fibrosis y cambios en la distribución de actina en pleuropneumonía

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FIBROSIS Y CAMBIOS EN LA
DISTRIBUCIÓN DE ACTINA EN
PLEUROPNEUMONÍA PORCINA
CRÓNICA.
C.A. BAUTISTA-VILLALPANDO1,2, C.K. PRIETO1,2, K.N.
ALVARADO2,3, F.J. AVELAR4, M. CONSOLACIÓN2, A.L.
GUERRERO-BARRERA2.
Universidad Autónoma de Aguascalientes.
INTRODUCCIÓN
La pleuropneumonia porcina (PP) es una
enfermedad distribuida a nivel mundial causada
por Actinobacillus pleuropneumoniae (Ap). Ap
tiene dos biotipos de acuerdo a los requerimientos
de NAD para su crecimiento (Gerhardt, 1994;
Haesebrouck, 1997). En México el biotipo 1
serotipo 1 y 5 son los mas comunes (Williams,
2000) mientras que para el biotipo 2 no se ha
reportado. Esta enfermedad tiene diferentes fases;
aguda y subaguda son las mas estudiadas. Jensen
(1999) reporta fibrosis en la fase aguda de la
enfermedad, traducida a un aumento en fibras
elásticas. En la fase crónica, los cerdos muestran
una tos constante y disminución en los parámetros
de crecimiento. En las lesiones crónicas una capa
gruesa granular delimita áreas de necrosis
pulmonar (Hamer-Barrera,2004 ), en esta fase Ap
se ha aislado de amígdalas y pulmones de cerdo
(Jobert, 2000).
OBJETIVO
Describir el daño fibrotico pulmonar en cerdos
portadores
crónicos
de
Actinobacillus
pleuropneumoniae.METODOLOGÍA
Las muestras de pulmón infectado fueron
obtenidas del rastro municipal de San Francisco
de los Romo, Aguascalientes. .Estas muestras
fueron de cincuenta cerdos. Partes de las muestras
fueron usadas para aislar Ap, mientras que otra
parte fue fijada en formalina neutra al 10% y
procesada por técnicas histológicas, para obtener
cortes de 5 µm. Se realizaron en los cortes
obtenidos,
tinciones
histológicas
como
Hematoxilina-Eosina, tricrómica de Masson,
fibras reticulares por el método de Wilder y
marcaje por fluorescencia con faloidina Alexa594.
La
bacteria
fue
reconocida
por
inmunohistoquímica en las lesiones, usando un
suero de cerdo convaleciente. Las observaciónes
fueron realizadas con microscopio Axioscop
40/40Fl Zeiss y las imágenes fueron capturadas
con el software Cool Snap Pro, Image pro Plus
1.
Estudiante de Maestría en Ciencias Morfológicas. UAA.
Departamento de Morfología. UAA.
3
Estudiante de noveno semestre de la carrera de Biología.
UAA.
4
Departamento de Fisiología. UAA.
2
(Media-Cybernetics). Ap fue aislado de muestras
en agar sangre en presencia de Staphylococcus
aureus. La cepa aislada fue independiente de
NAD para su crecimiento y fue caracterizada
bioquímicamente empleando el kit Api
(Biomériéux). Para corroborar la identidad de la
bacteria se realizo PCR con oligonucleotido Apx
IV.
RESULTADOS
PP crónica fue detectada en el estado de
Aguascalientes. Cincuenta casos fueron usados
para el aislamiento del agente causal. La sepa
aislada fue independiente de NAD como factor de
crecimiento e identificada por prueba bioquímica
Api Ne. Se observo con tinción histológica
Hematoxilina-eosina, infiltrado linfático asociado
al engrosamiento del tabique interalveolar y
linfocitos alrededor del bronquiolo. Daño a nivel
de epitelio bronquilolar fue observado. El
infiltrado linfático fue mayormente compuesto por
neutrófilos alveolares y macrofagos. Ap fue
reconocida en las lesiones asociado al epitelio
bronquilar y su intersticio. Usando histoquímica
de Masson y Wilder, fue identificada fibrosis por
fibras colágenas y elásticas. Usando marcaje por
fluorescencia con faloidina Alexa594, fue
detectado en epitelio bronquiolar, cambios en la
distribución de los filamentos de actina asociada
con daño crónico por Ap.
CONCLUSIONES
Se detecto pleuroneumonía porcina crónica en
Aguascalientes, México. De los casos detectados
se confirma la identidad de la bacteria mediante
pruebas bioquímicas. De las muestras obtenidas se
realizaron tinciones de hemtoxilina y eosina, para
observar los daños a nivel de tejido. El daño
encontrado fue a nivel de epitelio alveolar por un
engrosamiento de los tabiques interalveolares,
infiltración de células del sistema inmune así
como hemorragia intersticial y exudado edema
fibroso. Por la tinción de Masson y Wilder se
observó el incremento en fibras de colágena. Se
detectaron cambios en el citoesqueleto de
microfilamentos con el marcaje de faloidina
fluorescente.
BIBLIOGRAFÍA
Gerhardt ASM ,Washington D.C. pp. 104-132.
Haesebrouck, F. Vet. Microbiol. 58: 239-249.
Hamer-Barrera. Can J Vet Res. 68: 33-41.
Jensen. Vet. Pathol. 36: 258-261.
Jobert, J.L.Vet Res. 64(1):21-6.
Williams, J,J. Rev Biomed. 11:175-18.
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