Informes de los Laboratorios de Referencia de la OIE Actividades del año 2011 Enfermedad (o tema) para la(el)cual es designado laboratorio de referencia de la OIE: Paratuberculosis Dirección del laboratorio: Talcahuano 1660, Martínez, Buenos Aires, CP 1640 ARGENTINA Tel.: 054-11-4836-1992 Fax: 054-11-4836-1992 Dirección de correo electrónico: Sitio web: dilab@senasa.gov.ar balonso@senasa.gov.ar www.senasa.gov.ar Nombre (incluir título y puesto) del Jefe de laboratorio (responsable oficial): Lic. Verónica Torres Ledham Nombre (incluir título y puesto)del experto de referencia de la OIE: M.V. Bernardo R. Alonso Nombre (incluir título y puesto)del redactor de este informe (si difiere del anterior): Informes anuales de los Centros de referencia de la OIE, 2011 M.V. Bernardo R. Alonso 1 Paratuberculosis Parte I:Resumen de las actividades generales relacionadas con la enfermedad 1. 2. Prueba(s) usada(s) o disponible(s) en su laboratorio para la enfermedad o tema especificados Prueba Para Especificidad Total Cultivo bacteriológico Aislamiento bacteriano genero 12 Tipificación bacteriológica Identificacion bacteriana especie 4 PCR Hsp65 Genero 12 PCR Is900 M.avium sp.paratuberculosis 3 PRA Hsp65 + HaeIII y BStEII Género / especie 7 Serología anticuerpos especie 365 Histopatología Presencia de lesiones típicas y bacilos en ganglios y órganos género n/r Producción y distribución de reactivos de diagnóstico Con respecto al diagnóstico de paratuberculosis, se producen PPD Bovina, PPD aviar y Polvo liofilizado de Mycobacterium phlei, como también reactivos para tipificación bioquímica y enzimática de micobacterias. Se producen y distribuyen dentro del país y para organismos e instituciones gubernamentales medios de cultivo de Herrold y Herrold con micobactina, así como cepas de referencia utilizadas tanto en la producción de reactivos diagnósticos como en los controles de pruebas de tipificación de micobacterias o diagnóstico molecular. 2 Tipo de reactivo Cantidad suministrada a nivel nacional (incluso para uso propio) Cantidad suministrada a otros países PPD Bovina 21250 dosis 350 PPD aviar 8200 dosis 150 Herrold 120 Herrold con micobactina 120 Mycobacterium phlei 6 gramos - Cepas de Referencia 1 1 Informes anuales de los Centros de referencia de la OIE, 2011 Paratuberculosis Parte II: Actividades específicamente relacionadas con el mandato de los Laboratorios de Referencia de la OIE 3. Armonización y normalización internacional de los métodos para las pruebas de diagnóstico o la producción y evaluación de vacunas Durante el año 2011, y a pedido de la comisión de redacción científica de se participó de la revisión del capítulo 2.1.11 referido a Paratuberculosis del Manual de las Pruebas Diagnósticas y del las Vacunas para los Animales Terrestres. a) Creación y mantenimiento de una red de contactos con otros laboratorios de referencia de la OIE designados para el mismo patógeno o enfermedad y organización de evaluaciones de calidad regulares interlaboratoriales para asegurar la comparabilidad de resultados - No se realizaron ensayos internacionales en anillo con laboratorios de OIE - No se realizaron evaluaciones interlaboratorios con fines de armonización y validación internacional. b) Organización de evaluaciones de calidad interlaboratoriales con otros laboratorios que no sean de referencia de la OIE que usen pruebas para los mismos patógenos y enfermedades para asegurar la equivalencia de resultados. s/d 3. Preparación y suministro de estándares internacionales de referencia para las pruebas de diagnóstico o las vacunas Como ya se mencionó se elabora tuberculina bovina y aviar, la cual si bien no está oficialmente reconocida por OIE es utilizada como patrón secundario para la estandarización de las producciones locales de los países de la región. Durante 2011 se proveyó de 350 dosis de ppd bovina y 150 dosis de ppd aviar. Se provee también de las cepas de referencia necesarias tanto de M.bovis como de M. avium para la producción de dichas tuberculinas. Se enviaron durante este 2011 1 cepas a países de la región. Entre los países mencionados se encuentran Honduras, República Dominicana, Paraguay, Perú y Colombia. Material utilizado como referencia disponible en el laboratorio Tipo de reactivo Cantidad suministrada a nivel nacional (incluso para uso propio) Origen PPD Bovina 5000 dosis Propio a partir de estándares internacionales PPD aviar 7000 dosis Propio a partir de estándares internacionales Mycobacterium phlei liofilizado 40 gramos Propio Cepas de Referencia M.bovis AN5 M.avium D4ER M.tuberculosis H37Rv M.bovis BCG M.phlei Propio a partir de estándares internacionales M.avium sp paratuberculosis Suero control positivo paratuberculosis Informes anuales de los Centros de referencia de la OIE, 2011 120 ml Propio 3 Paratuberculosis 5. Investigación y desarrollo de nuevos procedimientos de diagnóstico y control Se continúa trabajando en un proyecto denominado “Identificación de antígenos de Mycobacterium avium sp. paratuberculosis”, consistente en el estudio de lípidos y proteínas de Map y su comparación con los de M. avium sp avium, buscando encontrar antígenos específicos que desencadenen respuestas humorales y celulares útiles en el diagnóstico de la paratuberculosis. El proyecto es coordinado por el Instituto de Biotecnología de Inta Castelar y la función de nuestro laboratorio es la provisión de los filtrados de cultivos de Map y M. avium para la identificación y extracción de lípidos y proteínas. 6. Recopilación, análisis y difusión de datos epizootiológicos concernientes a la lucha internacional contra las enfermedades La paratuberculosis es una enfermedad endémica en nuestro país, con distribución en gran parte del territorio argentino. 7. Mantenimiento de un sistema de control de calidad, bioseguridad y seguridad biológica en relación al patógeno y a la enfermedad La institución participa de un sistema continuo de aseguramiento de la calidad y en relación a la paratuberculosis bovina se cuentan con instalaciones de seguridad biológica de Nivel II recientemente inauguradas 8. Suministro de asesoramiento experto a la OIE o a los Países Miembros de la OIE Como ya se mencionó se participó en la revisión del capítulo referido a paratuberculosis del Manual de las Pruebas Diagnósticas y del las Vacunas para los Animales Terrestres de OIE. 9. Suministro de formación científica y técnica al personal de otros Países Miembros de la OIE Como en años anteriores, durante 2011 concurrieron a las instalaciones del laboratorio de micobacterias profesionales provenientes de las Repúblicas de Cuba, Paraguay, Honduras y Uruguay. Sin ser cursos formales, en todos los casos se trató de visitas coordinadas tendientes a la armonización de sus métodos de diagnóstico No hay realizados hermanamientos de laboratorios durante 2011. 10. Suministro de servicios para las pruebas de diagnóstico a otros Países Miembros de la OIE Se presta servicio a instituciones de otros países con respecto al control de reactivos biológicos destinados a diagnóstico, concretamente tuberculinas bovinas a Uruguay y Perú. 11. Organización de reuniones científicas internacionales en nombre de la OIE o de otros organismos internacionales No se concurrió a reuniones internacionales en condición de organizador. 12. Participación en estudios científicos internacionales colaborativos Tuberculosis y Paratuberculosis”. Diagnóstico con métodos desarrollados, pruebas con antígenos e inmunógenos noveles y estrategias zooepidemiológicas para su control en relación a Salud Publica. 4 Informes anuales de los Centros de referencia de la OIE, 2011 Paratuberculosis 13. Publicación y difusión de información concerniente al trabajo de la OIE (incluidas una lista de las publicaciones científicas, las actividades de publicación por internet, las presentaciones en conferencias internacionales) Presentaciones en conferencias y reuniones internacionales Producción de mezclas antigénicas para el diagnóstico de tuberculosis (TBB) y paratuberculosis (PTB). Maria Laura Mon, Mariana Viale, Gabriel Traveria, Fiorela Alvarado, Bernardo Alonso, Douwe Bakker, Peter Willemsen, Mahavir Singh, María Isabel Romano. Congreso Brasileño de Microbiología. Junio 2011.. Publicaciones científicas en revistas con examen por pares No se han hecho a título personal publicaciones de relevancia durante el año 2011. _______________ Informes anuales de los Centros de referencia de la OIE, 2011 5