Obtención de hipocampo humano en condiciones óptimas para la realización de impregnación argéntica de Golgi. Gómez E.1, Rodal I.1, Pastor A.1, Llorens-Martín M.2,3, Rábano A.1 1 Banco de Tejidos de la Fundación CIEN (BT-CIEN), Madrid Centro de Biología Molecular Severo Ochoa (CSIC-UAM), Madrid 3 Centro de Investigación Biomédica en Red sobre Enfermedades Neurodegenerativas (CIBERNED, ISCIII), Madrid 2 La impregnación argéntica de Golgi es un procedimiento histológico muy efectivo para revelar la morfología neuronal completa en tres dimensiones, así como de la glía. Se fundamenta en la formación de depósitos opacos intracelulares de cromato argéntico, producto de la reacción entre dicromato potásico y nitrato de plata (reacción negra). Presentamos un protocolo de obtención de muestras de tejido cerebral post-mortem adecuado para la realización de la técnica. Este protocolo se utiliza en el BT-CIEN cuando se solicitan muestras al Biobanco específicamente con este fin. Para realizar esta técnica histológica, el cerebro humano post-mortem debe ser extraído tan rápido como sea posible, pero a su vez manipulado con cuidado para evitar daños en el tejido. Una vez extraído el cerebro, se toma, en fresco, un bloque de hipocampo (o de otra región cerebral), de un grosor aproximado de 10mm, del hemiencéfalo derecho (el izquierdo es para diagnóstico). Tras un aclarado en agua bidestilada, se introduce el hipocampo en varias soluciones, dejándolo incubar para su impregnación. Luego se contrasta con violeta de cresilo y finalmente se hacen cortes en vibratomo de 150µm. Para la realización de la técnica el proceso debe ser muy escrupuloso desde la toma de la muestra hasta el final de la tinción. Se destaca la importancia de la no utilización de instrumentos metálicos en los pasos en los que están presentes la solución A y B, así como de la protección de la luz siempre y cuando sea posible, ya que puede ocasionar precipitados. Utilizando esta técnica, se aprecian alteraciones sutiles en la morfología de las dendritas neuronales y en las espinas dendríticas en cerebros post-mortem de pacientes con enfermedades neurológicas. Gracias a que sólo se tiñen un número restringido de neuronas, es posible seguir sus prolongaciones con mayor facilidad y observar con claridad las espinas dendríticas.