ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 Psiquiatrı́a Biológica www.elsevier.es/psiquiatriabiologica Original Unión al autorreceptor 5-HT1A de la serotonina en el núcleo dorsal del rafe en muestras de tejido de vı́ctimas de suicidio deprimidas$ Maura Boldrini a,b, Mark D. Underwood a, J. John Mann a y Victoria Arango a, a b Department of Psychiatry, Division of Neuroscience, Columbia University College of Physicians and Surgeons, New York State Psychiatric Institute, Nueva York, Estados Unidos Dipartimento di Scienze neurologiche e psichiatriche, Università degli Studi di Firenze, Florencia, Italia I N F O R M A C I Ó N D E L A R T Í C U L O Palabras clave: Serotonina Suicidio Autorreceptores 5-HT1A Post mórtem Núcleo dorsal del rafe R E S U M E N La disfunción serotoninérgica está presente en los trastornos del humor y el suicidio. Los autorreceptores somatodrendrı́ticos 5-HT1A del tronco cerebral regulan la descarga de neuronas serotoninérgicas, pero los estudios efectuados sobre la unión a los autorreceptores en el núcleo dorsal del rafe (NDR) en muestras de tejidos obtenidas en vı́ctimas de suicidio deprimidas describen resultados conflictivos. Tratamos de determinar: 1) la distribución anatómica de la unión al receptor 5-HT1A en el NDR de muestras de tejidos obtenidas de vı́ctimas deprimidas de suicidio y de individuos de control sanos, desde un punto de vista psiquiátrico, fallecidos por causas naturales, y 2) si las diferencias de sexo en la unión a 5-HT1A en el NDR contribuyen a las diferencias observadas en las muestras entre vı́ctimas deprimidas de suicidio y los de control. Se analizaron las autorradiografı́as cuantitativas del receptor de [3H]8-hidroxi-2-(di-n-propil) aminotetralina ([3H]8-OH-DPAT) en las secciones de tejido post mórtem, obtenidas previamente, que contenı́an el NDR de vı́ctimas de suicidio libres de fármacos/drogas (n = 10) y de controles emparejados (n = 10). En el NDR ı́ntegro de los suicidas deprimidos, comparado con los controles, se observó una menor unión total al receptor (fmol/mg de tejido mm3) (po 0,05). Se observaron diferencias de grupo a lo largo de la extensión rostrocaudal del NDR para la unión transversal a 5-HT1A (fmol/mg de tejido) y la unión al receptor (fmol/mg mm3, po 0,05). Comparado con controles, en el NDR de suicidas deprimidos la unión transversal a 5-HT1A fue mayor rostralmente y menor, caudalmente. Las diferencias entre suicidas deprimidos y controles estuvieron presentes en hombres y mujeres, aunque en estas se detectó una mayor unión que en hombres. La menor unión al autorreceptor en NDR de suicidas deprimidos podrı́a representar una respuesta homeostática a una menor liberación de serotonina, con un incremento de la descarga de las neuronas serotoninérgicas. La mayor unión al autorreceptor en el NDR rostral podrı́a contribuir a una liberación deficiente de serotonina en la corteza prefrontal ventromedial mediante una menor descarga neuronal. & 2010 Publicado por Elsevier España, S.L. Serotonin-1A autoreceptor binding in the dorsal raphe nucleus of depressed suicides A B S T R A C T Keywords: Serotonin Suicide 5-HT1A autoreceptors Postmortem Dorsal raphe nucleus $ Serotonergic dysfunction is present in mood disorders and suicide. Brainstem 5-HT1A somatodendritic autoreceptors regulate serotonin neuron firing but studies of autoreceptor binding in the dorsal raphe nucleus (DRN) in depressed suicides report conflicting results. We sought to determine: (1) the anatomical distribution of 5-HT1A receptor binding in the DRN in depressed suicides and psychiatrically normal controls; and (2) whether sex differences in 5-HT1A binding in the DRN contribute to differences between depressed suicides and controls. Previously collected quantitative receptor autoradiograms of [[3H]8-hydroxy-2-(di-n-propyl)aminotetralin (3H-8-OH-DPAT) in postmortem tissue sections containing the DRN from drug-free suicide victims (n = 10) and matched controls (n = 10) were analyzed. Less total receptor binding (fmol/mg tissue mm3) was observed in the entire DRN in depressed suicides compared with controls (po 0.05). Group differences along the rostrocaudal extent of the DRN were observed for cross-sectional 5-HT1A binding (fmol/mg tissue) and receptor binding (fmol/mg mm3, po 0.05). Cross-sectional 5-HT1A DRN binding in depressed suicides compared with controls was higher rostrally and lower caudally. The differences between depressed suicides and controls were present in males and females, although females had more binding than males. Less autoreceptor binding in the DRN Publicado previamente en Journal of Psychiatric Research. 2008;42:433–442. Autor para correspondencia. Correo electrónico: va19@columbia.edu (V. Arango). 1134-5934/$ - see front matter & 2010 Publicado por Elsevier España, S.L. doi:10.1016/j.psiq.2010.01.003 ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 13 of depressed suicides may represent a homeostatic response to less serotonin release, increasing serotonin neuron firing. More autoreceptor binding in rostral DRN might contribute to deficient serotonin release in ventromedial prefrontal cortex by lower neuronal firing. & 2010 Published by Elsevier España, S.L. Introducción Fundamento En el trastorno depresivo mayor (TDM) y el suicidio las anomalı́as serotoninérgicas incluyen una baja concentración de serotonina (5-HT) y de su metabolito, el ácido 5-hidroxiindolacético (5-HIAA) en el tronco cerebral, y un menor número de lugares para el transportador de la serotonina (SERT) en la corteza cerebral, hipotálamo y tronco cerebral, lo que sugiere una menor liberación de serotonina en extensas áreas del cerebro1. El suicidio se distingue del TDM por la localización de los cambios serotoninérgicos pre y postsinápticos. En el suicidio, está presente menos SERT y una mayor unión a 5-HT1A en la corteza prefrontal ventral2,3, una región implicada en la inhibición conductual4. Utilizando el antagonista de 5-HT1A, 11-C-WAY10635, en algunos estudios, mediante tomografı́a por emisión de positrones (PET), se describe un menor potencial de unión (PU) a 5-HT1A en el rafe y la corteza cerebral en el TDM5,6, aunque los pacientes TDM no tratados nunca con medicación se caracterizan por una mayor unión a 5-HT1A en el mesencéfalo y otras regiones cerebrales7. Los estudios efectuados en animales, en concreto primates, respaldan la participación de los receptores 5-HT1A en el humor. En macacos Cynomolgus deprimidos conductualmente, el PU a 5-HT1A determinado con el antagonista 4,200 -(metoxifenil)-l-[200 -(N-200 -piridinil)-p-fluorobenzamido]etilpiperacina, fue menor en el rafe y otras regiones cerebrales8. No se han publicado estudios in vivo sobre conducta suicida y unión a 5-HT1A. Las neuronas que sintetizan 5-HT en los NDR y núcleos medial (NMR) del rafe del tronco cerebral dan lugar a la innervación serotoninérgica del prosencéfalo. En el rafe, el receptor 5-HT1A es un autorreceptor inhibidor somatodrendrı́tico, presente en las neuronas 5-HT9,10. La 5-HT liberada localmente actúa sobre el autorreceptor inhibiendo la descarga11–15 y reduciendo la liberación de 5-HT en todos los núcleos de proyección16. Objetivos del estudio Los estudios publicados previamente han deparado resultados conflictivos. Stockmeier et al17 describieron mayor unión a 5-HT1A en suicidas deprimidos en comparación con controles en los subnúcleos ventrolaterales y dorsales del NDR en el mesencéfalo rostral. Cuando calculamos la densidad de unión volumen total del núcleo (capacidad de unión), encontramos una menor unión al receptor 5-HT1A en suicidas deprimidos18. Las diferencias en las poblaciones de estudio y las diferentes regiones de obtención de muestras de NDR entre ambos estudios podrı́an explicar los hallazgos discrepantes. Nuestro grupo18 incluyó un mayor número de mujeres y analizó el subnúcleo caudal, omitido por Stockmeier et al17. Por último, estimamos la cantidad total de unión a 5-HT1A en el volumen de NDR y/o NMR usando la )capacidad de unión* como ı́ndice del número total de receptores en el NDR o NMR, donde capacidad de unión =(unión transversal al receptor en fmol/mg de tejido) (volumen de la región). En suicidas, la capacidad de unión en el NDR, pero no la unión transversal al receptor, fue menor. En los estudios post mórtem2 y en los estudios in vivo utilizando PET19,20, las mujeres se caracterizaron por una mayor unión al receptor 5-HT1A en la CPF que los hombres. En ningún estudio post mórtem se ha considerado el sexo en la comparación de la unión a 5-HT1A en suicidas y controles en el tronco cerebral. Dados los resultados conflictivos sobre la unión al receptor 5-HT1A en vı́ctimas TDM de suicidio, tratamos de determinar los posibles efectos del sexo y la región del NDR a través de un análisis regional expandido de la unión al receptor 5-HT1A, analizada previamente18. Métodos Individuos El presente estudio se efectuó en individuos reclutados y descritos previamente en la publicación de Arango et al18, por lo que en este artı́culo solo se resumen sus caracterı́sticas. La investigación se efectuó de acuerdo con la última versión de los principios de la Declaración de Helsinki. Las muestras cerebrales se obtuvieron de acuerdo con los requisitos del comité de investigación del centro. Los familiares dieron su consentimiento a la donación de tejido tras la provisión de información ı́ntegra sobre la naturaleza de los procedimientos. Todos los casos fallecieron súbitamente. Se efectuó una revisión de las historias clı́nicas disponibles y se mantuvo una entrevista con al menos un informante por caso de acuerdo con nuestros métodos de autopsia psicológica21 para determinar los diagnósticos de eje I y eje II y otra información clı́nica de acuerdo con los criterios del DSM-IV. Los cerebros se obtuvieron en el momento de la autopsia, se disecaron en bloques, se congelaron de inmediato en freón ( 20 1C) y se almacenaron a 80 1C hasta su disección en cortes. Se fijaron muestras del hemisferio cerebral izquierdo para examen neuroanatomopatológico. Se excluyó a los individuos con antecedentes de traumatismo cerebral, enfermedad del sistema nervioso central, alcoholismo crónico o sida. Se usaron los fluidos corporales (sangre, bilis, humor acuoso y orina) para el cribado toxicológico en busca de cocaı́na, opiáceos, alcohol, antidepresivos y otros fármacos ácidos y básicos. Las muestras de cerebro se codificaron y personal enmascarado para la causa de la muerte obtuvo y analizó las secciones. Los suicidas (n= 10) y controles (n= 10) se emparejaban para la edad (75 años), sexo (mismo sexo) e intervalo post mórtem ([IPM] 75 h) y se analizaron como pares. Los controles no cumplı́an los criterios para un diagnóstico de eje I o eje II durante la vida (tabla 1). También se obtuvo la anamnesis de los fármacos prescritos durante los 3 últimos meses de vida. En otra publicación se describe la información demográfica detallada de los individuos18. Tronco cerebral Se usaron tres series de cada milı́metro de las secciones de NDR, analizadas previamente en busca de receptores 5-HT1A (2 extensiones; unión total e inespecı́fica) mediante autorradiografı́a cuantitativa de receptor empleando 3H-8-OH-DPAT (fig. 1) y tinción de Nissl (tionina, una extensión). Cada extensión usada para la autorradiografı́a de receptor también se tiñó para la sustancia de Nissl. ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 14 M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 Tabla 1 Demografı́a, diagnóstico y resultados del cribado toxicológico en suicidas y controles Grupo de control (n = 10) Suicidas (n = 10) Sexo (hombres:mujeres) Edad (años) IPM (h) pH cerebral Raza (B:H:AA:As) Toxicologı́a 6:4 45,4 7 18,6 12,7 7 4,9 6,4 70,3 7:1:2:0 10 =ausente 1 = monóxido de carbono Alcoholismo Diagnóstico de eje I 0 No 6:4 44,17 7,7 15,87 2,2 6,47 0,3 6:3:0:1 8= ausente 1= opiáceos 1= analgésicos 1= opiáceos, analgésicos 0 7= TDM 1= esquizoafectivo, TDM 1= TDM, bulimia Diagnóstico de eje II No 1= trastorno de la personalidad esquizotı́pico Causa de la muerte 5 = cardiovascular 4 = accidente de tráfico (peatón) 1 = accidente de tráfico (pasajero) 5= arma de fuego 2= ahorcamiento 3= caı́das desde altura AA: afroamericanos; As: asiáticos; B: blancos; H: origen hispánico; IPM: intervalo post mórtem; TDM: trastorno depresivo mayor. Figura 1. Serie de inmunorradiografı́as que ilustran la distribución rostrocaudal de la unión al receptor 5-HT1A en una muestra de cerebro representativa. La parte más extensa del NDR está indicada como el origen (0 mm) y los otros cinco niveles se determinan como distancia real (en mm) rostral y caudal al origen. Se identificaron los niveles anatómicos rostrocaudales comparables. Para cada caso, se identificó la sección de tejido con el área de unión máxima del NDR, determinada en la autorradiografı́a [3H]8-OH-DPAT (fig. 1, sección 2 en la parte superior) y se utilizó para alinear las otras secciones cada 1 mm (las secciones omitidas se consideraron como una omisión y el intervalo se calculó en consecuencia). Para el análisis estadı́stico de la distribución rostrocaudal, el NDR se dividió en 6 niveles relativos a la sección con la mayor área transversal, según lo descrito en un estudio previo22: 3 mm (3 mm rostrales desde el área pico), 0 mm (área pico del NDR), 3 mm (3 mm caudales desde el área pico), 6 mm (6 mm caudales desde el área pico), 9 mm (9 mm caudales desde el área pico), 12 mm (12 mm caudales desde el área pico). Se derivó el valor de unión transversal para cada nivel a partir de la media de las 3 extensiones excepto para el nivel pico (0 mm) y el segundo nivel pico menor (6 mm), que contenı́a dos extensiones. Representando gráficamente el área de unión a 5-HT1A en el NDR, con una distancia en milı́metros desde el pico en la abscisa, obtuvimos una curva (fig. 3a), que muestra el mismo patrón de la variación rostrocaudal de área NDR, obtenido en los estudios previos que efectuaron inmunotinción para la triptófano hidroxilasa (TPH)23 e inmunoautorradiografı́a TPH22. Esto se consideró la confirmación de que el método de alineamiento de la sección tenı́a en cuenta un representante a través de la representación de individuos de la localización anatómica de NDR. Autorradiografı́a cuantitativa del receptor de 3H-8-OH-DPAT del autorreceptor de 5-HT1A La autorradiografı́a de los receptores 5-HT1A se efectuó como se ha descrito previamente, incluida la exposición durante 2 semanas y revelado2,18. Se fijaron secciones de tejido en un 10% de formol neutralizado y se tiñeron para la sustancia de Nissl con tionina. Densitometrı́a de los autorradiogramas del receptor 5-HT1A Los autorradiogramas del receptor se cuantificaron utilizando un sistema informatizado de análisis de imagen (MCID, Imaging Research, Inc.), según lo descrito previamente (Arango et al, 1995, 2001). Se usaron las imágenes de los autorradiogramas de [3H]8OH-DPAT para definir los lı́mites del NDR dado que hay un alto grado de correspondencia entre el contorno de NDR basado en las ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 15 Tabla 2 Cambios de la densidad de unión, área de distribución de unión y capacidad de unión a 5-HT1A en el núcleo dorsal del rafe (NDR) en función del grupo (suicidas deprimidos frente a controles) y a nivel rostrocaudal del NDR Parámetro Factores Gl F Valor de p Unión 5-HT1A (fmol/mg de tejido) Grupo* Nivel** Grupo* Nivela Grupo* Nivel** Grupo*Nivela Grupo* Grupo*Nivela 1,18 5,14 5,14 1,18 5,15 5,14 1,18 5,14 2,20 11,08 11,61 14,76 14,85 4,19 18,06 5,05 0,1555 0,0002 0,0001 0,0012 o 0,0001 0,0154 0,0005 0,0075 Área distribución unión 5-HT1A (mm2) Capacidad unión 5-HT1A Nivel 5,14 26,62 o 0,0001 (fmol/mg tejido mm3) Gl: grados de libertad. *Grupo: suicidas deprimidos frente a controles. **Nivel: nivel rostrocaudal de NDR de las secciones de tejido. a Grupo*Nivel: interacción grupo por nivel rostrocaudal. secciones inmunoteñidas para TPH24,25 y el contorno basado en autorradiogramas de [3H]8-OH-DPAT18. Capacidad de unión Previamente introdujimos el concepto de capacidad de unión18 como un ı́ndice de la unión total en un área cerebral de interés. Esto se consideró un parámetro más pertinente desde un punto de vista fisiológico que la unión transversal en una región de interés (por ejemplo, fmol del ligando radioactivo/mg de tejido) porque estima la cantidad total de receptores y también es más comparable con los datos obtenidos in vivo mediante técnicas de diagnóstico por la imagen cerebral. La cantidad total de unión se calcula como: capacidad de unión= (unión transversal al receptor) (área de unión distancia entre secciones) (fmol/mg de tejido mm3). Análisis estadı́stico Por grupo y por análisis del nivel de densidad de unión [3H]8OH-DPAT, área de unión y capacidad de unión, se usaron diez pares emparejados de controles y vı́ctimas de suicidio. Se efectuó un análisis ANOVA de medidas repetidas utilizando, como variable de agrupación, suicidio/no suicidio y como factor intraindividuos, los 6 niveles rostrocaudales determinados. Se usaron pruebas univariadas a cada nivel para analizar las diferencias de grupo de la densidad de unión [3H]8-OH-DPAT, área de unión y capacidad de unión. También se efectuó el mismo análisis entre grupos de hombres y mujeres para analizar las diferencias control-suicidio en ambos sexos. Para analizar la relación entre los parámetros de la autorradiografı́a y pH, edad e IPM, se usó un análisis de correlación lineal. Los datos se expresan como medias7DE y todos los valores de p son bilaterales (2 colas). Resultados Unión transversal La unión transversal al receptor 5-HT1A (fmol/mg de tejido) varı́a a lo largo del eje rostrocaudal de NDR (F= 11,08; grados de libertad [gl] =5, 14; p = 0,0002; tabla 2; fig. 2a). La unión es mayor rostralmente desde 0 a 6 mm y relativamente menor en las porciones caudales (fig. 2a). El grupo suicida muestra un declive de la unión transversal que se extiende rostral a caudalmente en comparación con los controles (fig. 2a). La distribución de la unión transversal a lo largo del eje rostrocaudal del NDR difiere entre suicidas y controles (tabla 2). Las pruebas univariadas efectuadas a cada nivel muestran una mayor unión en suicidas deprimidos al nivel más rostral de –3 mm (F= 39,63; gl=1, 18; p = 0,0001) y una menor unión a nivel de 3 mm (F= 5,75; gl= 1, 18; p = 0,00276) y a nivel de 6 mm (F =24,23; gl= 1, 18; p = 0,0001; fig. 2a). A otros niveles, las diferencias no son estadı́sticamente significativas. En mujeres, también se encontró una diferencia en la unión transversal (F= 28,47; gl=5, 2; p = 0,0343) y las pruebas post hoc revelaron una mayor unión [3H]8-OH-DPAT en suicidas deprimidas comparado con mujeres de control a nivel más rostral de NDR ( 3 mm, F= 19,60; gl =1, 6; p = 0,0044), y una menor unión a nivel de los 3 mm más caudales (F= 17,94; gl= 1, 6; p = 0,0055) y a nivel de 6 mm (F= 9,00; gl =1, 6; p = 0,0240; fig. 2b). En hombres (fig. 2c), la unión transversal difirió entre suicidas deprimidos y controles (F= 8,59; gl =5, 6; p =0,0105) y en la prueba post hoc, los suicidas deprimidos presentaron una mayor unión a nivel más rostral de NDR ( 3 mm) (F= 23,69; gl=1, 10; p =0,0007) y una menor unión en el extremo más caudal a nivel de 6 mm (F =17,61; gl=1, 10; p= 0,0018; fig. 2c). Cuando examinamos las diferencias de sexo intragrupo de control y de suicidas deprimidos, encontramos que en el de control hubo una diferencia entre hombres y mujeres (F =22,24; gl= 5, 4; p =0,0051; fig. 2b y c). En las mujeres del grupo de control se detectó una mayor unión que en hombres y los patrones de hombres y mujeres del grupo de control difirieron (F= 22,24; gl= 5, 4; p = 0,0050; fig. 2b y c). En el grupo de suicidas deprimidos, no se identificó una diferencia de sexo en la distribución rostrocaudal de la unión transversal (F= 0,53; gl =1, 8; p = 0,4892), detectándose una disminución de la unión caudalmente tanto en hombres como en mujeres. No hubo una interacción sexo por nivel (F= 4,33; gl=5, 4; p = 0,0901). Área de unión En el NDR está presente una variación rostrocaudal del área ocupada por los receptores 5-HT1A (tabla 2; fig. 3a). El área de unión es mayor rostralmente, a nivel de 6 mm se observa un pico más pequeño. En suicidas deprimidos, está presente una menor área de unión desde 0 a 3 mm, y el segundo pico a los 6 mm está prácticamente omitido en comparación con los controles (tabla 2; fig. 3a). El área total de unión es una aproximación del volumen del NDR y es más pequeña en suicidas deprimidos comparado con el grupo de control (tabla 2). Las pruebas post hoc confirman una menor área de unión en los primeros en comparación con el grupo de control a nivel más rostral del NDR ( 3 mm) (F =26,79; gl= 1,18; p o0,0001) y a nivel de 6 mm (F= 7,19; gl =1,18; p= 0,0152; fig. 3a). ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 100 80 70 ∗ ∗ 60 ∗ 50 40 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 10 8 6 ∗ ∗ 4 * 2 90 80 ∗ 60 ∗ 50 -3 12 Grupo de control (n= 4) Grupo de suicidas (n= 4) ∗p < 0,05 100 70 Grupo de control (n=10) Grupo de suicidas (n=10) ∗p < 0,05 0 30 ∗ 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 Grupo de control (n= 4) Grupo de suicidas (n=4) ∗p < 0,05 12 Área de distribución de unión 3 H-8-OH-DPAT (mm2) Unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido) Área de distribución de unión 3 H-8-OH-DPAT (mm2) 90 -3 10 8 6 ∗ * 4 ∗ 2 40 0 -3 30 -3 Unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido) 12 Grupo de control (n=10) Grupo de suicidas (n=10) ∗p < 0,05 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 100 90 80 70 ∗ 60 ∗ 50 40 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 Grupo de control (n= 6) Grupo de suicidas (n= 6) ∗p < 0,05 12 Grupo de control (n=6) Grupo de suicidas (n=6) ∗p < 0,05 Área de distribución de unión 3 H-8-OH-DPAT (mm2) Unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido) 16 10 8 ∗ 6 * 4 2 0 -3 30 -3 0 6 3 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 Figura 2. Densidad de unión ([3H]8-OH-DPAT) al receptor 5-HT1A en controles y suicidas deprimidos de la muestra en conjunto (a), en mujeres (b) y en hombres (c) a cada nivel rostrocaudal del NDR. En suicidas deprimidos, comparado con controles, la densidad de unión es mayor en el rafe rostral y menor en el rafe caudal. En controles, la unión al receptor 5-HT1A es mayor en mujeres que en hombres. En suicidas, la unión es menor en mujeres que en hombres. Figura 3. Área de distribución de la unión ([3H]8-OH-DPAT) al receptor 5-HT1A en controles y suicidas deprimidos de la muestra en conjunto (a), en mujeres (b) y en hombres (c) a cada nivel rostrocaudal del NDR. El área de distribución de unión es menor en suicidas deprimidos que en controles. En mujeres, el área es menor en suicidas deprimidas a los niveles más rostrocaudales, comparado con los controles. En hombres, el área solo es menor a nivel más rostral en suicidas, comparado con los controles. En estos, el sexo no afecta al área de distribución. En mujeres suicidas se identifica un área de distribución menor que en hombres suicidas. En el análisis de las diferencias de sexo en el grupo de control encontramos que el área de unión [3H]8-OH-DPAT muestra un patrón comparable de variación del área en el eje rostrocaudal (F= 4,83; gl= 5, 4; p = 0,0762), sin diferencias entre ambos sexos en el área total del NDR (F= 0,14; df= 1, 8; p = 0,7174; fig. 3b y c). ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 Capacidad de unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido x mm3) 20 el área NDR se localiza rostralmente a nivel de 0 (F= 5,33; gl= 1, 8; p= 0,0490; fig. 3b y c). Grupo de control (n=10) Grupo de suicidas (n=10) ∗p < 0,05 Capacidad de unión 15 10 ∗ ∗ 5 ∗ 0 -3 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) Capacidad de unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido x mm3) 20 12 Grupo de control (n = 4) Grupo de suicidas (n= 4) ∗ p < 0,05 15 10 ∗ * 5 -3 20 0 3 6 9 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 Grupo de control (n= 6) Grupo de suicidas (n= 6) ∗ p < 0,05 15 10 En el NDR se observa una variación rostrocaudal de la capacidad de unión al receptor 5-HT1A (tabla 2; fig. 4a), que refleja las diferentes áreas y densidades en las distintas subregiones de esta estructura. En comparación con el grupo de control, la capacidad de unión es menor en suicidas deprimidos. Entre mujeres, en suicidas TDM se observa una menor capacidad de unión [3H]8-OH-DPAT que en el grupo de control (F= 12,38, gl =1, 6; p = 0,0125) en la región rostral del NDR (a nivel de 0 mm) y a nivel de ensanchamiento del subnúcleo caudal de NDR (nivel de 6 mm; fig. 4b). En hombres, se detectó una menor capacidad de unión [3H]8-OH-DPAT en suicidas deprimidos comparado con el grupo de control (F= 7,04; gl= 1, 10; p= 0,0242) a nivel más rostral de 3 mm y a nivel del ensanchamiento de la porción caudal del NDR dentro del subnúcleo caudal (nivel de 6 mm; fig. 4c). La capacidad de unión (F= 0,06, gl= 1, 8; p =0,8167) fue comparable en hombres y mujeres del grupo de control (fig. 4b y c). En comparación, en mujeres suicidas deprimidas la capacidad de unión [3H]8-OH-DPAT fue menor que en hombres suicidas (F= 10,88; gl= 1, 8; p = 0,0109), mostrando la representación gráfica un aplanamiento total en la región rostral de NDR (fig. 4b y c). Efecto del diagnóstico clı́nico, pH cerebral, intervalo post mórtem, y edad sobre la unión al receptor 5-HT1A, área de unión y capacidad de unión ∗ 0 Capacidad de unión 3H-8-OH-DPAT (fmol/mg de tejido x mm3) 17 No se observaron efectos del pH cerebral (lı́mites 6,23–6,77; p4 0,05), IPM (tiempo en horas desde la muerte hasta la obtención de muestras de tejido cerebral) o de la edad sobre la densidad de unión, capacidad de unión o área de unión de NDR al receptor 5-HT1A. Puesto que en todas las vı́ctimas de suicidio, excepto en una se habı́a establecido el diagnóstico de TDM y en torno al momento de la muerte manifestaron un episodio depresivo y no pudimos determinar si estos hallazgos se deben a la depresión mayor o al suicidio. ∗ Discusión 5 0 -3 3 9 0 6 Niveles rostrocaudales de NDR (mm) 12 Figura 4. Capacidad de unión ([3H]8-OH-DPAT) al receptor 5-HT1A en controles y suicidas deprimidos de la muestra en conjunto (a), en mujeres (b) y en hombres (c) a cada nivel rostrocaudal del núcleo dorsal del rafe. En suicidas deprimidos la capacidad de unión es menor que en controles y esto es verdad a todos los niveles en mujeres y más selectivamente en hombres. En controles, la capacidad de unión es mayor en mujeres que en hombres, pero en suicidas, la capacidad de unión es menor en mujeres que en hombres. Sin embargo, en suicidas deprimidos, en mujeres comparadas con hombres, encontramos una menor área de unión [3H]8-OHDPAT a todos los niveles rostrocaudales (F =9,33; gl =1, 8; p =0,0157) y las pruebas post hoc muestran que, en mujeres suicidas deprimidas, comparadas con hombres, el mayor déficit en En suicidas deprimidos y en el grupo de control, no suicida se observó una diferencia en la distribución anatómica de la unión al receptor 5-HT1A a lo largo del eje rostrocaudal del NDR, que es dependiente del sexo. La variación de la densidad del receptor a lo largo del eje rostrocaudal del NDR se ha reconocido previamente25. Confirmamos y ampliamos las observaciones de estos autores, examinando el área de distribución de la unión al receptor 5-HT1A (mm2) y la capacidad de unión como producto del área transversal, distancia entre las secciones de cada nivel y densidad de unión a dicho nivel [capacidad de unión= (unión transversal al receptor) (volumen de la región)= (fmol/mg de tejido) mm3], junto con la cantidad de unión al autorreceptor 5-HT1A por unidad de tejido (fmol/mg de tejido) a lo largo de la extensión ı́ntegra rostrocaudal del NDR. Esta es una observación nueva porque lo estudios previos no cuantificaron el área o el volumen al considerar la unión total al receptor sino que solo determinaron la unión por miligramo de proteı́na17 o por miligramo de tejido18. La capacidad de unión al receptor 5-HT1A varı́a a lo largo de la extensión rostrocaudal del rafe y en vı́ctimas ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 18 M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 de suicidio deprimidas es menor que en el grupo de control tanto rostral como caudalmente. Encontramos una mayor unión transversal (fmol/mg de tejido) al receptor en el NDR rostral de individuos deprimidos comparado con controles, lo que coincide con los resultados obtenidos por Stockmeier et al17 en el rafe rostral. La unión al receptor fue menor en suicidas comparado con controles en el subnúcleo caudal, lo que explicarı́a la razón de que no se detectaran diferencias entre grupos cuando se promediaron los valores de todo el rafe18. Efecto del nivel rostrocaudal del NDR La diferencia rostrocaudal en la unión transversal podrı́a explicar las discrepancias aparentes observadas en los resultados de los estudios publicados17,18. Nuestro estudio previo incluyó la extensión rostrocaudal del rafe, desde el colı́culo superior haste el pedúnculo cerebeloso medio, pero no dividimos el NDR en regiones anatómicas, como se ha efectuado en el presente estudio. Coincidiendo con Stockmeier et al17, en suicidas deprimidos comparado con controles, encontramos una mayor unión a 5-HT1A a nivel más rostral del NDR, que incluye los subnúcleos interfascicular, ventral, ventrolateral y dorsal22. En comparación, también encontramos que la unión es menor en suicidas deprimidos a niveles más caudales, donde el subnúcleo caudal del NDR se localiza en la porción pontina del rafe22. Por consiguiente, la menor unión a niveles más caudales en suicidas deprimidos, comparado con controles podrı́a compensar la mayor unión en suicidas deprimidos a nivel rostral, lo que explicarı́a la razón de que no se encontraran diferencias entre ambos grupos cuando no se consideró el nivel rostrocaudal18. La observación de un mayor o menor número de receptores de 5-HT1A a diferentes niveles rostrocaudales de muestras de NDR de suicidas deprimidos comparado con controles podrı́a guardar relación con las diferencias en el patrón topográfico de las proyecciones eferentes del NDR rostral, comparado con caudal. La mayor parte de datos sobre sus proyecciones anatómicas proceden de los estudios efectuados en roedores y monos26,27. Desde un punto de vista filogenético, con la hipótesis del NDR se requiere precaución en la extrapolación de estos resultados al ser humano. No obstante, en roedores, las neuronas que se proyectan al caudado-putamen y a la sustancia negra se localizan en la porción rostral del NDR, mientras que las que se proyectan al hipocampo y al locus ceruleus son más caudales28. En ratas las neuronas que se proyectan a la corteza prefrontal medial se agrupan en el NMR29. El núcleo talámico anterior recibe una proyección serotoninérgica de la parte ventromedial y ventrolateral del núcleo ipsolateral30, mientras que la corteza piriforme está inervada por neuronas del NDR ventromedia31. El NDR caudal incluye proyecciones a la glándula pineal en el hámster dorado (Mesocricetus auratus)32. En macacos, se describe una burda relación topográfica rostrocaudal entre los subnúcleos dorsales del rafe y los objetivos corticales. Las proyecciones a la corteza prefrontal dorsolateral se concentran en la parte rostral del NDR27. Por lo tanto, en conjunto, es probable que las neuronas rostrales del NDR proporcionen la mayorı́a de proyecciones a las regiones corticales. Formulamos la hipótesis de que, en suicidas deprimidos, el aumento rostral de la unión al autorreceptor en el NDR se relacionarı́a funcionalmente con nuestro hallazgo de una mayor unión en la corteza prefrontal ventral y lateral2, porque un exceso de autorreceptores tendrı́a tendencia a reducir la tasa de descarga y la liberación del neurotransmisor. Su menor liberación podrı́a dar lugar a una potencial regulación al alza de los receptores postsinápticos en las regiones objetivo, como la corteza prefrontal. La distribución del receptor de 5-HT1A en el NDR se corresponde con precisión con la inmunorreactividad a la TPH23, que también muestra la mayor área transversal en el extremo dorsal del complejo NDR. La inmunorreactividad del ARNm33 y la proteı́na a TPH2 es mayor en el NDR de suicidas deprimidos22, aunque no todos los estudios coinciden en este hallazgo. Bonkale et al34 y nuestro grupo23, pero no otros35, encontramos más neuronas serotoninérgicas en el NDR. El área transversal del receptor 5-HT1A del NDR muestra un extenso pico rostral y un segundo pico, aproximadamente 6 mm caudales (subnúcleo caudal). En comparación con el grupo de control, en suicidas deprimidos se detecta una disminución más pronunciada del área de unión al receptor 5-HT1A, que empieza desde la porción más rostral del NDR y, prácticamente, se omite el segundo pico (fig. 3a). La razón de la existencia de un menor número de autorreceptores más caudalmente parece relacionarse con la presencia de un menor número de neuronas NDR que expresan el receptor 5-HT1A más caudalmente. En el presente estudio no podemos determinar si el nivel de unión por neurona varı́a en el eje rostral-caudal o entre suicidas deprimidos y controles. Se requiere un estudio futuro que examine los niveles de unión por célula para abordar este problema. Una menor expresión del receptor 5-HT1A, indicativa de menos inhibición del autorreceptor, a pesar de una mayor biosı́ntesis enzimática de TPH y de más ARNm de TPH2 (Bach-Mizrachi et al, 2006), podrı́a sugerir los efectos reguladores al alza a nivel neuronal, por lo que las neuronas del NDR tendrı́an más capacidad de sı́ntesis de serotonina y menos autoinhibición. Un efecto de estas caracterı́sticas aumentarı́a la descarga neuronal y podrı́a ser una respuesta compensadora potencial de la falta de serotonina. La disminución de la unión al autorreceptor de 5-HT1A también es un efecto similar al de la administración crónica de ISRS a roedores36. Se ha formulado la hipótesis de que esta regulación a la baja o efecto de desensibilización del autorreceptor es la base de la acción terapéutica de esta clase de fármacos36. Quizás la disminución de la unión al autorreceptor que observamos en suicidas deprimidos es un efecto homeostático similar desde un punto de vista funcional al producido por estos antidepresivos, aunque no suficiente, para restablecer la concentración de serotonina. Capacidad de unión La unión transversal y el área varı́an a lo largo del eje rostrocaudal del NDR. La porción rostral contiene los subnúcleos dorsal, ventral, ventrolateral e interfascicular a los niveles de 3 mm – 3 mm, mientras que el NDR caudal contiene los subnúcleos caudal e interfascicular (niveles de 3–12 mm). Calculamos la capacidad de unión como un ı́ndice de la cantidad total de unión en el NDR rostral y caudal para explicar las variaciones entre subnúcleos. En suicidas deprimidos, la capacidad de unión en el NDR es menor que en el grupo de control tanto rostral como caudalmente. Esto coincide con el hallazgo obtenido con PET in vivo de que el PU al receptor 5-HT1A fue un 42% menor en los núcleos del rafe de individuos deprimidos comparado con los de control5. En este estudio efectuado con PET se usó el antagonista 11-C-WAY100635, mientras que, en nuestros estudios in vitro, usamos el agonista 8-OH-DPAT. Si asumimos que tanto los estudios con PET como nuestro estudio post mórtem son correctos, los suicidas deprimidos se caracterizan tanto por una menor unión a los agonistas de alta afinidad como a los antagonistas de baja afinidad. Dado que la conformación de alta afinidad del receptor está acoplada a la proteı́na G, la unión al agonista es un parámetro de la capacidad de transducción de ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 señales y una menor unión al agonista también es compatible con una menor sensibilidad del autorreceptor. Un menor PU al receptor 5-HT1A también se ha asociado a la agresividad durante la vida19 y, dado que una mayor agresividad se asocia con la conducta suicida, dicho hallazgo también coincide con nuestros resultados post mórtem, pero sugiere una relación con la conducta suicida más que con la depresión mayor. Dicha conclusión también está respaldada por los estudios con PET, efectuados por nuestro grupo donde se halló una mayor unión en pacientes con depresión mayor nunca tratados con medicación7. Esto podrı́a sugerir que el suicidio o la agresividad explicarı́a la baja unión a 5-HT1A observada en la muestra post mórtem del presente estudio. Para examinar esta hipótesis, son necesarios futuros estudios efectuados en muestras de suicidas con un diagnóstico psiquiátrico diferente e individuos deprimidos no fallecidos de suicidio. Efecto del sexo Encontramos un efecto del sexo sobre la unión a 5-HT1A que fue independiente de la diferencia entre grupos. Dentro del grupo de control, en mujeres se detectó mayor unión a 5-HT1A que en hombres. Entre suicidas la unión es menor en mujeres. Ningún estudio previo efectuado post mórtem ha analizado las diferencias en suicidas-controles en la unión a receptores 5-HT1A entre sexos en el tronco cerebral. En la corteza cerebral previamente describimos una mayor unión prefrontal [3H]8-OHDPAT en mujeres que en hombres2, siendo la diferencia de hasta el 40% en algunas subregiones corticales prefrontales. En un estudio efectuado con PET, usando el antagonista [11C] WAY-635 se demostró que en mujeres sanas el PU a 5-HT1A es mayor que en hombres en la corteza y el NDR19 y en el cerebelo20, un hallazgo que coincide con los resultados del presente estudio. Puesto que el estradiol aumenta la unión a 5-HT1A37,38, este efecto podrı́a explicar las diferencias de sexo de la mayor unión al receptor, observadas en mujeres en los estudios post mórtem y con imágenes de PET19,20. Parece ser que estas diferencias de unión tienen consecuencias funcionales. La ipsapirona, un agonista parcial de 5-HT1A produce una mayor estimulación de la secreción de hormona del crecimiento (GH) en hombres que en mujeres, lo que indica una mayor sensibilidad en mujeres39. Los estudios efectuados en animales sugieren diferentes respuestas a 5-HT1A en machos y en hembras40–47. El ratón desprovisto del gen transportador de 5-HT se caracteriza por una menor unión al receptor 5-HT1A en el rafe dorsal y esto es más importante en hembras en comparación con machos48, lo que sugiere que el sexo femenino podrı́a tener una respuesta compensadora más potente frente a los niveles intrasinápticos más altos de serotonina. Debido al número limitado de individuos estudiados, la conclusión con respecto a las diferencias de sexo deberı́a considerarse especulativa y los hallazgos han de reproducirse en muestras a mayor escala. 19 momento de su muerte, por lo que las diferencias observadas probablemente no son atribuibles a la medicación. Encontramos una mayor unión en el NDR rostral, que es la dirección opuesta del cambio que serı́a predecible a partir de los estudios efectuados en animales acerca de los efectos de los ISRS sobre los autorreceptores 5-HT1A52,53. Asimismo, la dirección del cambio fue diferente en el NDR caudal donde los suicidas deprimidos presentaron menos unión, un patrón complejo de anomalı́as que hace que el efecto de la medicación sea una explicación improbable. Puesto que, en la muestra del presente estudio, el 90% de suicidas también tenı́an antecedentes de depresión mayor, los hallazgos pueden deberse a la enfermedad o a la diátesis para el suicido. La mayorı́a de estudios post mórtem del tronco cerebral efectuados en suicidas analizaron a individuos que, en vida, habı́an experimentado un episodio de depresión mayor17,18,23 pero las anomalı́as del sistema serotoninérgico asociadas a los trastornos del humor y al suicidio podrı́an ser diferentes según lo observado, por ejemplo, en la corteza prefrontal. En asociación con la depresión mayor se encontró una disminución difusa de la unión al transportador de la serotonina en toda la extensión dorsoventral de la corteza prefrontal, mientras que una reducción localizada de la unión al transportador en la corteza prefrontal ventral se asoció con el suicidio3. Los estudios futuros deben determinar si las alteraciones serotoninérgicas observadas a nivel del NDR son especı́ficas del suicidio o se relacionan con los trastornos del humor y si las diferentes partes del NDR o de los componentes del sistema serotoninérgico se relacionan con la depresión o el suicidio. Una importante limitación del presente estudio es el pequeño tamaño de la muestra. Dada la complejidad de los cambios del receptor 5-HT1A debido a la localización anatómica y al sexo, los estudios futuros deben tratar de reproducir los hallazgos de la presente investigación. Conclusión El presente estudio demostró cambios anatómicamente distintivos de la unión al receptor 5-HT1A en el NDR en suicidas TDM comparado con el grupo de control. La unión es mayor en los primeros en el NDR rostral y menor en el caudal en comparación con el grupo de control. Esto ı́ndica que la expresión del receptor está afectada de manera heterogénea en el TDM y/o suicido, y que el nivel de expresión del autorreceptor en subregiones del NDR diversas desde un punto de vista funcional puede tener consecuencias para las proyecciones a las regiones especı́ficas del cerebro. La unión al receptor es mayor en mujeres que en hombres, lo que sugiere una mayor inhibición del autorreceptor en el sexo femenino, una disminución de la neurotransmisión serotoninérgica y el potencial de un mayor riesgo de los efectos sobre el humor relacionados con la función de este neurotransmisor. Las mujeres TDM que son vı́ctimas de suicido se caracterizan por un menor número de receptores que las vı́ctimas de sexo masculino y esto puede sugerir una mayor sensibilidad homeostática en el sexo femenino. Limitaciones Los factores de confusión que potencialmente influyen en los resultados de la unión a 5-HT1A incluyen la edad y el IPM. No obstante, emparejamos a los individuos de control y suicidas para estas variables y no encontramos correlaciones significativas de ninguno de estos parámetros con las variables de unión. Otro factor de confusión podrı́a ser el uso de drogas o de medicación que podrı́a desensibilizar los receptores 5-HT1A o alterar su densidad y su acoplamiento a la proteı́na G17,36,49–51. En el presente estudio ningún individuo recibı́a antidepresivos en el Financiación Financiado por becas del PHS MH40210 y MH62105, Diane Goldberg Foundation, NARSAD, AFSP y Paul Janssen Fellowship in Translational Neuroscience. Las fuentes de financiación no desempeñaron ningún papel en el diseño del estudio, obtención de datos, análisis e interpretación de los resultados; tampoco participaron en la redacción del artı́culo o en la decisión de presentarlo para su publicación. ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. 20 M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 Contribuidores Mihran J. Bakalian contribuyó a la organización de los datos y a la preparación de las figuras. Suham A. Kassir proporcionó ayuda en la autorradiografı́a del receptor. Conflicto de interés Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Bibliografı́a 1. Mann JJ. Neurobiology of suicidal behaviour. Nature Reviews. Neuroscience. 2003;4:819–28. 2. Arango V, Underwood MD, Gubbi AV, Mann JJ. Localized alterations in pre- and postsynaptic serotonin binding sites in the ventrolateral prefrontal cortex of suicide victims. Brain Res. 1995;688:121–33. 3. Mann JJ, Huang YY, Underwood MD, Kassir SA, Oppenheim S, Kelly TM, et al. A serotonin transporter gene promoter polymorphism (5-HTTLPR) and prefrontal cortical binding in major depression and suicide. Arch Gen Psychiatry. 2000;57:729–38. 4. Bechara A, Damasio H, Damasio AR. Emotion, decision making and the orbitofrontal cortex. Cereb Cortex. 2000;10:295–307. 5. Drevets WC, Frank E, Price JC, Kupfer DJ, Holt D, Greer PJ, et al. PET imaging of serotonin 1A receptor binding in depression. Biol Psychiatry. 1999;46: 1375–1387. 6. Sargent PA, Kjaer KH, Bench CJ, Rabiner EA, Messa C, Meyer J, et al. Brain serotonin1A receptor binding measured by positron emission tomography with [11C]WAY-100635: effects of depression and antidepressant treatment. Arch Gen Psychiatry. 2000;57:174–80. 7. Parsey RV, Olvet DM, Oquendo MA, Huang YY, Ogden RT, Mann JJ. Higher 5HT(1A) receptor binding potential during a major depressive episode predicts poor treatment response: preliminary data from a naturalistic study. Neuropsychopharmacology. 2006;31:1745–9. 8. Shively CA, Friedman DP, Gage HD, Bounds MC, Brown-Proctor C, Blair JB, et al. Behavioral depression and positron emission tomography-determined serotonin 1A receptor binding potential in cynomolgus monkeys. Arch Gen Psychiatry. 2006;63:396–403. 9. Verge D, Daval G, Patey A, Gozlan H, El Mestikawy S, Hamon M. Presynaptic 5-HT autoreceptors on serotonergic cell bodies and/or dendrites but not terminals are of the 5-HT1A subtype. Eur J Pharmacol. 1985;113:463–4. 10. Middlemiss DN, Fozard JRA. 8-Hydroxy-2-(di-n-propylamino)-tetralin discriminates between subtypes of the 5-HT1 recognition site. Eur J Pharmacol. 1983;90:151–3. 11. Wang RY, Aghajanian GK. Antidromically identified serotonergic neurons in the rat midbrain raphe: Evidence for collateral inhibition. Brain Research. 1977;132:186–93. 12. De Montigny C, Blier P, Chaput Y. Electrophysiologically-identified serotonin receptors in the rat CNS. Effect of antidepressant treatment. Neuropharmacology. 1984;23:1511–20. 13. Artigas F, Romero L, De Montigny C, Blier P. Acceleration of the effect of selected antidepressant drugs in major depression by 5-HT1A antagonists. Trends Neurosci. 1996;19:378–83. 14. Hensler JG. Regulation of 5-HT1A receptor function in brain following agonist or antidepressant administration. Life Sciences. 2003;72:1665–82. 15. Celada P, Puig MV, Casanovas JM, Guillazo G, Artigas F. Control of dorsal raphe serotonergic neurons by the medial prefrontal cortex: Involvement of serotonin-1A, GABA(A), and glutamate receptors. J Neurosci. 2001;21:9917–29. 16. Aghajanian GK, Sprouse JS, Rasmussen K. Physiology of the midbrain serotonin system. En: Meltzer HY, editor. Psychopharmacology. The third generation of progress. New York: Raven Press; 1987. p. 141–9. 17. Stockmeier CA, Shapiro LA, Dilley GE, Kolli TN, Friedman L, Rajkowska G. Increase in serotonin-1A autoreceptors in the midbrain of suicide victims with major depression-postmortem evidence for decreased serotonin activity. J Neurosci. 1998;18:7394–401. 18. Arango V, Underwood MD, Boldrini M, Tamir H, Kassir SA, Hsiung S, et al. Serotonin 1A receptors, serotonin transporter binding and serotonin transporter mRNA expression in the brainstem of depressed suicide victims. Neuropsychopharmacology. 2001;25:892–903. 19. Parsey RV, Oquendo MA, Simpson NR, Ogden RT, Van Heertum R, Arango V, et al. Effects of sex, age, and aggressive traits in man on brain serotonin 5HT(1A) receptor binding potential measured by PET using [C-11]WAY-100635. Brain Res. 2002;954:173–82. 20. Parsey RV, Arango V, Olvet DM, Oquendo MA, Van Heertum RL, Mann JJ. Regional heterogeneity of 5-HT(1A) receptors in human cerebellum as assessed by positron emission tomography. J Cereb Blood Flow Metab. 2005;25:785–93. 21. Kelly TM, Mann JJ. Validity of DSM-III-R diagnosis by psychological autopsy: a comparison with clinician ante-mortem diagnosis. Acta Psychiatr Scand. 1996;94:337–43. 22. Boldrini M, Underwood MD, Mann JJ, Arango V. More tryptophan hydroxylase in the brainstem dorsal raphe nucleus in depressed suicides. Brain Res. 2005;1041:19–28. 23. Underwood MD, Khaibulina AA, Ellis SP, Moran A, Rice PM, Mann JJ, et al. Morphometry of the dorsal raphe nucleus serotonergic neurons in suicide victims. Biol Psychiatry. 1999;46:473–83. 24. Törk I, Hornung J-P. Raphe nuclei and the serotonergic system. En: Paxinos G, editor. The human nervous system. San Diego: Academic Press; 1990. p. 1001–22. 25. Stockmeier CA, Shapiro LA, Haycock JW, Thompson PA, Lowy MT. Quantitative subregional distribution of serotonin1A receptors and serotonin transporters in the human dorsal raphe. Brain Res. 1996;727:1–12. 26. Wilson MA, Molliver ME. The organization of serotonergic projections to cerebral cortex in primates: regional distribution of axon terminals. Neuroscience. 1991;44:537–53. 27. Wilson MA, Molliver ME. The organization of serotonergic projections to cerebral cortex in primates: retrograde transport studies. Neuroscience. 1991;44:555–70. 28. Imai H, Park MR, Steindler DA, Kitai ST. The morphology and divergent axonal organization of midbrain raphe projection neurons in the rat. Brain and Development. 1986;8:343–54. 29. Van Bockstaele EJ, Biswas A, Pickel VM. Topography of serotonin neurons in the dorsal raphe nucleus that send axon collaterals to the rat prefrontal cortex and nucleus accumbens. Brain Res. 1993;624:188–98. 30. Gonzalo-Ruiz A, Lieberman AR, Sanz-Anquela JM. Organization of serotoninergic projections from the raphe nuclei to the anterior thalamic nuclei in the rat: a combined retrograde tracing and 5-HT immunohistochemical study. J Chem Neuroanat. 1995;8:103–15. 31. Datiche F, Luppi PH, Cattarelli M. Serotonergic and non-serotonergic projections from the raphe nuclei to the piriform cortex in the rat: a cholera toxin B subunit (CTb) and 5-HT immunohistochemical study. Brain Res. 1995;671: 27–37. 32. Leander P, Vrang N, Moller M. Neuronal projections from the mesencephalic raphe nuclear complex to the suprachiasmatic nucleus and the deep pineal gland of the golden hamster (Mesocricetus auratus). J Comput Neurol. 1998;399:73–93. 33. Bach-Mizrachi H, Underwood MD, Kassir SA, Bakalian MJ, Sibille E, Tamir H, et al. Neuronal tryptophan hydroxylase mRNA expression in the human dorsal and median raphe nuclei: major depression and suicide. Neuropsychopharmacology. 2006;31:814–24. 34. Bonkale WL, Murdock S, Janosky JE, Austin MC. Normal levels of tryptophan hydroxylase immunoreactivity in the dorsal raphe of depressed suicide victims. J Neurochem. 2004;88:958–64. 35. Baumann B, Bielau H, Krell D, Agelink MW, Diekmann S, Wurthmann C, et al. Circumscribed numerical deficit of dorsal raphe neurons in mood disorders. Psychol Med. 2002;32:93–103. 36. Blier P, De Montigny C. Current advances and trends in the treatment of depression. Trends in Pharmacological Sciences. 1994;15:220–6. 37. Biegon A, Fischette CT, Rainbow TC, McEwen BS. Serotonin receptor modulation by estrogen in discrete brain nuclei. Neuroendocrinology. 1982;35:287–91. 38. Biegon A, McEwen BS. Modulation by estradiol of serotonin receptors in brain. J Neurosci. 1982;2:199–205. 39. Newman ME, Li Q, Gelfin Y, Van de Kar LD, Lerer B. Low doses of ipsapirone increase growth hormone but not oxytocin secretion in normal male and female subjects. Psychopharmacol (Berl). 1999;145:99–104. 40. Gelfin Y, Lerer B, Lesch KP, Gorfine M, Allolio B. Complex effects of age and gender on hypothermic, adrenocorticotrophic hormone and cortisol responses to ipsapirone challenge in normal subjects. Psychopharmacol (Berl). 1995;120:356–64. 41. Ebenezer IS, Tite R. Sex difference in the feeding responses of nondeprived rats to the 5-HT1A agonists 8-OH-DPAT and gepirone. Methods Find Exp Clin Pharmacol. 1994;16:91–6. 42. Haleem DJ, Kennett GA, Whitton PS, Curzon G. 8-OH-DPAT increases corticosterone but not other 5-HT1A receptor-dependent responses more in females. Eur J Pharmacol. 1989;164:435–43. 43. Haleem DJ, Kennett GA, Curzon G. Hippocampal 5-hydroxytryptamine synthesis is greater in female rats than in males and more decreased by the 5-HT1A agonist 8-OH-DPAT. J Neural Transm Gen Sect. 1990;79:93–101. 44. Joppa MA, Rowe RK, Meisel RL. Effects of serotonin 1A or 1B receptor agonists on social aggression in male and female Syrian hamsters. Pharmacol Biochem Beh. 1997;58:349–53. 45. Uphouse L, Salamanca S, Caldarola-Pastuszka M. Gender and estrous cycle differences in the response to the 5-HT1A agonist 8-OH-DPAT. Pharmacol Biochem Beh. 1991;40:901–6. 46. Mendelson SD, McEwen BS. Autoradiographic analyses of the effects of restraint-induced stress on 5-HT1A, 5-HT1C and 5-HT2 receptors in the dorsal hippocampus of male and female rats. Neuroendocrinology. 1991;54:454–61. 47. Curzon G. 5-Hydroxytryptamine and corticosterone in an animal model of depression. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 1989;13:305–10. 48. Li Q, Wichems C, Heils A, Lesch K-P, Murphy DL. Reduction in the density and expression, but not G-protein coupling, of serotonin receptors (5-HT1A) in 5HT transporter knock-out mice: gender and brain region differences. J Neurosci. 2000;20:7888–95. 49. Le Poul E, Laaris N, Doucet E, Laporte AM, Hamon M, Lanfumey L. Early desensitization of somato-dendritic 5-HT1A autoreceptors in rats treated with fluoxetine or paroxetine. Naunyn Schmiedeberg’s Archiv Pharmacol. 1995; 352:141–8. ARTICLE IN PRESS Documento descargado de http://www.elsevier.es el 21/11/2016. Copia para uso personal, se prohíbe la transmisión de este documento por cualquier medio o formato. M. Boldrini et al / Psiq Biol. 2010;17(1):12–21 50. Davidson C, Stamford JA. Contrasting effects of chronic paroxetine on 5-HT1A control of dorsal raphe cell firing and 5-HT release. Neuroreport. 1998;9: 2535–8. 51. Rossi DV, Valdez M, Gould GG, Hensler JG. Chronic administration of venlafaxine fails to attenuate 5-HT1A receptor function at the level of receptor-G protein interaction. Int J Neuropsychopharmacol. 2006; 9:393–406. 21 52. Riad M, Zimmer L, Rbah L, Watkins KC, Hamon M, Descarries L. Acute treatment with the antidepressant fluoxetine internalizes 5-HT1A autoreceptors and reduces the in vivo binding of the PET radioligand [18F]MPPF in the nucleus raphe dorsalis of rat. J Neurosci. 2004;24:5420–6. 53. Aznavour N, Rbah L, Riad M, Reilhac A, Costes N, Descarries L, et al. A PET imaging study of 5-HT(1A) receptors in cat brain after acute and chronic fluoxetine treatment. Neuroimage. 2006;33:834–42.