PROBLEMAS DE PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO A continuación te presentamos unos problemas que deberás resolver indicando: a) La cantidad de medio a preparar. b) La cantidad de componentes a pesar. c) El método para preparar el medio de cultivo. d) ¿Qué debes hacer para que el medio esté listo para su uso? 1. Tienes que preparar 5 tubos de 16 X 150 con 8 mL de caldo BHI cada uno y 3 matraces con 125mL cada uno. Fórmula (por litro) de Cerebro Corazón (BHI), Infusión Infusión de Cerebro de Ternera (a partir de 200 g) ............................. 12,5 g Infusión de Corazón de Res (a partir de 250 g)................................... 5,0 g D(+)-Glucosa .............................................. 2,0 g Peptona de Gelatina ................................... 10,0 g Sodio Cloruro ............................................. 5,0 g di-Sodio Hidrógeno Fosfato........................ 2,5 g pH final: 7,4 ±0,2 1.1 Tienes que preparar 25 cajas de Petri con 20mL cada uno. Agar............................................................ 15,0 g 2. Debes preparar 8 tubos de agar inclinado con 7mL de medio cada uno y 16 cajas de Petri con 15mL cada una. CLED, Medio Fórmula (por litro) Azul de Bromotimol ................................ 0,02 g L-Cistina ................................................. 0,128 g Extracto de Carne .................................. 3,0 g Lactosa .................................................. 10,0 g Peptona de Caseína ............................... 4,0 g Peptona de Gelatina ............................... 4,0 g Agar........................................................ 15,0 g pH final: 7,3 ±0,2 Preparación Suspender 36,1 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir durante 1 minuto. Esterilizar a 121ºC durante 15 minutos. Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estériles. 3. Tienes que preparar 35 placas pequeñas con 12mL cada una para la resiembra de 7 hongos aislados de suelo. Czapek Dox (modificado), Agar Fórmula (por litro) Hierro(II) Sulfato ........................................ 0,01 g Magnesio Glicerofosfato ........................... 0,5 g Potasio Cloruro......................................... 0,5 g Potasio Sulfato ......................................... 0,35 g Sacarosa .................................................. 30,0 g Sodio Nitrato ............................................ 2,0 g Agar.......................................................... 12,0 g Preparación Suspender 45,4 g en 1 l de agua destilada y agitar hasta disolución total. Distribuir y esterilizar a 115ºC durante 20 minutos. 4. En un laboratorio clínico se estudia un brote de Salmonella para lo que se muestreará una comunidad. Para cada uno de los 322 habitantes se utilizarán 3 muestras, y cada una de ellas se procesará en 3 placas de medio SS. Salmonella y Shigella, Agar (SS) Fórmula (por litro) Extracto de Carne ............................... 5,0 g Hierro(III) Citrato................................... 1,0 g Lactosa ............................................... 10,0 g Peptona............................................... 5,0 g Sales Biliares ....................................... 8,5 g Rojo Neutro ......................................... 0,025 g tri-Sodio Citrato ................................... 8,5 g Sodio Tiosulfato................................... 8,5 g Verde Brillante ..................................... 0,330 mg Agar .................................................... 13,5 g pH final: 7,0 ±0,2 Preparación Suspender 60 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullición y hervir durante 1 minuto. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Dejar enfriar hasta 45-50ºC y distribuir en placas de Petri estériles, empleando 20 ml por placa. Dejar solidificar el medio.