XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
EVALUACIÓN DEL EFECTO ANTI-APOPTÓTICO DE LA DAPSONA
ADMISNITRADA SOLA O EN COMBINACIÓN CON EL FENOBARBITAL EN UN
MODELO DE LESIÓN TRUMÁTICA DE LA MÉDULA ESPINAL EN RATA.
Sergio Daniel Sandoval Mercado, CUCS Universidad de Guadalajara. Correo:
sergio_sanmer@hotmail.com Asesora: Dra. Araceli Díaz Ruiz, Instituto Nacional de
Neurología y Neurocirugía. Correo: adiaz@innn.edu.mx
Planteamiento del Problema
La lesión traumática de la medula espinal (LTME) es un problema de salud publica
que afecta a población económicamente activa (20-45 años), con profundos
efectos económicos, físicos y emocionales. La incidencia anual reportada en el
D. F. es de 18.1 nuevos casos por cada millón de habitantes. Después de la lesión
primaria se desencadenan diversos mecanismos de daño secundario, como son:
alteraciones vasculares y metabólicas (disminución de ATP), estrés oxidativo,
excitotoxicidad (incremento de glutamato y aspartato), inflamación, apoptosis,
desmielinización, degeneración Walleriana, muerte de oligodendrocitos y por
ultimo, formación de cicatriz glial. Actualmente se utiliza metilprednisolona como el
tratamiento gold standard en México, sin embargo, la Food and Drug
Andministration (F.D.A.) no lo ha aprobado por sus efectos adversos. Por tal
motivo, en el presente trabajo se propone el uso de la Dapsona (DDS) y el
fenobarbital (FB) como fármacos neuroprotectores en el tratamiento de la etapa
aguda de la LTME con base en su mecanismo de acción (agente anti-inflamatorio
y anti-excitotoxico, respectivamente), tomando en consideración que la muerte
celular programada o apoptosis es un evento de daño importante y que este se
incrementa por efecto del estrés oxidativo, la excitotoxicidad y la inflamación, y
que la Dapsona y el fenobarbital contrarrestan estos eventos, el objetivo del
presente trabajo es: evaluar el efecto anti-apoptotico de la dapsona administrada
sola o en combinación con el fenobarbital en un modelo de LTME en rata.
Metodología
Se utilizaron 33 ratas Wistar hembras de 200 a 250 gr de peso, sometidas a una
lesión por contusión modera a nivel de la novena vértebra torácica, con el equipo
computarizado NYU. Los animales fueron
divididos aleatoriamente como
siguiente: Grupo 1) ratas con laminectomía (Lam.); grupo 2) sin lesión + solución
salina (S. S.). grupo 3): Con LTME + DDS (25mg/kg), grupo 4) ratas con lesión +
FB (30 mg/kg) y grupo 5) animales con lesión + DDS/FB. Las ratas se sacrificaron
a 24 y 72 h después del daño y se realizó la toma de muestra de 1 cm de medula
espinal, congelando inmediatamente en nitrógeno liquido y posteriormente se
almaceno a -70ºC. Se realizó la cuantificación de proteínas utilizando el método de
Lowry y colaboradores. Finalmente, se realizo el ensayo de actividad de caspasa 3
(como marcador de apoptosis) utilizando el kit caspase-3 activity assay,
fluorometric.
Conclusiones
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del
Pacífico
Agosto 2014
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La presente investigación no ha concluido, en ella se espera demostrar que la
DDS y el FB tienen efecto anti-apoptótico reflejado en una disminución en la
actividad de caspas 3.
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Agosto 2014