Capítulo 5. Microorganismos indicadores de alimentos Muchos alimentos son elaborados en condiciones desfavorables que facilitan la contaminación con varios microorganismos. Sin embargo la supervivencia y multiplicación de estos microorganismos depende de la composición del alimento y las condiciones de almacenamiento, entre otros. Para controlar estas dificultades se han establecido un grupo de microorganismos que al ser identificados en los alimentos indican o señalan la calidad, idoneidad e inocuidad del producto alimenticio por lo que su adecuado reconocimiento es fundamental para la evaluación del proceso productivo y validar, así, el producto final que llegará al consumidor. Las lecciones que se encuentran en este capítulo son: Lección 21. Mesófilos Lección 22. Coliformes Lección 23. Salmonella Lección 24. Clostridium sulfito reductor Lección 25. Staphylococo aureus Lección 26. Hongos y levaduras Lección 27. Listeria monocytogenes Lección 28. Escherichia coli O157:H7 Lección 29. Bacillus cereus Lección 21. Mesófilos El recuento de microorganismos mesófilos es considerado el recuento indicador más general y amplio de alimentos, pues incluye todos los géneros aerobios y facultativos que crecen en medios simples a una temperatura entre 20-45 ºC. El número de microorganismos mesófilos es un indicador del grado de contaminación de los alimentos en cualquier etapa del proceso de producción1. 1 Sánchez, M y col. 1988. Análisis microbiológico de alimentos. INS. Bogotá. Colombia. p 18. Los alimentos pueden tener una apariencia normal pero si su recuento de mesófilos es alto, señalaría que la alteración del producto está cercana, por lo que también se considera un indicador de la vida útil o media del alimento. El recuento de mesófilos tiene algunas limitaciones2: - Los alimentos fermentados, como por ejemplo el queso Cheddar, contienen naturalmente un número elevado de carga microbiana, por lo que el número de mesófilos no es útil para evaluar la calidad microbiológica de estos alimentos. - El medio utilizado para la recuperación de estos microorganismos no permite el crecimiento de aquellos que son exigentes en sus requerimientos nutricionales por lo que no permiten evaluar este tipo de microorganismos. - Por las condiciones de incubación de los mesófilos no se puede determinar ni anaerobios estrictos ni hongos y levaduras. Lección 22. Coliformes Son bacterias aerobias o facultativas anaerobias, gram negativas, no formadoras de esporas, con formas bacilares y fermentadoras de lactosa con la producción de ácido y gas en 48 h. a 35º.C. Los coliformes comprenden al menos tres géneros: Escherichia, Klebsiella y Enterobacter. Como los coliformes se encuentran normalmente en tracto intestinal, su presencia en los alimentos puede indicar contaminación fecal, además de una mala calidad higiénica en el proceso, falta de higiene en los manipuladores o recontaminación después del proceso. Sin embargo, la presencia de números elevados de coliformes en un alimento también puede deberse al crecimiento de un pequeño inóculo de origen no fecal. Por lo tanto, el recuento de coliformes debe interpretarse cuidadosamente. Lección 23. Salmonella El género Salmonella pertenece a la familia Enterobacteriaceae y comprende un grupo de bacterias que se caracterizan por ser gram negativas flageladas y de forma bacilar. Las salmonelas son anaerobias facultativas, por lo que presentan las dos vías metabólicas: oxidativa y fermentativa. Además, fermentan la glucosa formando ácido y gas, pero no fermentan la lactosa; crecen en citrato como única fuente de carbono, descarboxilan la lisina y suelen producir sulfuro de hidrogeno (H2S). La mayor parte de los serotipos de Salmonella solo crecen en el intervalo de temperaturas mesófilos. La pasteurización inactiva eficazmente estas bacterias. 2 Yousef, A and Carlstrom,C. 2006. Microbiología de los alimentos. Manual de Laboratorio. Edit. Acribia. Zaragoza. España. p.78. La vía de entrada de las salmonellas y de otros agentes de infecciones grastrointestinales es la oral. Los alimentos pueden contaminarse con excretas humanas o de animales en cualquier punto del proceso productivo. Sin embargo, los principales vehículos de transmisión son la carne (ternera, cerdo, aves), los huevos y los productos industrializados que contienen estas materias primas3. El agua es uno de los vehículos de transmisión de la Salmonella y en general, los serotipos de mayor incidencia son la Salmonella typhimurium y Salmonella enteritidis. Lección 24. Clostridium Sulfito Reductor Es el grupo más importante de bacterias anaerobias formadoras de esporas y se encuentran normalmente en el suelo, por eso se consideran contaminantes naturales de la mayoría de alimentos, especialmente los de origen vegetal. Igualmente, algunos Clostridium spp. se encuentran en el tracto gastrointestinal de los animales por lo que se les considera contaminantes naturales de los alimentos de origen natural. En el caso de estos últimos alimentos el microorganismo se nutre de ellos y con la cocción de la carne el nivel de oxígeno disminuye lo que lleva a la formación de las endosporas. La presencia de recuentos altos de bacterias esporuladas en un alimento puede indicar una severa contaminación ambiental, deficiente manipulación o fallas en el proceso térmico destinado a la eliminación de esporas. La esterilización comercial de alimentos enlatados se ha diseñado para destruir los esporulados patógenos. Los principales Clostridium asociados a enfermedades transmitidas por alimentos (ETA´s) son: C. botulinum (proteolítico y no proteolítico), C. butyricum, C. perfringens, C. sporogenes y C. tyrobutyricum4. El C. botulinum en condiciones de anaerobiosis (por ejemplo, enlatados) sintetiza una exotoxina considerada la más potente de las toxinas naturales. Esta toxina tiene una fuerte afinidad por el sistema nervioso (neurotoxina), donde bloquea la acetilcolina, una sustancia química que permite la transmisión del impulso nervioso (neurotransmisor). Esta toxina puede ser destruida por la mayor parte de los métodos de cocción que llegan a los 100 ºC. Lección 25. Staphyloccocus aureus 3 Sánchez, M y col. 1988. Análisis microbiológico de alimentos. INS. Bogotá. Colombia. p 31 Yousef, A and Carlstrom,C. 2006. Microbiología de los alimentos. Manual de Laboratorio. Edit. Acribia. Zaragoza. España. p.95. 4 Es un coco Gram positivo que se organiza en forma de racimos y que presenta una alta capacidad de supervivencia en condiciones de sequedad durante un largo período de tiempo. Incluso pueden crecer en alimentos o medios de cultivo con bajas concentraciones de agua. La presencia de Staphyloccocus aureus en un alimento se interpreta como indicativo, principalmente, de contaminación a partir de piel, boca y fosas nasales de los manipuladores de alimentos, material, equipos sucios y materias primas de origen animal contaminados5. Son varios los métodos utilizados que pueden disminuir la población de Staphyloccocus aureus pero que no destruyen la toxina que este microorganismo produce. De hecho, está puede permanecer activa incluso después del proceso de pasteurización. Lección 26. Hongos y Levaduras La presencia de una gran cantidad de levaduras y mohos no es deseable en los alimentos, excepto en los quesos madurados por mohos. Un elevado número de estos microorganismos en los alimentos indica una mala higiene y manipulación deficiente, abuso de temperatura, tratamiento inadecuado o contaminación postproceso. Cuando los hongos se desarrollan en alimentos ácidos, pueden consumir los ingredientes ácidos y en consecuencia aumentar el pH del producto, es decir tornarlo básico, lo que puede favorecer el crecimiento de bacterias contaminantes que no habían crecido antes por la acidez del alimento. Lección 27. Listeria Monocytogenes Es un bacilo gram positivo, no formador de esporas, móvil por la presencia de flagelos cuando se cultiva a 20-25 oC. La movilidad es mucho menor o se pierde por completo al cultivar la bacteria a 37 ºC. Es una bacteria aeróbica y microaerofílica y puede crecer en un intervalo de temperatura desde 1ºC hasta 45 ºC, siendo óptima entre 35-37 ºC, lo que permite su crecimiento en condiciones de refrigeración. También puede crecer en condiciones ácidas. Es una bacteria inocua en el medio ambiente, por lo que se ha aislado de materias primas como: leche, ensaladas, carnes y pescados. Igualmente, puede encontrarse en el ambiente donde se procesan los alimentos, por lo que se debe evaluar 5 Sánchez, M y col. 1988. Análisis microbiológico de alimentos. INS. Bogotá. Colombia. p 25 periódicamente la presencia de esta bacteria en muestras tomadas de la línea de producción6. Lección 28. Escherichia coli O157:H7 Bacteria Gram negativa flagelada, de forma bacilar y anaerobio facultativo (es decir posee las dos rutas metabólicas: respiratoria y fermentativa). Fermenta glucosa y otros carbohidratos produciendo ácido y gas. Las diferentes cepas de E. coli se clasifican de acuerdo a dos tipos de antígenos presentes en su superficie: El antígeno O de la capa de lipopolisacaridos y el antígeno flagelar denominado H. En la actualidad se reconoce la existencia de 167 antígenos O y 53 antígenos H. Los serotipos de E. coli se identifican con estos dos antígenos añadiendo dos números al nombre de la especie. El primero indica el antígeno O y el segundo el H, por ejemplo: E. coli 055:H6, E. coli O111:H8. E. coli O157:H7 y E. coli O167:H47 . E. coli es un microorganismo normal del tracto intestinal y la mayoría de cepas son inocuas para el ser humano. Las cepas patógenas se clasifican de acuerdo a sus factores de virulencia, los síndromes clínicos que provocan y sus mecanismos de patogenicidad. El ganado vacuno es el principal reservorio de E. coli O157:H7, por lo que esta bacteria está muy asociada con carne picada de vacuno poco cocida. Aunque también se ha aislado de: leche cruda y pasteurizada, cuajadas de queso y lechuga. El agua también se considera un vehículo para su transmisión. Lección 29. Bacillus cereus Es un microorganismo aerobio, Gram positivo, esporulado y se encuentra normalmente en el suelo, vegetales, alimentos crudos y procesados. Cuando se encuentra un recuento alto de este microorganismo (mayor de 10 6 UFC/g) en un alimento puede ocasionar intoxicación alimentaria. Se ha asociado a brotes de enfermedad de alimentos con almidón, carnes cocidas, hortalizas, sopas, ensaladas y pudines8. 6 Yousef, A and Carlstrom,C. 2006. Microbiología de los alimentos. Manual de Laboratorio. Edit. Acribia. Zaragoza. España. p.112. 7 Ibis. p.117 8 Ibis. p.124