ANEXO D. Cromatogramas Cromatograma a un flujo de 1.5 ml/min Cromatograma a un flujo de 1.0 ml/min Cromatograma fase móvil: 90% agua: 10% acetonitrilo 80 Cromatograma fase móvil: 80% agua: 20% acetonitrilo Cromatograma fase móvil: 70% agua: 30% acetonitrilo Cromatograma fase móvil: 65% agua: 35% acetonitrilo Cromatograma fase móvil: 60% agua: 40% acetonitrilo 81 Los cromatogramas anteriores se obtuvieron sin añadir ácido acético al agua HPLC. El cromatograma con fase móvil de 60% agua y 40% acetonitrilo muestra que la columna se encontraba con residuos de las muestras inyectadas con anterioridad ya que no posee una línea base al iniciar la corrida. Cromatograma 10 g – 100 ml sin dilución Tiempo de retención (min) 1.446 1.800 1.984 2.154 2.333 2.587 Área (µV*sec) 15029834 1575936 2750277 2690396 3413067 5466557 Porcentaje de área 48.6 5.10 8.89 8.70 11.04 17.68 Cromatograma 15 g – 100 ml sin dilución Tiempo de retención (min) 1.445 1.681 2.141 2.490 Área (µV*sec) 32209218 18603352 23606343 11670043 Porcentaje de área 37.41 21.61 27.42 13.56 82 Cromatograma 20 g – 100 ml – sin dilución Tiempo de retención (min) 1.439 1.746 1.986 2.070 2.151 2.342 2.509 Área (µV*sec) 25521979 5522024 4924065 3901716 8232275 2195028 11960672 Porcentaje de área 40.99 8.87 7.91 6.27 13.22 3.53 19.21 Cromatograma 25 g – 80 ml sin dilución Tiempo de retención (min) 1.428 1.683 1.935 2.052 2.250 Área (µV*sec) 3224853 1705957 426926 699294 2632246 Porcentaje de área 37.11 19.63 4.91 8.05 30.29 Cromatograma 25 g – 150 ml sin dilución 83 Tiempo de retención (min) 1.432 1.827 1.982 2.189 2.390 2.582 Área (µV*sec) 30756607 6032211 2657727 11130577 2595380 8308107 Porcentaje de área 50.03 9.81 4.32 18.10 4.22 13.51 Cromatograma 25 g – 200 ml sin dilución Tiempo de retención (min) 1.040 1.439 1.792 2.011 2.195 2.330 2.605 Área (µV*sec) 7619 16677639 2095689 2156374 3274434 3802067 5547964 Porcentaje de área 0.02 46.69 6.24 6.43 9.76 11.33 16.53 Cromatograma 20 g – 100 ml – dilución 50:50 84 Cromatograma 20 g – 100 ml – dilución 25:25 Cromatograma 20 g – 100 ml – dilución 12:12 Cromatograma 10 g – 100 ml- dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.720 2.216 2.912 Área (µV*sec) 394336 240968 32734 Porcentaje de área 59.02 36.07 4.9 85 Cromatograma 15 g – 100 ml – dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.715 2.265 2.930 Área (µV*sec) 594732 370098 63312 Porcentaje de área 57.84 35.99 6.15 Cromatograma 20 g – 100 ml – dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.659 2.234 2.916 Área (µV*sec) 358091 229496 32830 Porcentaje de área 57.71 36.99 5.29 Cromatograma 25 g – 80 ml – dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.670 2.129 2.901 Área (µV*sec) 387388 175066 38195 Porcentaje de área 64.49 29.14 6.35 86 Cromatograma 25 g – 150 ml – dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.640 2.215 2.908 Área (µV*sec) 412291 226840 40020 Porcentaje de área 60.7 33.40 5.89 Cromatograma 25 g – 200 ml – dilución 6:6 Tiempo de retención (min) 1.650 2.209 2.903 Área (µV*sec) 341064 199997 30789 Porcentaje de área 59.64 34.97 5.38 Cromatograma estándar 0.15 mg/ml dilución 6:6 87 Cromatograma estándar 0.15 mg/ml dilución 3:3 Tiempo de retención (min) 1.585 1.797 2.157 Área (µV*sec) 14491 26314 45239 Porcentaje de área 16.84 30.58 52.58 Cromatograma estándar 0.015 mg/ml dilución 3:3 Tiempo de retención (min) 1.611 1.895 2.172 3.350 Porcentaje de área Área (µV*sec) 10061 17006 148292 22479 Cromatograma 25 g – 200 ml con adición de estándar 0.15 mg/ml Tiempo de retención (min) 1.728 2.346 2.992 Área (µV*sec) 126167 114486 7877 Porcentaje de área 50.76 46.06 3.16 88 Cromatograma 25 g – 200 ml con adición de estándar 0.015 mg/ml Tiempo de retención (min) 1.622 1.857 2.239 2.385 3.026 Área (µV*sec) 51806 28160 138179 39877 11767 Porcentaje de área 19.20 10.43 51.21 14.78 4.36 89