Sin título de diapositiva

UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA
PERUANA
INVESTIGACIÓN DE PLANTAS MEDICINALES
HIPOGLUCEMIANTES
ACTIVIDAD HIPOGLUCEMIANTE
ANGULATA
(MULLACA)
Y
FITOQUÍMICA EN IQUITOS
DE PHYSALIS
EVALUACIÓN
Dra. Maritza Grández Ruiz
INTRODUCCION
La diabetes mellitus es una
enfermedad que incapacita al
cuerpo para metabolizar o usar
eficazmente los carbohidratos, las
proteínas y las grasas. Cuando
comemos,
los
alimentos
(especialmente carbohidratos y
frutas) se convierten en glucosa.
Todas las células del cuerpo
necesitan glucosa para vivir, pero
la glucosa no puede penetrar en
las células sin la intervención de la
insulina. La insulina se produce en
las células Beta, que están
ubicadas en el extremo del
páncreas.
Los siguientes gráficos expresan lo que ocurre en las células de
nuestros tejidos en presencia de glucosa, en las diferentes
situaciones metabólicas en las que podemos encontrarnos:
es la glucosa
es la insulina
Cuando la insulina se acopla en los receptores de
insulina de las células, la glucosa puede penetrar a
través de sus membranas y utilizarse. Esta es la
situación normal
Cuando el páncreas no produce insulina, la glucosa no
puede penetrar en las células del cuerpo y utilizarse.
Esta
es
la
llamada
Diabetes
Mellitus
Insulinodependiente (IDDM), o Tipo I.
Cuando los receptores de insulina de las células del
cuerpo no funcionan, la insulina no puede acoplarse a
ellos y la glucosa no puede penetrar en las células
del cuerpo y utilizarse. Esta es la llamada Diabetes
Mellitus No Insulinodependiente (NIDDM), o
Tipo II.
Síntomas y signos de diabetes mellitus
Signos y síntomas mas frecuentes:




Poliuria, polidipsia y polifagia.
Pérdida de peso a pesar de la polifagia.
Fatiga o cansancio.
Cambios en la agudeza visual.
La fatiga ejemplificada en el cuadro rosa es uno de los síntomas de la
hiperglucemia, en el cuadro azul se ejemplifica la pérdida de peso a
pesar del aumento del apetito.
Signos y síntomas menos frecuentes:
 Vaginitis en mujeres, balanitis en hombres.
 Aparición de glucosa en la orina u orina con sabor dulce.
 Ausencia de la menstruación en mujeres.
 Aparición de impotencia en los hombres.
 Dolor abdominal.
 Hormigueo o adormecimiento de manos y pies, piel seca,
úlceras o heridas que cicatrizan lentamente.
 Debilidad.
 Irritabilidad.
 Cambios de ánimo.
 Náuseas y vómitos.
 Aliento con olor a manzanas podridas.
FISIOLOGIA DEL PANCREAS ENDOCRINO
ESTRUCTURA
La unidad anátomo funcional del páncreas endocrino son los
islotes de Langerhans, cuya masa corresponde a 1% del peso
total del órgano. En ellos se sintetizan la insulina (células
beta), el glucagón (alfa) y la somatostatina (delta). Los islotes
tienen una fina red vascular y están dotados de un sistema
venoso tipo portal orientado desde las células beta, hacia las
alfa y delta. Están inervados por el sistema nervioso
autónomo y existen comunicaciones intercelulares.
La Diabetes Mellitus constituye hoy
en día una verdadera epidemia en el
mundo. Las cifras entregadas por la
Organización Mundial
de Salud
muestran que actualmente existen
157 millones de personas con diabetes
y que esta cifra podría duplicarse en
los próximos 10 años.
Las plantas que tienen propiedades
hipoglucemiantes fueron, e incluso en
algunas regiones siguen siendo,
extensamente utilizadas para el
manejo de la diabetes tipo 2. Como la
Karela de la China, el fríjol de racimo
indio, la alholva, la variedad de
agrifolio
usada
por
aborígenes
suramericanos, pasando por el ajo y la
cebolla, que fueron usados en Europa
por largo tiempo
Physalis angulata
(mullaca)
De la Galega officinalis se pudo aislar
un
alcaloide
con
efectos
hipoglucemiantes,
la
galegina.
Actualmente la investigación sobre
plantas antidiabéticas viene siendo
estimulada
por
la
Organización
Mundial de la Salud.
Las
plantas
medicinales
han
demostrado ser una alternativa viable
en este proceso. Por eso es importante
validar y comprobar el conocimiento
etnobotánica que los pobladores de la
región amazónica poseen en el manejo
de las diferentes especies vegetales, en
este caso el uso de Physalis angulata
(mullaca) usado como hipoglucemiante
METODOLOGIA
Es descriptiva porque las hojas, tallo, raíz y toda la planta de
Physalis angulata se sometió a diferentes extracciones con
hexano, etanol y metanol. Con cada uno de los extractos
obtenidos se realizó la evaluación biológica para determinar la
actividad hipoglucemiante. El extracto que presentó mayor
actividad fue sometido a una evaluación fitoquímica para
determinar los metabolitos secundarios responsables de esta
actividad
Es experimental porque la actividad hipoglucemiante fue
determinado por protocolo estandarizado:
 Usamos ratas albinas.
 Evaluación glucémica (método de glucosa oxidasa) antes de
provocar la hiperglucemia.
 Administración de fármacos para provocar reacción
hiperglucemiante.
 Evaluación glucémica después de provocar la reacción
hiperglucemiante.
 Administración de los extractos hexánico, etanólico y
metanólico.
 El tiempo de evaluación fue de: 1 hora; 3; 6; 24
horas.;evaluación toxicológica: Método DL50. Se usó dosis fija
de 2000 mg/kg de peso corporal, por vía oral.
Población:
La población está constituida por:
“Rata albina” Rattus norvegicus cepa
Holtzmann.
Muestra:
El tamaño de la muestra son los
animales seleccionados al azar en una
cantidad de 5 por grupo, totalizando
40 individuos.
Material vegetal: Physalis angulata (Mullaca)
Recolección
de
la
muestra vegetal, se
realizó en el fundo “La
Arboleda” ubicada en
el Km. 41 de la
carretera
IquitosNauta del Caserío exPetrolero.
El fundo “La Arboleda”
está asentada en el
distrito de San Juan
Bautista, en la margen
izquierda del río Itaya,
a una altura de 110 a
125 msnm y con
coordenadas 73º 27´
32,18´´ longitud oeste
y 4º 05´ 48,26´´ latitud
sur.
La
identificación
taxonómica se llevó a
cabo en el Herbario
Amazonense (AMAZ)
de
la Facultad de
Ciencias Biológicas de
la UNAP, siguiendo el
método tradicional de
la mayoría de los
botánicos.
Physalis angulata (Mullaca)
El material animal estuvo constituido por 40 ratas albinas
Rattus norvegicus cepa Holtzmann, de sexo macho, de
aproximadamente 2 meses de edad (adulto – joven) y
procedentes del Centro Nacional de Productos Biológicos
del Instituto Nacional de Salud - MINSA, con sede en la
ciudad de Lima.
Preparación de los
Extractos
 Se recolectaron plantas
adultas,
luego
de
limpiarlas
se
seleccionaron en raíz,
tallo, hojas y toda la
planta.
 Se procedió al licuado
de
las
partes
seleccionadas
por
separado (raíz, tallo,
hojas y toda la planta).
 Las partes licuadas
fueron sometidas a
congelamiento previo a
la liofilización.
BIOENSAYO PARA LA ACTIVIDAD HIPOGLUCEMIANTE
 Selección
de animales
 Distribución
de animales
Grupo I: Control positivo Insulina 5%. (5 machos)
Grupo II: Control negativo Solución salina al 9%. (5 machos)
Grupo III: Extracto metanólico
Subgrupo 1: Dosis 250mg/kg (5 machos)
Subgrupo 2: Dosis 500mg/kg (5 machos)
Grupo IV: Extracto etanólico
Subgrupo 1: Dosis 250mg/kg (5 machos)
Subgrupo 2: Dosis 500mg/kg (5 machos)
Grupo V: Extracto hexánico
Subgrupo 1: Dosis 250mg kg (5 machos)
Subgrupo 2: Dosis 500mg/kg (5 machos)



Pesaje y Marcaje/
Identificación para
registro
Cuarentena (7 días)
Muestra de sangre
Glicemia basal
Método de Glucosa
Oxidasa

Administración
de
Alloxano
(vía
intraperitoneal)
Para
inducir hiperglicemia

Se deja en ayunas con agua “ad libitum” por espacio
de 48 horas.

Muestra de sangre, para evaluar
hiperglicemia (valor mínimo 100 mg/dL)
el
índice
de

Control positivo (insulina 5%)
via subcutanea

Control
negativo
fisiológico 9%)

Se administraron los extractos
hexánico, etanólico y metanólico
(suero
(intubación intragástrica)
En dosdis de 250 mg/Kg y 500 mg/Kg

La evaluación se tomó a 1 hora,
3 horas, 6 horas y 24 horas.
Evaluación Metabólitos Secundarios
METABÓLITOS SECUNDARIOS
PRUEBAS
- Alcaloides
- Reactivo de Dragendorff.
- Cardiotónicos
- Reactivo de Baljet.
- Análisis por TLC y revelado
con KOH al 5% en etanol
- Reacción con HCl, en
- Cumarinas volátiles
presencia
- Flavonoides
- Taninos
- Saponinas
- Triterpenos y/o esteroides
- Derivados antracénicos libres
(Quinonas)
de
magnesio
metálico.
- Reacción con cloruro férrico
al 10%
- Por agitación vigorosa en
agua caliente
- Reacción de Liebermann Burchard
- Reacción de Bontraeger
- Reacción de ninhidrina al
RESULTADOS
Obtención de los extractos de la especie vegetal
El rendimiento obtenido de los productos son:
Hojas
: 6,8 %
Tallos
: 5,0 %
Raíz
: 7,0 %
Toda la Planta
: 6,3 %
GRUPO DE TRATAMIENTO N° 01
Actividad hipoglucemiante del control positivo (insulina 5%)
RATA
1
2
3
4
5
PESO
(gr)
220
220
200
205
215
GLICEMIA
ALOXANO
BASAL
HIPERGLICEMIA
mg/dl
48 hr
86,7
486
96,6
568
78,8
470
89,0
464
89,5
556
1hr
185
115
276
158
141
INSULINA 5 %
GLICEMIA (mg/dl)
3 hrs
6hrs
24hrs
105
20
18
100
30
35
113
35
32
83
33
35
40
33
29
GRUPO DE TRATAMIENTO N° 02
Actividad hipoglucemiante del control negativo (suero fisiológico 9%)
GLICEMIA
ALOXANO
SUERO FISIOLOGICO (9 %)
PESO
BASAL
HIPERGLICEMIA
GLICEMIA (mg/dl)
RATA
(gr)
mg/dl
48 hr
1hr
3 hrs
6hrs 24hrs
1
270
109,9
411
720
753
766
552
2
225
102,8
539
722
878
428
--3
255
96,7
543
942
1046
996
--4
245
98,9
476
707
979
1079
--5
240
95,2
232
424
413
513
---
GRUPO DE TRATAMIENTO N° 03
Actividad hipoglucemiante del extracto etanólico
GRUPO
I
Dosis
250
mg/k
II
Dosis
500
mg/k
PESO
(g)
GLICEMIA
BASAL
(mg/dL)
1
215
81.2
2
225
3
RATA
EXTRACTO ETANÓLICO
HIPERGLICEMIA
(ALOXANO)
48 hrs.
GLICEMIA (mg/dL)
1 hr.
3hrs.
6hrs.
24hrs.
532
501 201
341
350
70.3
528
450 223
100
122
235
72.2
673
131 106
103
150
4
215
64.4
739
402 350
201
101
5
6
190
190
54.0
72.5
119
430
112 127
219 168
106
108
125
195
7
198
85.0
565
307 183
136
210
8
220
84.0
775
436 209
110
150
9
230
83.0
630
266 197
112
130
10
220
69.3
298
131 108
105
101
GRAFICO COMPARATIVO
Evaluación de metabólitos secundarios.
La evaluación de metabólitos secundarios, se realizó mediante
pruebas fitoquímicas de caracterización, dando los siguientes
resultados
Metabolitos
Secundarios
Alcaloides
Cardiotónicos
Pruebas
- Reactivo de Dragendorff.
Raíz
+
- Reactivo de Baljet.
+++
- Análisis por TLC y revelado con
Cumarinas volátiles
+++
KOH al 5% en etanol
- Reacción con HCl, en presencia de
Flavonoides
+
magnesio metálico.
Taninos
- Reacción con cloruro férrico al 10% + + +
- Por agitación vigorosa en agua
Saponinas
–
caliente
Triterpenos y/o
-Reacción de Liebermann-Burchard
+++
esteroides
Derivados
antracénicos libres - Reacción de Bontraeger
+ + + : Muy abundante
+
: Poco
+++
+ + : (Quinonas)
Abundante
–
: Nada
- Reacción de ninhidrina al 5% en
CONCLUSIONES
 El extracto etanólico de la raíz de Physalis
angulata es el que presentó mayor actividad
hipoglucemiante.
 A dosis límite el extracto etanólico es inocuo.
 La dosis terapéutica está por debajo de 2000
mg/Kg de peso corporal.
GRUPO DE INVESTIGACION