Readycult® Coliformes 100

1.01298.0001
Control de calidad
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Readycult®
Coliformes 100
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Contenido: 20 capsulas
Cada cápsula para 100 ml de muestra de agua.
Aprobado EPA (40 CFR part 141)
Aplicación
Test de presencia/ausencia para la detección simultánea de coliformes totales y E. coli en el análisis de aguas de acuerdo a la norma
para Coliformes USEPA (Sec.141.21)
Fundamento
La elevada calidad nutricional de las peptonas y el tampón fosfato
incorporado garantizan un rápido crecimiento de los coliformes mientras que el laurilsulfato inhibe de forma sustancial la flora acompañante, especialmente la grampositiva. La detección simultánea de
Coliformes y E.coli es posible por el sustrato cromogénico X-GAL y el
sustrato fluorogénico MUG. Una coloración azul-verdosa del caldo
indica la presencia de coliformes totales, y la de E.coli por una fluorescencia azul bajo luz UV (365 nm).
Composición en g / cápsula
Triptosa 0,5; Sodio cloruro 0,5; Sorbitol 0,1; Triptófano 0,1; Di-potasio
hidrógeno fosfato 0,27; Potasio dihidrógeno fosfato 0,2; Laurilsulfato
sodio sal 0,01; X-GAL 0,008; MUG 0,005; IPTG 0,01.
Procedimiento
Nota: En el caso de que el test no pueda hacerse “in situ”, el test
debe realizarse
– antes de 6 horas después de tomada la muestra si se guarda a
temperatura ambiente
– antes de 24 horas si se guarda en nevera.
1. Tomar una cápsula, golpear suavemente para asegurarse que
todos los gránulos están en el fondo y doblar la parte superior
hasta que se rompa y se abra.
¡Atención: Para evitar el riesgo de contaminación, no tocar la
abertura!
2. Añadir el contenido a 100 ml de la muestra de agua en un recipiente
no fluorescente con una capacidad minima de 120 ml.
3. Cerrar el recipiente y agitar hasta la completa disolución de los
gránulos.
4. Incubación: 24 h de 35° a 37 °C. Si se incuba a temperatura
ambiente (+ 20 a + 25 °C), el tiempo de incubación se prolonga a
48 horas.
Interpretación de los resultados
Negativo: Sin cambio de color. El caldo permanece ligeramente
amarillo: ausencia de Coliformes y E.coli.
Cepa
Crecimiento
Cambio
de color
E.coli ATCC
11775
+
+
+
+
Citrobacter
freundii
ATCC 8090
+
+
–
–
Salmonella
typhimurium
ATCC 14028
+
–
–
–
Klebsiella
pneumophila
ATCC 31488
+
+
–
–
–
–
Pseudomonas
aetuginosa
ATCC 10145
Eliminación
Según normas GLP.
Almacenaminto
Almacenar en lugar seco y bien cerrado entre +15°C y + 25 °C.
Proteger de la luz.
Caducidad
Ver fecha de caducidad.
Productos auxiliares
Merck Art.No.
Producto
Contenido del pack
1.13203.0001
Lámpara UV 365 nm
Unidad
1.09293.0100
Reactivo de indole KOVAC
100 ml
1.13311.0001
Mini-Incubador CULTURA
230 Voltios
Unidad
1.15533.0001
Mini-Incubador CULTURA
115 Voltios
Unidad
Normas / Referencias
USEPA: 40 CFR Part 141 (Sec.141.21 ) Federal Register/ Vol. 67, No. 209, Tuesday,
October 29, 2002 / Rules and Regulations
Microbiology Manual for the Meat Industry, 3rd Edition April 2000, New Zealand,
Chapter 11 Testing Potable Waters for Indicator Bacteria, A1.1 Chromogenic Substrate Methods for Total Collforms and E.coli
Ministry of Health, New Zealand, Drinking Water Standard for New Zealand 2000
(DWSNZ:2000), Enzyme Substrate Coliform Test
Ministry of Health, Colombia, Potable Water Quality Regulations, National Standard
475, 2001, Defined Substrate Technology for Total Coliforms and E.coli
Manafi, M.; Rosman, Evaluation of Readycult® Presence/Absence Test for the
Detection of Total Coliforms and E.coli in Water. 98th American Society of
Microbiology, Atlanta, 17–21th May 1998
Lee, J.V.; Lightfoot, N. F.; Tillett, H. E. An evaluation of presence/absence tests for
coliforms and Escherichia coli. Intemational Conference on Coliforms and E.coli:
Problem or solution? 24–26th September 1995, University of Leeds, UK
Coliformes totales:
Cualquier cambio de color del caldo a azul-verdoso, aunque sea
sólo en su parte superior, confirma la presencia de coliformes
(reacción X-GAL).
E.coli: Comprobar si hay fluorescencia en el caldo, colocando frente
a los tubos o frascos una lámpara de UV (365 nm). Una luz fluorescente azul indica la presencia de E.coli (reacción MUG).
¡Atención: Proteger los ojos de la luz UV directa!
Para confirmar la presencia de E.coli en el recipiente con fluorescencia positiva, añadir 2,5 ml de reactivo de KOVACS (reacción de indol).
Un anillo de color rojo confirma la presencia de E.coli.
Cambio de color
a azul-verdoso
Fluorescencia
Reacción
Indol
Coliformes
totales
+
–
–
E.coli
+
+
+
Negativo
Status: Junio 2008
Sin cambio
de color
Fluorescencia Reacción
Indol
Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany,
Tel. +49 (0)61 51 72-24 40, www.merck.de