FACULTAD DE QUÍMICA DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA CURSO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA (CLAVE 1807) Licenciatura de QFB Prof. Laura Carmona Salazar Semestre: 13-II Este material es exclusivamente para uso educativo y no de lucro CONTROL DE CALIDAD EN EL LABORATORIO CLÍNICO • ETAPAS DE PRESERVACIÓN DE LA CALIDAD Pre-analítica, analítica y Post-analítica • VIGILANCIA DEL CONTROL DE CALIDAD Criterios para la elección de un control Estadística • EVALUACIÓN DE LA METODOLOGÍA Parámetros determinantes Tipos de errores • DETERMINACIÓN DE LOS INTERVALOS DE REFERENCIA Acorde a la población Cálculo del rango de referencia CONTROL DE CALIDAD El objetivo de un laboratorio clínico es proporcionar resultados confiables al usuario con objeto de: 1) Identificar de forma exacta y precisa su condición fisiológica 2) Contribuir al diagnostico eficaz de diversas enfermedades 3) Establecer un tratamiento apropiado y oportuno 4) Evaluar la eficacia del tratamiento ¿Cuál es la diferencia entre preservar y controlar la calidad? PRESERVAR LA CALIDAD Involucra todas las acciones que se llevan a cabo en el laboratorio clínico con objeto de asegurar la obtención de resultados de calidad CONTROL DE LA CALIDAD Se refiere al control del proceso de análisis y forma parte de la preservación PRESERVACIÓN DEL CONTROL DE CALIDAD Fase Pre-analítica Fase analítica Fase post-analítica FASES DEL PROCESO ANALÍTICO FASE PRE-ANALÍTICA Etapa previa a la realización de un análisis de laboratorio. Atención al paciente Preparación del paciente Solicitud de análisis Obtención de las muestras. FACTORES QUE DEPENDEN DEL PACIENTE FACTORES NO SUSCEPTIBLES DE MODIFICACIÓN Edad Sexo Raza FACTORES SUSCEPTIBLES DE MODIFICACIÓN Ejercicio físico intenso, la tensión mental, pueden afectar los niveles de muchos componentes de la sangre. La simple flexión excesiva del antebrazo poco antes de la punción venosa puede modificar ciertos valores. FACTORES SUSCEPTIBLES DE MODIFICACIÓN El ayuno realización es de imprescindible muchas para pruebas la de laboratorio. Las muestras de sangre deben ser tomadas temprano en la mañana, después de un ayuno de 8 a 12 horas. FACTORES SUSCEPTIBLES DE MODIFICACIÓN Alcohol Tabaquismo Medicamentos Procedimientos diagnósticos FACTORES QUE DEPENDEN DEL PERSONAL DE SALUD 1. Toma de muestras, identificación y manipulación. 2. Conservación de la muestra, 3. Envío de muestras al laboratorio. 4. Preparación del paciente. 5. Información al laboratorio OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA La piel del sitio escogido para la punción se limpia con etanol al 70% La aguja debe poseer un diámetro apropiado (0,8 a 1,1 mm para adultos) y penetra en la vena con el bisel hacia arriba y en un ángulo apróx. a 45º. Al terminar la extracción, se retira la aguja y se coloca una torunda de algodón en el sitio de la punción CAUSAS DE ERROR MÁS FRECUENTES AL OBTENER SANGRE POR PUNCIÓN VENOSA 1) Escoger una extremidad edematosa. 2) Puncionar una vena que ha sido empleada previamente. 3) Tomar la muestra aprovechando un catéter o aguja. 4) Torniquete muy bajo o dejarlo por tiempo excesivo 5) Punción muy traumática. 6) Aguja de calibre muy pequeño, provocando hemólisis. 7) Formación de espuma, que favorece la hemólisis. 8) Confusión al rotular los tubos. 9) Uso del anticoagulante no apropiado. CONSERVACIÓN DE MUESTRAS DE SANGRE 1. Selección del anticoagulante 2. Muestra-anticoagulante adecuada 3. Separación del plasma y células lo más pronto posible 4. Guardar el plasma en tubos apropiados conservarlos de 4 a 6 ºC o menos. FASES DEL PROCESO ANALÍTICO FASE POST-ANALÍTICA 1. Verificación de los cálculos en el reporte final 2. Revisión de los resultados para detectar posibles errores de transcripción. 3. Revisión que los reportes sean legibles 4. Información de casos que requieran atención inmediata 5. Vigilancia de la entrega de los resultados en tiempo FASE ANALÍTICA Se desarrolla en el interior del propio laboratorio clínico. La selección, aplicación y evaluación de los diferentes procesos analíticos constituyen el factor fundamental que, como un marcador ultrasensible, se hace necesario revisar siempre, cuando se trata de conocer la calidad con que se desempeña el laboratorio clínico. LA SELECCIÓN Y EVALUACIÓN DE LOS MÉTODOS ANALÍTICOS EN EL LABORATORIO CLÍNICO ES FUNDAMENTAL PARA LA OBTENCIÓN DE RESULTADOS CONFIABLES La selección de la metodología se basa en dos criterios: 1) CRITERIOS DE PRACTICABILIDAD 2) CRITERIOS DE CONFIABILIDAD CRITERIOS DE PRACTICABILIDAD • Formación académica y competencia requerida • Disponibilidad de equipo • Requerimiento de instrumentos • Reactivos • Tiempo • Costo • Seguridad CRITERIOS DE CONFIABILIDAD Se refieren a la evaluación de los parámetros de desempeño del procedimiento: 1. Linealidad 2. Precisión 3. Exactitud 4. Veracidad 5. Incertidumbre TIPOS DE MÉTODOS UTILIZADOS EN EL LABORATORIO CLÍNICO 1. Publicados en libros emitidos por alguna autoridad en la materia (ISO, IUPAC) 2. Métodos establecidos o autorizados por organismos científicos nacionales o internacionales 3. Publicados en artículos o revistas especializadas 4. Métodos especificados por el fabricante del equipo 5. Desarrollados o diseñados por el propio laboratorio ¿Qué parámetros me permiten vigilar la calidad en un método? CRITERIOS DE CONFIABILIDAD Se refieren a la evaluación de los parámetros de desempeño del procedimiento: 1. Linealidad 2. Precisión 3. Veracidad 4. Incertidumbre http://www.ema.org.mx/descargas/guias_tecnicas/ensayos_clinicos/laboratoriosclinicosv 00.pdf DEFINICIONES ANALITO Especie de interés a determinar en un análisis. MATERIAL DE REFERENCIA Material o sustancia cuyo valor es suficientemente homogéneo y bien definido para permitir su uso para la calibración de un instrumento, la evaluación de un método o la atribución de valores a los materiales. MUESTRA BLANCO Material que es similar en matriz y estado físico de preparación a las muestras que están siendo analizadas pero no tiene el analito. MUESTRA DE CONTROL Material de composición conocida con el propósito de dar seguimiento al proceso analítico, es similar a la muestra problema, en cuanto a matriz, estado físico de preparación y el intervalo de concentración del analito. CRITERIOS PARA LA ELECCIÓN DEL MATERIAL CONTROL • Químicamente similar a las muestras problema • Por lo menos se utilizan dos concentraciones, localizadas en puntos de decisión médicos: normal baja, normal alta y muy anormal • Material homogéneo y estable, por lo menos un año • Almacenado en alícuotas IMPORTANCIA DEL MATERIAL CONTROL PARA DETERMINAR LA CALIDAD DEL MÉTODO • Se utilizan para vigilar tanto procedimientos cualitativos como cuantitativos. • Determinan el intervalo de referencia • Se requiere de procedimientos estadísticos para evaluar los resultados cuantitativos del control de calidad • Se debe procesar junto con las muestras diariamente • Permite determinar la aceptación de los resultados o si es necesario descartarlos TIPOS DE MUESTRAS DE CONTROL INTERNO CONTROL DE CALIDAD INTERNO EXTERNO CONTROL DE CALIDAD EXTERNO ¿Qué puedo determinar con la repetición? IMPLICACIONES DEL MUESTREO REPETIDO Determinar la variabilidad La cual depende de dos factores 1) De la técnica del laboratorista 2) De la variabilidad inherente al método de análisis (el equipo o el procedimiento) Lo anterior se puede establecer al analizar la distribución o dispersión de valores PARÁMETROS ESTADÍSTICOS Media, mediana y moda En una distribución normal son aproximadamente iguales. Donde la tendencia central en torno a la cual se agrupan los datos no solo es el valor que se repite con mayor frecuencia, sino también el valor intermedio del conjunto de datos y el promedio de todos los valores. Los controles deben presentar una tendencia central con poca inclinación hacia un lado u otro lado del máximo, lo cual se debe cumplir para poder establecer el intervalo de referencia MEDIDAS DE DISPERSIÓN Una vez establecido el comportamiento que tienen los controles en una distribución de datos, resulta importante considerar la dispersión de los datos ¿CUÁL ES EL IDEAL? La dispersión de datos puede ser estrecha o amplia ¿CÓMO SE EVALUA LA DISPERSIÓN? Intervalo, la varianza, la desviación estándar y el coeficiente de variación MEDIDAS DE DISPERSIÓN MEDIA VARIANZA INTERVALO MEDIDAS DE DISPERSIÓN DESVIACIÓN ESTANDAR COEFICIENTE DE VARIACIÓN PROCEDIMIENTO PARA CONTROL DE CALIDAD INTERNO EL CONTROL PRESENTA UNA DISTRIBUCIÓN NORMAL SE ANALIZA JUNTO CON LAS MUESTRAS PROBLEMA EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO DE LOS CONTROLES DETERMINACIÓN DE LA CALIDAD DEL ANÁLISIS UTILIDAD DE LA GRÁFICA DE LEVEY-JENNINGS EN EL CONTROL DE CALIDAD DEL LABORATORIO CLÍNICO Es una curva de distribución normal dibujada de lado La media de la curva de distribución se transforma en una línea continua y se ubica en la parte central En el eje de las ordenadas se grafican las variables dependientes: la media y los valores adecuados de desviación estándar En el eje de las abscisas se grafica la variable independiente: unidades de tiempo que pueden ser días, valores secuenciales de valores en un mismo día. PROCEDIMIENTO PARA CONTROL DE CALIDAD INTERNO EL CONTROL PRESENTA UNA DISTRIBUCIÓN NORMAL SE ANALIZA JUNTO CON LAS MUESTRAS PROBLEMA EVALUACIÓN DEL COMPORTAMIENTO DE LOS CONTROLES A TRAVÉS DEL GRÁFICO DE LEVEY-JENNINGS DETERMINACIÓN DE LA CALIDAD DEL ANÁLISIS APRUEBA O RECHAZA EL RESULTADO EL CONTROL DE CALIDAD INTERNO Y EXTERNO A TRAVÉS DE LOS CRITERIOS DE CONFIABILIDAD DETERMINAN LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS Criterios de confiabilidad.- Se refieren a la evaluación de los parámetros de desempeño del procedimiento: 1. Linealidad 2. Precisión 3. Veracidad 4. Incertidumbre http://www.ema.org.mx/descargas/guias_tecnicas/ensayos_clinicos/laboratoriosclinicosv 00.pdf LINEALIDAD • La capacidad (dentro de un intervalo dado) para proporcionar resultados que son directamente proporcionales a la concentración del analito en las muestras de examen. • Es un tramo de concentraciones del analito en el que la respuesta del sistema de medición es una función lineal de la concentración • Se requiere material de referencia certificado • Obtención de la ecuación de la recta con su coeficiente de correlación CRITERIOS DE CONFIABILIDAD Se refieren a la evaluación de los parámetros de desempeño del procedimiento: 1. Linealidad 2. Precisión 3. Veracidad 4. Incertidumbre http://www.ema.org.mx/descargas/guias_tecnicas/ensayos_clinicos/laboratoriosclinicosv 00.pdf PRECISIÓN • Grado de concordancia entre los valores de una serie repetida de ensayos. • Para su determinación se deben realizar mediciones repetidas y aplicar conceptos estadísticos fundamentales como: media, desviación estándar, desviación estándar relativa, coeficiente de variación y la varianza. PARA LA DETERMINACIÓN DE UN VALOR SE UTILIZA UN PROCEDIMIENTO DE MEDICIÓN CUYO RESULTADO ES UN ESTIMADO DEL VALOR REAL LA ESTIMACIÓN CONTIENE UN ERROR DE MEDIDA QUE ES LA DIFERENCIA ENTRE EL VALOR OBTENIDO Y EL VERDADERO Involucra dos componentes: Error aleatorio. Tiene que ver con la precisión del procedimiento de medición, lo cual afecta la reproducibilidad Error sistemático. Implica la veracidad del procedimiento. ERRORES ALEATORIOS Son impredecibles, inherentes a toda medición pueden ser ocasionados por factores como: fluctuaciones en la temperatura y energía eléctrica, variación entre técnicos en las mediciones, material mal lavado, agitación incorrecta etc. AFECTAN LA PRECISIÓN SE DETECTA A TRAVES DE UN CONTROL DE CALIDAD INTERNO EL PARÁMETRO DE PRECISIÓN CONSIDERA LA VARIABILIDAD ERRORES SISTEMATICOS Se presentan de manera continua y definida. Estos errores incluyen instrumentales, personales, errores de aplicación y se puede corregir con calibración. •AFECTAN LA VERACIDAD •DETECTADOS A TRAVES DE UN CONTROL CALIDAD INTERNO Y EXTERNO VERACIDAD • El grado de concordancia existente entre la medida aritmética de un gran número de resultados y el valor verdadero o aceptado como referencia. RELACIÓN ENTRE LOS DISTINTOS TIPOS DE ERROR Y LOS CORRESPONDIENTES CONCEPTOS CUALITATIVOS CRITERIOS PARA VERIFICAR LA VERACIDAD • Valoración de un material de referencia certificado • Estudios de comparación de métodos • Estudios de comparación interlaboratorios ¿CÓMO SE DETERMINA EL INTERVALO DE REFERENCIA? DETERMINACIÓN DE LOS VALORES DE REFERENCIA • Debe considerar el tipo de población, donde puede ser crítica la edad, diferencias de origen étnico y la ubicación geográfica. • El ideal es que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia ¿DE QUÉ DEPENDE LA CALIDAD DE UN LABORATORIO CLÍNICO EN MÉXICO? Los laboratorios clínicos demuestran su competencia técnica, asegurando la calidad de los resultados de los exámenes clínicos a través la comprobación del cumplimiento con los requisitos sobre estructura y organización, ética e imparcialidad, sistema de gestión de la calidad, personal, equipo, procedimientos técnicos, validación de métodos, calibración, trazabilidad, etc., establecidos en la norma NMX-EC-15189-IMNC-2008/ISO 15189:2007.