i s t i n t a sc o z E l medio d o ss o b r et e d o d i c i e n e sn u t r i c i o n a l e s . a c t i v i d a de n z i m a t i c a y darnos una i d e ad e la d e g r a d a c i ó nd ed e t e r m i n a d os u s t r a t o e n t r e si el g r a d od ea c t i v i d a dd e s e n c i ad e como unica a la p r e s e n c i ad ec a r b ó n l a p r e s e n c i a y a c t i v i d a dd e s e observó e inhibiciónenzi4 s i da ya expusimos. N u e s t r o sr e s u l t a d o se ng e n e r a ls 0 nc o h e r e n t e s y l l e v a n cierta l ó g i c a ,d e mostrandonas casi c l a r a m e n t e la e x i s t e n c i a d e é s t o s f e n o m e n o s d e r e p r e s i ó n c a t a b i U c a e i n d u c c i ó ne n z i m á t i c a . Aunque e nr e a l i d a dn u e s t r sr e s u l t a d o ss o np o c oe x a c t o s js i n t e r p r e t a r l o s , c o s a que no se p u e d e l ' o g r a r s i n c o n t a r a n t e s c o n es d e c i r ,f r a n c a m e n t e t e o r i c a de lo q u ee s t áo c u r r i e n d o ; tuanos no nos h u b i e r a ns e r v i d od en a d a , o b t e n e r .S i ne m b a r g o , nos y p r o c e s o sq u eo c u r r i e r o ne n . efec l o queesperabamos e i n s t r u c t i v o i r d e s c i f r a n d o y en- cada uno d e los s u c e s o sc o n d o ; ya que sóla de é s t a; c a n e r a una buenabase l o s experimentosque si no hubieramassabido fuó v a s t a n t e i n t e r e s a n t e contrando l a s r e s p u e s t a sd e n o si n t e r e s a b aa p r e n d e r . y n o sc o s t Ót r a b s los quenosfuimostopan- s e a l c a n z a un verdaderoconocimientode los microorganismoscon los fenÓ@ l o s q u et r a b a j a m o s y que Respecto. a l a i n e x a c t i t u d d e n u e s t r o s r e s u l t a d o s , e s t o s s e muchos de los problemasconquenosenfrentamosdurante l o s p r i c i p a l e sp r o b l e m a sf u e r o n ; pueden a t r i b u i r a eldesarrollodelproyecto. l a s encubadoras y l o s a g i t a d o r e sc o nq u et r e a j a m o s l a adecuada,yaque no f u é Que la a g i t a c i ó n de los : l e d i o sd ec u l t i v o zaban a e f e c t u a r l a s revolucionesporminutoque no al can- se r e q u e r í a n y p o r l o tanto;.la a : un crecimientsoptimodemicroorganismos. r e a c i ó n no f u é s u f i c i e n t e p a r a Debido a l a f a l t a d ed i s p o n i b i l i d a dd em a t e r i a l , trz l a s ultimas muestrasque C a o s no se pudieron hacer porduplicado. La d e f i c i e n c i a en l a s maquinas centrifugadorascreernosquejugó p o r t a n t ee n las d e s v i a c i m e s d en u e s t r o sr e s u l t a d o s , t r i f u g a c i ó n adecuadadenuestrasmuestras un p a p e l im- ya que a l no o b t e n e r una cen- hubo p a r t i c u l a s q u e i n t e r f i r i e r o n e l las lecturas f o t o c o l o r i m e t r i c a s y n o s d i e r o n v a r i a c i o n e s s i g n i f i c a t i v a s . ., Uno d e los problemas más g r a n d e sq u es u r g i e r o n mente i n f l u y e r o ne n l a c a l i d a dd en u e s t r op r o y e c t of u é n u e s t r ot u b o sq u ec o n t e n í a n cenen gne p o r a s a r e s d e l d e s t i n o , los e x t r a c t o se n z i m a t i c o sp r o v e n i e n t e sd eA s p e r g i l l u s e l r e f r i g e r a d o r , y nos f u é i m p o s i b l et r a t a r n i g e r , los encontramosvolteadosen t a s muestras, es p a re s oq u e y q u ed e f i n i t i v a + los r e s u l t a d o s ,c o m e n t a r i o s & t e reporte'corresponden ék y c o n c l u s i o a e sq u ea p a r e - Únicament,e a l o s d a t o s o b t e n i d o sd eB a c i l l u ss u b - tilis. E nr e a l i d a dn o se n f e n t r a t m sc 3 n en e l t r a b a j od el a b o r a t o r i op e r oq u en e que & t e t i p od ep k o b l e n a s muchos p r o b l e ~ n a s!nis r e t r a s a r o n vale l a penamencionar,porquecreernos no i n f l u y e r o ne n los r e s u l t a d o so b t e n i d o s . q E:; .:22, Co!Y;ILTS EL I(03ZLO 3EL OF‘ERO!; ‘ROFIJZ;TO i O3 IbIOXO3? 5 s un m d d e l o h i p o t 6 t i c o que d e c c r i b e la r e p ~ l r x i d n d e la s f n t c s i s p r o t e i c ap r o p o r c i o n a n d o q u eu n ac e c u a n c i a un rnecanrsrno de l a i n d u c c i b r ,c o o r d i n a d a , de enzirmspuede bacn:!o - s e r i n d u c i d a , corno gru.-o, p o r un ~ 6 1 0 i n 2 u c t o r . .ki p r e j e m p l o los B - c a l a c t o d i d o si n d u c e nc o o r d i n a d m e n t e yo de 3 protefnas, la B - g a l e c t o s i d a s a , l a E-calactosido-perrneasa & ~ l ~ c t 6 s i ~ o - e c e t i l - t r a n s f e r a scao,d i f i c a d a p o r t r e s g e n e s t i v z r n c c t ee n la s e c u e n c i z d e l en un g r ~ 9 l a B - t i o- z, y y a , r e s y e c - genoma 3e E. c o 1 . i .: ; i e n d op r e c i e a s e n t eC s t e m i c r o s i s t e n 3 l a b a s e d e e s t u d i od e - Jacob y Konod, e c t o s g e n e se s t r u c t u r a l e s r e p d z d o s por e l mismo g e nr e g u l z d o r ,f u e l o cue llamaron operdn l a c . F o r - lo t a t o d e f i n i e r o n a l o p e r 6 n como un g r u p od eg e n e se s t r u c t u r a l e sf u n c i o n n a l r n e n t er e l F a c i o n s d o s ,q u ee n cerca ?tl e l mapa c r o m o s 6 x i c os e hallan s i t u a d o s e l uno o t r o , y q u e Fuc2r-n s e r p u e s t o s a f u n c i o n a r o i m p e d i d o sc o o r d i n a d k mente L o r los mismos l o c ir e c u l a d o r e s . c a t a b o l i t od e r i v a d o de e l l a rebaja l a c n n t i d a dd e kl.';I'c i n t r a c e l u l a r , e s i m - p o r t a n t e s e 5 a l a r como a f e c t z e s t a r e l a c i d n e l f u n c i o n a m i e n t o y l a econoda celular. cl?.ve para l a t r a n s c r i p c i 6 n d e t o d o s l o s E l AWc e s u nm e t a b o l i t o o p e r o n e s que son i n h i a i d o c p o r e l c e l a forma enque c a t a b o l i s m 0g l u c 6 s i c o . elcatcbolitoderiva30 d e AMPc en l a c 6 l u l a , s e suponeque de ATF a AWc s o b r e l a a d e n i l c i c l a s a pasode Aunque s e descono- d e l a g l u c o s ac o n t r o l a - e l nivel l a i n h i b i c i d n puede o c u r r i re n e l raso o s o b r e l a e n z i m aq u ei n t e r v i e n ee n el kMPc a AXP a c e l e r a n d o l a d e , ~ a d a c i b n . Sinembargo su papel e s e s p e c i f i c o a Tesar d e que nopronueve de l a p r o t e i n a ac- r e c t a m e n t e la s € n t c s i sde Rflkm, s i n o q u e o p e r a p o ru n i 6 n t i v a d o r a d e l g e nd e lc a t a b o l i t o (FAC). PAC n o d i e n e i n f l u e n c i a s o b r e l a t r a n s c r i ~ c i b n m i e n t r a s no s e l i g u e a e l l a a l ARPc; s d l o e n t o n c e s demanda l a capacidad para e n l a z e r c e bien e s p e c i f i c o s d e l DNA y, p r o d u c i e n d o de e s t a menerk,aurnenta de t r a n s c r i p c i 6 nd e o p e r o n a s s e n s i b l e s a l a G l u c o s a ,d en o d o ne6 q u eb l o q u e a ns uf u n c i o n a m i e n t og e n e r a nc d l u l a sa u e i n c a p a c e sd eu t i l i z a r dir- un número c o n s i d e r a b l e 2 lucares 1% r d p i d e z que l a s r n u t a c i o so3 E i m u l t h e a m e n t e d e a z u c a r t sd i f e r e n t e s . Cuando e x i s t e , e n t o n c e s , un a ~ ~ m e n ten o l a t r a n s c r i p c i d n( e n i n h i b i r l e ) p o r e l componente c e l u l a r , :;e denomina c o n t r o l F o s i t i v o . vez de - l a d e f i n i c i d na n t e r i o r 3 e c i e r t am a n e r sF o d r i a m o sr e l a c i o n a r arnbos, puesan e l AKFc ambos c a s o sr e s u l t aq u e de l a e x r r e s i d nd e los g e n e s S. i ne m b a r g o se r e l a c i o n ac o nl a r e g u l ~ c i 6 n l a l i t e r a t u r ae s p e c i f i c a l a a c c i d nh o r m o n d ,e n Xli!Pc e s un s e w 3 0 m e n s a j e r od e l a t r z n s c r i p c i d nd e los o p e r o n e sr e p r i m i b l e s En e u c a r i o t e sc u a n d o l a r c g u l x i 6 n de bajos n i - por una dcgr::dacidn r a 8 g a s o s y p r o t e i n a s , y p o rb a j o sn i v e l e sd es i n t e s i sd e s i e l n i v e ld e AEFc e s b a j oa u g e n t r : d a n t e st a l e s como l a cornbustidnde b l e m e n t es e a un reflejo d e lh e c h od e - R!!A. la n b r o r c i d nd ea z u c s - res, s e a c e l e r a n las r e a c c i o n e s de s i n t e s i s y s er e t a r d a n e z t i n u l z n 12 E c t i v i d z dd e - e l AEiF'c s e h a l l a a c o n c e n t r a c i o n e se l e v z d a s , v e l e 3 de t r a n s p o r t ea c t i v od en u t r i e n t e sh a c i ae l l a s Por e lc o n t r s r i o , - por g l u c o s a . l a s c e l u l a s asumen un e s t a d o d e i n a c t i v i d a d que s e c a r a c t e r i z a F o r ??ida de5cic?os - que e l l o s t e j i d o sm i m a l e s l a s b a c t e r i a s p a r t i c i p a como m e n z a j c r oe n m i e n t r a sq u ee n para l o s I'rocesos degr2 gra:szs. Todos e s t o se f e c t o sd i v e r s o s q*le l a s c o n c e n t r a c i o n e se l e v e d a s posi de Al<Fc una d i v e r s i d . 3 d de cnzirnzs f o s f o r i l z d a s( c i n a s a S ) y e n z i m a s c o r r e s p o n d i e n t e s esten f o s f o r i l s d a s o no. 1~1.:;'~p r o n u e v e 1 2 f o r m a c i d nd em i c r o t ú b u l o se nc g l u l a se p i t e l i a l e c . iG?c r e c i b e e l nombre de segundo rnenEa5ex-o pornile transmite y zm.nlifica en e l i n t e r i o r de l a c 6 l u l a l a s s e 3 a l e sq u f r n i c a sq u e e m c r e m e t i a n t e 12s hormonas,queeon lellesan a traves de l a :Los p r i m e r o s mensajeros. S1 AkPc s e proc?uce a p a r t i r del ATP por una e n c i m al o c a l i z a d ae n n e n b r a n ac e l u l a r , 12 a d e n i l a t o - c i c l a s a , , d e l r i c t e x n e r v i o c o ,f u n c i o n ? ,r e g u l a n d o -- ? n t i c i n z en 12 lz t r a n s n i s i O ns i n s g t i c : 1 2 d i v i c i 6 nc e l u l a r . - B1,AMPc desemFe3a un importante papel como mensajero parz detener I - la reFr ridn de catabolito en cdlulac Frocaribticas, gracias a su capacidad de unirse a la p r o t e i n a FAC, la'cual asu vez, st une a un locus especifico de la región del o p e r a d o r , iniciando as5 la transcripcidn y sfntesis enzims tica d e las rutas metabblicas. For lo tanto es posible que e l AMFc funcione controlandoel ciclo celular de l o s euczriotes por su uni6.n a proteinas (reductoras) receptoras e2 pecificas que a s u v e z , modulan la trxnscripcibn de ciertas genes de la cromatinq y alternativamente puede funcilonar activando a una protefna quinasa la cual, a tal corno la que reeula muchas onzimas, bo d e la BU vez, puede llevara ca - fosforilaci6n de alguna protefna controladora de la velocidad de repliczcidn o de trznscripcibn. Así Icre,wlecibn de la expresidn gcn6tica en los eucariotes es m5.s compleja. Las celulas eucariotas no tiene operones simples. cdv-0 J. M., Mnk; Beudaoion o f Biosyrlthytio Pathway8 i n Baoteria & b u a l Review of Biochemistry; 40, 943-948 1971 pp. Wintsih, W. #icrobial bmi~osss. PP. 273. , - Fungi. c