IRAC 2013 CLASIFICACIÓN, MICROMANIPULACIÓN Y CONGELADO DE

IRAC
2013
Espec
CLASIFICACIÓN, MICROMANIPULACIÓN Y CONGELADO DE
EMBRIONES BOVINOS
Fecha: 15/10/2013___
Nombre y Apellido: Andrea Bianchi______
Objetivo:
1. Transferir lo estudiado a lo largo del curso en la resolución de las actividades
presentadas.
Criterios de evaluación:
1. Manejo conceptual, nivel de profundización y capacidad para establecer
relaciones.
2. Capacidad crítica y posibilidad de realizar análisis personales.
3. Integración y transferencia de lo estudiado a situaciones concretas.
1. Observe las fotografías de embriones y en base al Sistema de
Evaluación de embriones de la Sociedad Internacional de Embriones
(IETS) haga una clasificación de los embriones según:
a. el estadio de desarrollo
b. la Calidad (grado 1,2,3,4).
c. Explique para cada fotografía la/s característica/s que tuvo en
cuenta para calificar los embrión.
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: 4 Mórula
Calidad: grado 1. Bueno
Características: zona pelúcida gruesa, la masa celular parece una
mora, posee mas del 85% de la masa celular intacta.
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: 4. Mórula
Calidad: grado 2. Regular
Características: entre 50 y 84% de masa celular intacta
IRAC
2013
Espec
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: Mórula compacta
Calidad: grado 1. Excelente
Características: más del 85% de masa celular intacta
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: 4. Mórula
Calidad: Grado 2. Regular
Características: posee entre 50 y 84% de masa celular intacta.
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: 4. Mórula
Calidad: Grado 2. Regular
Características: posee entre 50 y 84% de masa celular intacta
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: 1. Infertilizado
Calidad:
Características: masa de aspecto granular, rodeado por una masa
perivitelina lisa.
IRAC
2013
Espec
a.
b.
c.
estadio de desarrollo: Degenerado
Calidad:
Características: masa celular no definida
2. Realice una comparación entre el método de congelado y la
vitrificación de embriones teniendo en cuenta: medios de congelado,
toxicidad, curva de congelado, método de descongelado y practicidad
(costos, entrenamiento, etc.).
Congelación lenta: intenta mantener un balance delicado entre diversos
factores tales como la formación de hielo, el daño osmótico, la alteración del
citoesqueleto, el efecto toxico de los crioprotectores, las concentraciones
intracelulares de electrolitos, las injurias causadas por el frío, la fractura de la
zona pelúcida y el contacto célula-célula.
Vitrificación: puede incrementar la probabilidad de algunas formas de injuria,
pero elimina totalmente los daños mecánicos causados por la formación de
cristales de hielo tanto intra como extracelular, siendo ésta la mayor causa de
muerte celular.
Medios de congelado:
Congelación lenta: La criopreservacion convencional involucra el uso de
glicerol o etilenglicol.
Vitrificación: El congelado rápido o la vitrificación pueden ser llevadas a cabo
mezclando crioprotectores como el glicerol y etilenglicol, glicerol y propanediol
o etilenglicol y propanediol, combinados con sacarosa, tetralosa o galactosa
Toxicidad:
Congelación lenta: al manejarse niveles más bajos de concentración de los
crioprotectores la toxicidad es mucho menor que en el caso de la vitrificación.
Vitrificación: la utilización altas concentraciones de los crioprotectores
involucra una alta toxicidad por lo que se busca un manejo mucho más rápido
en el proceso, se han asociado uno o más crioprotectores para disminuir el
nivel de toxicidad
Curva de congelado:
Congelación lenta: descenso controlado de la temperatura de (0,3 a 1
°C/min), hasta los -35%, para luego ser sumergido en Nitrógeno liquido
Vitrificación: curva de enfriamiento más rápida a una tasa de 2500°C/min
Método de descongelado:
Congelación lenta: Con el Etilenglicol la tasa de descongelación es
relativamente rápida, (aproximadamente a 250°C/min) para evitar la
recristalización. Se colocan los embriones en agua a 30°C por 30 segundos
Vitrificación: el descongelado debe ser rápido generalmente a 37°C en baño
María durante 20 segundos
IRAC
Espec
2013
3. Enumere al menos 3 factores importantes para la obtención de
preñeces a partir de la transferencia de embriones micro manipulados
(hemi-embriones)
1- Destinar a la micromanipulación solamente aquellos embriones de
excelente y buena calidad.
2- Se obtienen mejores resultados con mórulas
3- A medida que la diferencia de tamaño de los 2 hemiembriones se
amplía, la tasa de preñez se reduce.