Materia Bioquímica Responsable M.C. Rocío Calderón Pascacio Grado y grupo / Carrera 3º B, C, D/ TSU Agrobiotecnología área vegetal Unidad temática II. Lípidos Fecha y horario Semana 6, 17, 18 y 21 Junio Laboratorio Instrumentación analítica, ed. H 2. PROPIEDADES DE LOS LÍPIDOS INTRODUCCIÓN Los lípidos constituyen un grupo químicamente diverso de compuestos cuya característica común y definitoria es su insolubilidad en agua. Las funciones biológicas de los lípidos son igualmente diversas. En muchos organismos las grasas y los aceites son las formas principales de almacenamiento energético, mientras que los fosfolípidos y los esteroles constituyen la masa de las membranas biológicas. Otros lípidos, aún estando presentes en cantidades relativamente pequeñas, juegan papeles cruciales como agentes emulsionantes, mensajeros intracelulares y transportadores. Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que la forman: glicerina y los ácidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. A este proceso se le conoce como saponificación y puede representarse mediante la siguiente reacción: A parte de la saponificación, otra característica de las grasas es que son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotitas formando una "emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su menor densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas son solubles en los llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol, cloroformo, etc. Las moléculas de agua se unen entre sí gracias a las cargas positivas y negativas de oxígenos e hidrógenos respectivamente que se atraen formando grupos OH. En los lípidos no existen estos grupos, pues están formados básicamente por C y H, y por esto mismo no son miscibles en agua. Por otro lado, es pertinente definir una molécula tensoactiva. Esta se caracteriza por tener una cabeza hidrofílica y una cola hidrofóbica. En el caso de los jabones y detergentes, las moléculas tensoactivas son sus iones carboxilados RCCOˉ. Por otro lado, las fuerzas de tensión superficial son aquellas que tienden a disminuir la superficie libre del líquido que se forma entre el agua y el aire. Durante el lavado de grasas, los jabones y detergentes disminuyen esta tensión superficial rodeando la grasa, orientando su extremo hidrofílico hacia el agua. OBJETIVOS Determinar la solubilidad de los lípidos en diferentes en solventes polares y apolares. Analizar evaluar las diferentes variables correlacionadas con el proceso de saponificación. MATERIALES Y REACTIVOS Acetona Cloroformo Etanol Éter de petróleo Hidróxido de sodio al 30% Metanol NaCl Vasos de precipitado de 250 ml Varilla de agitación Parrilla eléctrica Pipetas graduadas de 5 y 10 ml Tubos de ensayo Gradilla Aceite vegetal (girasol, oliva, soya,) PROCEDIMIENTO Prueba de solubilidad de lípidos Enumere 5 tubos de ensayo y adicióneles lo siguiente: - Tubo 1: 1ml de agua destilada - Tubo 2: 1ml de acetona - Tubo 3: 1ml de etanol - Tubo 4: 1ml de cloroformo - Tubo 5: 1ml de éter A continuación agréguele a cada uno de ellos una gota de aceite vegetal agite vigorosamente y anote sus observaciones. Reacción de saponificación: Transfiera 12ml de aceite de origen vegetal (girasol, oliva, soya,) a un vaso de precipitado de 250 ml y adicione 15 ml de una solución de NaOH al 30% y 5 ml de metanol. Agite la mezcla y caliente con llama moderada. Continúe el calentamiento de la mezcla, hasta cuando esta ebulla. Mantenga el volumen de la solución constante mediante la adición, cuando sea necesario, de una mezcla de agua metanol (1:1). La muestra NO debe ebullir hasta la sequedad. Agite continuamente para evitar que el material se adhiera a las paredes del recipiente. Si el material se adhiere a las paredes del vaso, debe devolverse a la solución con ayuda del agitador. Mientras la saponificación continua, prepare una solución salina concentrada (100gr de NaCl en 300 ml de agua, filtrar el exceso de NaCl). Una vez la saponificación se ha completado (después de 1 hora aproximadamente) transfiera la mezcla caliente, con agitación, al vaso que contiene la solución de NaCl concentrada. Agite la mezcla vigorosamente por unos minutos y deje reposar toda la noche. CUESTIONARIO (entrega individual) 1. Diseñe una tabla para registrar los datos de la prueba de solubilidad, teniendo en cuenta que el aceite puede ser soluble, parcialmente soluble ó insoluble en los diferentes solventes probados. 2. Mediante un diagrama explique de que depende la solubilidad de los lípidos 3. ¿Qué es el índice de saponificación, qué importancia tiene y como se determina? 4. ¿Porque la temperatura de reacción de la saponificación debe ser baja? 5. ¿Qué es el efecto de salado? ¿Por qué se separa el jabón mediante éste proceso? 6. A que se debe la acción limpiadora de los jabones y detergentes BIBLIOGRAFÍA Hart H., Hart D.J, Craine L.E. Química Orgánica. Novena edición. Editorial Mc Graw Hill. México. 1995. Kent V. Jabones y detergentes Revista de divulgación de I.E.S. N17, 2002, Madrid. Vargas, W.1985. Fundamento de Ciencia Alimentaria. 2ª edición. Universidad Nacional de Colombia. Bogotá White A. Principios de Bioquímica. Segunda edición. Editorial Mac Graw Hill. 1983. España. MC. Rocío Calderón Pascacio P.A. División Agroalimentaria - UTSelva