PO5176A

ESPECIFICACIONES DEL PRODUCTO
Nombre del Producto BrillianceTM E.coli / Coliform Selective
Código del Producto
PO5176A
Forma del Producto
Placa preparada
Almacenamiento
6 – 12° C, en oscuridad
Volumen
17g ± 5 %
Presentación
10 placas envueltas en plástico
pH
6,7 ± 0,2
Color
Marfil, transparente
Periodo de validez
8 semanas
Uso Propuesto
Medio cromógeno, selectivo para la
detección y recuento de Escherichia
coli y otros coliformes de muestras de
alimentos y agua.
Sólo para uso profesional.
Técnica
Depende de los diferentes métodos.
Para más información véase Oxoid
CM1046.
Formulación típica
Peptona
Fosfato disódico
Cloruro sódico
Fosfato monopotásico
Lauril sulfato sódico
Mezcla cromogénica
Triptófano
Agar
gramos por litro
8,0
2,2
5,0
1,8
0,1
0,35
1,0
10,6
Control de Calidad
1. Control de las características generales,
etiquetado e impresión
Citrobacter freundii ATCC 8090
2. Control de esterilidad
> 72 h @ 25 ± 1° C, aerobio
> 72 h @ 36 ± 1° C, aerobio
3. Control biológico
Densidad del inóculo para productividad: 10 – 100 ufc por placa
Densidad del inóculo para selectividad: 104 – 105 ufc por placa
Densidad del inóculo para especificidad: < 10 000 ufc por placa
Condiciones de incubación: 18 – 24 h @ 36 ± 1° C, aerobias
Cepa de Control
Crecimiento
®
Escherichia coli ATCC 25922
Citrobacter freundii ATCC® 8090
Staphylococcus aureus ATCC® 25923
Colonias violetas de 1 mm, indol positivas*
Buen crecimiento, colonias pequeñas de color rosa, indol negativas
Inhibición parcial (≤ 100 ufc).
®
ATCC es marca registrada de la “American Type Culture Collection”.
*) La identificación presuntiva de E.coli puede ser confirmada con un test rápido de indol (DMAC) (e.g. Microbact-Reagent Spot Indole DMACA,
TM
código de producto MB1448A o BactiDrop Spot Indole, código de producto R21550) para obtener resultados en el día. No usar Kovacs,
debido a que la coloración púrpura de la colonia puede hacer difícil la interpretación de los resultados.
Fecha 13/05/2008
PO5176Av06
OXOID GmbH ⋅ Am Lippeglacis 4-8 ⋅ D-46483 Wesel
INFORMACIÓN DEL PRODUCTO
Nombre del Producto BrillianceTM E.coli / Coliform Selective
Código del Producto
PO5176A
Descripción
El recuento y enumeración de Escherichia coli y coliformes son importantes indicadores de la higiene medio
ambiental y alimentaria. La detección de la actividad ß-glucuronidasa es ampliamente utilizada para diferenciar
Escherichia coli, ya que el enzima codificado por el gen uidA sólo se encuentra presente en E.coli pero no en otros
miembros del grupo de los coliformes. La mayoría de los coliformes son lactosa-positivo, tiene actividad ßgalactosidasa, codificadas por el gen lacZ, y esto se utiliza para diferenciar este grupo de otros microorganismos
capaces de crecer en el medio selectivo. Estos resultados de E.coli en púrpura, es porque es de romper ambos
cromógenos, mientras que otros coliformes dan colonias rosas por escindir sólo el cromógeno correspondiente a
galactosidasa (ver tabla 1).
BrillianceTM E.coli/ Coniform Selective Agar contiene dos agentes cromógenos:
•
•
Rose-Gal: detecta actividad ß-galactosidasa.
X-Glu: detecta actividad ß-glucuronidasa.
El medio también contiene lauril sulfato sódico que actúa como agente selectivo, inhibiendo el crecimiento de los
microorganismos Gram-positivos. Debido a la adición de triptófano es posible una rápida confirmación de E.coli
por formación de indol mediante un test de spot indol.
Tabla 1: resultados esperados, usando BrillianceTM E.coli/ Coliform Selective Agar.
Microorganismo
Escherichia coli
Coliformes
Otros microorganismos
ß-glucuronidasa
+
+
ß-galactosidasa
+
+
-
Color de Colonia
Púrpura
Rosa
Incolora ó Azul
Técnica
Preparar las muestras alimentarias por dilución 1:5 ó 1:10 (según corresponda) con Agua de Peptona esteril 0,1%
(w/v) (OXOID, código de producto CM0009), y homogenizar en un Stomacher ó una licuadora de laboratorio. Para
muestras de aguas fuertemente contaminadas, primero deberían ser diluidas en Solución Ringer (OXOID, código
de producto BR0052) ó Maximun Recovery Diluent (OXOID, código de producto CM0733), para que el número de
colonias a contar sea leible, por ejemplo 20-100 colonias. El agua potable debe concentrarse por centrifugación ó
por el método de filtración de membrana.
A continuación las técnicas que se pueden usar:
1. Siembra en placa
Sobre la superficie seca de las placas preparadas. Pipetear 0,1ml de la muestra preparada sobre la placa y
extenderla por toda la superficie con un asa estéril. Incubar las placas durante 24h a 37ºC.
2. Método de vertido en placa
Pipetear 1 ml de la muestra preparada en una placa vacía. Añadir 15-20 ml de medio, enfriado a 45ºC. Agitar
suavemente para permitir que se mezcle a fondo. Incubar durante 24h a 37ºC.
3. Método de filtro de Membrana
Sobre la superficie seca de las placas. Filtrar un volumen de muestra apropiado a través de la membrana. Situar la
membrana sobre la superficie del agar, evitando que se formen burbujas debajo de la membrana. Incubar 24h a
37ºC.
Para todos lo métodos, contar el número de colonias rosas y púrpuras. Multiplicar el número de colonias por el
factor de dilución y expresar los resultados como el número de E.coli y coliformes por gramo de alimento o
volumen de agua.
La identificación presuntiva de E.coli puede ser confirmada por un test rápido de indol (DMAC) (ej. MicrobactReagent Spot Indole DMACA, código de producto MB1448A, ó BactiDropTM Spot Indole, código de producto
R21550) para obtener los resultados en el día. No usar Kovacs, debido a la coloración morada de las colonias,
podría dificultar la interpretación de los resultados.
Bibliografía
1.
2.
3.
Kilian M., Bulow P. (1976). Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84, pp. 245-251.
Kilian M., Bulow P. (1979). Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 87, pp. 271-276
Frampton E. W., Restaino L., Blaszko N. (1988). J. Food Prot. Vol:51(5), pp.402-404.
Fecha 13/05/2008
PO5176Av06
OXOID GmbH ⋅ Am Lippeglacis 4-8 ⋅ D-46483 Wesel