VIII Congreso Virtual Hispanoamericano de Anatomía Patológica — Octubre de 2006 José Mª Pigazo Merino Raquel Muñiz Roces Marta González Parra Francisco José Ortega Rojo Servicio de Anatomía Patológica Hospital Universitario Río Hortera Valladolid, España. Correspondencia: José Mª Pigazo Merino C/ Cardenal Torquemada s/n 47010 Valladolid, España. Telf: +034 655 866 947 E-mail: jmpigazo@ioba.med.uva.es http://conganat.cs.urjc.es Patología hepática (Foro Técnico) Modificación de la técnica del Tricrómico de Masson para tejido congelado La técnica histoquímica del Tricrómico de Masson diferencia mediante tres colorantes distintos, tres tipos de estructuras, como son los núcleos, los citoplasmas y tejido conjuntivo. Ésta técnica se aplica biopsias fijadas en formol tamponado al 10 %, por lo cual, será necesario desparafinar e hidratar. Además, cada paso que lleva la técnica requiere tiempos largos, de tal manera que el tiempo total necesario para su realización es de 60 minutos. Nuestro servicio está adscrito a la Red Nacional de Trasplantes de Hígado, por lo que en los casos en los que el hígado donante tiene esteatosis, conviene también valorar el grado de fibrosis para descartar las esteatohepatitis avanzadas. Para ello necesitamos hacer cortes del tejido hepático donante, sin fijar y congeladas en un medio de inclusión sintético. Al ser material sin fijar, no es necesario desparafinar ni hidratar el tejido. Además se han acortado los tiempos de los demás pasos de la técnica, de modo que la técnica tarda en realizarse 10 minutos. Los resultados son igual de válidos que la técnica realizada en biopsias fijadas con formol e incluidas en parafina. Obtenemos como conclusión que ésta técnica aplicable a todo tipo de biopsias sin fijar y cortadas mediante congelación, es una técnica muy útil para comprobar el grado de fibrosis en una biopsia, pudiendo dar el diagnóstico en un tiempo muy corto. Palabras clave: hígado; técnica; Masson; trasplante, fibrosis. COMENTARIOS La técnica histoquímica del Tricrómico de Masson diferencia, mediante tres colorantes distintos, tres tipos de estructuras, como son los núcleos, los citoplasmas y el tejido conjuntivo. Ésta técnica se aplica a biopsias fijadas en formol tamponado al 10 %, por lo cual, será necesario desparafinar e hidratar. Además, cada paso que lleva la técnica requiere tiempos largos, de tal manera que el tiempo total necesario para su realización es de 60 minutos. Nuestro servicio está adscrito a la Red Nacional de Trasplantes de Hígado, por lo que en los casos en los que el hígado donante presenta esteatosis, conviene también valorar el grado de fibrosis para descartar las esteatohepatitis avanzadas. Durante el año 2005, se realizaron en nuestro hospital 43 trasplantes de hígado, de los cuales en 30 de ellos se necesitó realizar la técnica del Tricrómico de Masson rápido. Para ello se necesita hacer cor- tes del tejido hepático donante, sin fijar y congelados en un medio de inclusión sintético. Al ser material sin fijar, no es necesario desparafinar ni hidratar el tejido. Además se han acortado los tiempos de los demás pasos de la técnica, de modo que la técnica tarda en realizarse 17 minutos. Los resultados son igual de válidos que la técnica realizada en biopsias fijadas con formol e incluidas en parafina. Se obtiene como conclusión que ésta técnica, aplicable a todo tipo de biopsias sin fijar y cortadas mediante congelación, es una técnica muy útil para comprobar el grado de fibrosis en una biopsia, pudiendo realizar el diagnóstico en un tiempo muy corto REFERENCIAS 1. LABORATORIO DE ANATOMIA PATOLÓGICA, Raimundo García del Moral, 1ª edición (22-May-96) Ed. Mc. Graw Hill. 2. STAINING METHODS, Histologic and Histochemical, publicado por Harper y Row, Ed. Atica 1968. —1— VIII Congreso Virtual Hispanoamericano de Anatomía Patológica — Octubre de 2006 http://conganat.cs.urjc.es Patología hepática (Foro Técnico) ICONOGRAFÍA Tabla 1.- Tiempo total de realización (60’) en parafina y Tiempo total de realización (17’) en congelación. —2— VIII Congreso Virtual Hispanoamericano de Anatomía Patológica — Octubre de 2006 http://conganat.cs.urjc.es Patología hepática (Foro Técnico) Figura 2.- Cortes en parafina teñidos con Tricrómico de Masson normal. —3— VIII Congreso Virtual Hispanoamericano de Anatomía Patológica — Octubre de 2006 http://conganat.cs.urjc.es Patología hepática (Foro Técnico) Figura 3.- Cortes en congelación teñidos con Tricrómico de Masson rápido. —4—