PRÁCTICA 3: RECUENTO CELULAR SANGUÍNEO Materiales: - Sangre capilar. Material sanitario para la obtención de muestra capilar: alcohol 70º, gasas estériles, lanceta… Solución salina fisiológica. 1 Ependorf. Líqudio de Türk. Tampón PBS. Pipetas dilutorias. Cámara cuentaglóbulos (Neubauer) Microscopio. Procedimiento: 1. Obtención de muestra de sangre capilar siguiendo el mismo procedimiento que en la práctica anterior. 2. Con ayuda de una pipeta extraer 0.5μl de sangre y depositarlo en el Ependorf. 3. A continuación se añade al Ependorf 100μl de líquido de Türk. El líquido de Türk contiene azul de metileno que nos teñirá las moléculas ácidas (DNA y RNA, es decir el núcleo) de un color azul oscuro y ácido acético que lisará los glóbulos rojos facilitando así la visualización de los glóbulos blancos. 4. Con la pipeta pasaremos la muestra obtenida a la cámara de Neubauer en la cámara central, cubriéndola con un cubreobjetos. 5. Colocar la cámara de Neubauer en el microscopio. 6. En el microscopio deberemos localizar una retícula que nos ayudará en el contaje de los glóbulos rojos. Esta retícula consta de una cuadrícula formada por 9 cuadros grandes. El cuadrado central se utiliza para el recuento de glóbulos rojos. Para el recuento glóbulos blancos utilizaremos los 4 cuadrados de las esquinas que a su vez están divididos en 16 cuadrados más pequeños. Para contar los leucocitos es importante que cada uno adquiera una metodología para evitar contar un mismo leucocito dos veces. 7. La fórmula que utilizamos para el recuento es la siguiente: Número de leucocitos contados x 20 (factor de dilución) x 10 (altura) 4 (número de superficie) Los valores leucocitarios normales oscilan entre: 4500 y 11000 por ml3