“Evaluación morfológica y funcional de fibroblastos periodontales

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“Evaluación morfológica y funcional de fibroblastos periodontales sometidos a
fuerzas ortodóncicas”. Registro J-011.2008. Res.Nº 831/08 C.S.
Director: María Victoria Aguirre
Personal de Investigación: María Alejandra Gili, Karina Latyn, María Silvia Almiró n
Personal de Apoyo: Marcela Solís, Elisa Picek
Facultad de Odontología: Cátedra de Histología y Embriología General y Dentaria
Servicio de Ortodoncia, Laboratorio de Anatomía Patológica.
Facultad de Ciencias Exactas, Naturales y Agrimensura: Cátedra de Qca.Biológica II.
Campus Corrientes “Deodoro Roca”. 3400. Corrientes. 03783-457992.
e-mail: magili@odn.unne.edu.ar
Introducción: Este proyecto de tipo descriptivo-analítico tiene por objeto describir las
características del tejido conectivo periodontal y de los fibroblastos sometidos a fuerzas
ortodóncicas mediante microscopía óptica con técnicas de coloración histológica
convencionales (Hematoxilina-Eosina) y especiales (Tricrómica de Masson), como así
también su caracterización con micoroscopía electrónica. Se pretende determinar la
histomorfología de los fibroblastos periodontales tras la aplicación de una fuerza
ortodóncica, como así también posibles modificaciones ultraestructurales que podrían
sufrir en dicha situación, en comparación con fibroblastos de tejido periodontal de
piezas dentarias no sometidas a dichas fuerzas.
Material y Métodos: Se obtuvieron muestras del tejido periodontal de pacientes
sistémica y periodontalmente sanos en los cuales se requiere de exodoncia de las piezas
dentarias que fueron previamente sometidas a fuerzas ortodóncicas. Los pacientes
concurren al Servicio de Ortodoncia de la Facultad de Odontología. En los casos
clínicos que el plan de tratamiento incluya la exodoncia de algunas piezas dentarias
estas son previamente sometidas a fuerzas leves a fin de facilitar su extracción
disminuyendo el daño que puedan sufrir los tejidos peri dentarios como el ligamento
periodontal. Las fuerzas aplicadas son de tipo leve con arcos iniciale s elásticos, arco de
Niti 0,12; o arco de acero trenzado, twinflex o coaxial. El tiempo de aplicación de la
fuerza varia entre 15 y 30 días aproximadamente. Las muestras de tejido fueron
procesadas con Hematoxilina-Eosina (H/E) Una vez obtenida la muestra y
protocolizada la misma se fija en Formaldehído al 10% (Formol). Luego se realiza la
deshidratación e inclusión en parafina concluyendo con la obtención del bloque, el cual
es modelado obteniéndose finas secciones con micrótomo que serán fijadas en u n
portaobjeto. Luego se desparafinan los cortes y se hidratan en agua destilada. Tinción
nuclear: en hematoxilina durante 2 a 12 min. de acuerdo a la formula utilizada. Viraje
de la hematoxilina: en agua corriente hasta desprendimiento total del color (3 a 5 min.).
Lavado en agua destilada o corriente. Coloración citoplasmática con eosina al 0.5% o en
una mezcla de eosina/floxina al 0.5% durante 15 a 30 seg. Lavado en agua destilada.
Deshidratar, aclarar y montar.
- Observación al Microscopio Óptico de las muestras obtenidas y registro fotográfico en
Microscopio Olympus CH30 con sucesivos aumentos de 40X, 100X y 400X.
Resultados: En esta primera etapa fueron analizadas las muestras de tejido periodontal
sometido a fuerzas ortodóncicas mediante la observación al microscopio óptico con
coloración convencional de H/E y no se destacan importantes cambios morfológicos a
nivel celular. Los fibroblastos se evidencian paralelos a los haces de fibras lo que hace
suponer su intensa actividad remodeladora de fibras colágenas durante la aplicación del
movimiento ortodóncico. Los núcleos mantienen su forma elíptica de localización
central y grande. A nivel del tejido conectivo de variedad fibrosa se evidencian aislados
focos de hemorragia como así también tejido conectivo laxo perivascular.
Conclusiones: Dado que las observaciones realizadas corresponden a la primer variable
de análisis que es la coloración con H/E los resultados parciales obtenidos hasta el
momento permiten suponer que durante el tiempo de aplicación de fu erzas ortodóncicas
de entre 15 a 30 días no da lugar a cambios histomorfológicos importantes en el tejido
periodontal aunque en etapas sucesivas la aplicación de técnicas de coloración
específicas ( Tricrómica de Masson), como así también la observación al Microscopio
electrónico de barrido permitirian complementar estas observaciones y profundizar el
análisis.
Bibliografía:
1. Lehm, Andreas. “Histología dentaria y periodontal: fundamentos para el tratamiento en
odontología”. Quintessence (Edición española). Volumen XX, No. 2 (129-135)
2. Gutiérrez Salinas, J. y colab. “Cambios en la expresión de laminina en el ligamento
periodontal en dientes sujetos a tensión ortodóntica en humanos”. Revista de la
Asociación Dental Mexicana. Vol. LXII, No. 5 Septiembre-Octubre 2005 pp 171-176.
En: http://www.medigraphic.com/espanol/e-htms/e-adm/e-od2005/e-od05-5/emod055c.htm.
3. Arnold, L.; Baram,P. “In Vitro Culture of Periodontal Li gamnet Cells”. Journal Dental
4. Moreno,G. y colab. “Efecto de la capsaicina sobre la proliferación y ciclo celular de
fibroblastos pulpares humanos “2002. En:
www.encolombia.com/odontologia/foc/foc20302-efecto.htm
5. Traverso Martínez, A. y colab. “Efecto de la cotinina en la viabilidad de fibroblastos”.
Acta odontológica venezolana. Volumen 42. Nº1. 2004. En:
http://www.actaodontologica.com/
ediciones/2004/1/efecto_cotinina_viabilidad_fibroblastos.asp
6. Gonzalez, O. “Fenómenos clínicos e histológicos asociados a la magnitud de la fuerza
ortodóncica”. En www.javeriana.edu.co/Facultades/Odontologia/posgrados/ortodoncia/
7. articulosrevision/11_revision.html.
8. Guercio de Dinatale, Elisabetta. Biología del movimiento dentario ortodóntico:
Revisión de conceptos. Acta Odontológica Venezolana. [online]. ene. 2001, vol.39,
no.1 [citado 25 Febrero 2008], p.61 -65. Disponible en la World Wide Web:
<http://www.scielo.org.ve/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0001636520010001000
11&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0001-6365.
9. Garat, J.A, Gordillo, M.E., Ubios, A.M “Effect of orthodontic forces on root resorbtion
in molars submitted to experimental periodontitis”. Acta Odontológica
Latinoamericana. Vol 17. nº 1-2 (pág 3-7). 2004
10. Theilig,C.;y colab. “Effects of Mechanical Force on Primary Human Fibroblasts
Derived from the Gingiva and Periodontal Ligament”. Journal Dental Research. Vol 80
(8). 1777-1780. 2001
11. 13)Garat, J.A., Martín, A., Gordillo, M.E., Ubios, A.M “Bone response to different
strenght orthodontic forces in animals with periodontitis”. Journal of Periodontal
Research. Vol 40. issue 6. (pág 441-445). Diciembre 2005
12. Lewintre de Borjas, M y Collantes, Carmen. “Distalamiento de caninos: Reacción de
los tejidos peridentarios a las distintas fuerzas ortodóncicas con distintos elementos”.
Revista de la Facultad de Odontología. UNNE. Nº1. (18 -22). 1993.
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